Summary
यहां प्रस्तुत विलायक-सहायता प्राप्त स्वाद वाष्पीकरण और विलायक निष्कर्षण का उपयोग करके चाय के अर्क के वाष्पशील घटकों को समृद्ध और विश्लेषण करने के लिए एक विधि है, जिसके बाद गैस क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री है, जिसे सभी प्रकार के चाय के नमूनों पर लागू किया जा सकता है।
Abstract
चाय की गुणवत्ता में चाय की सुगंध एक महत्वपूर्ण कारक है, लेकिन चाय निकालने के वाष्पशील घटकों की जटिलता, कम एकाग्रता, विविधता और व्यवहार्यता के कारण विश्लेषण करना चुनौतीपूर्ण है। यह अध्ययन गैस क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री (जीसी-एमएस) के बाद विलायक-सहायता प्राप्त स्वाद वाष्पीकरण (एसएएफई) और विलायक निष्कर्षण का उपयोग करके गंध संरक्षण के साथ चाय निकालने के वाष्पशील घटकों को प्राप्त करने और विश्लेषण करने के लिए एक विधि प्रस्तुत करता है। सेफ एक उच्च-वैक्यूम आसवन तकनीक है जो किसी भी गैर-वाष्पशील हस्तक्षेप के बिना जटिल खाद्य मैट्रिक्स से वाष्पशील यौगिकों को अलग कर सकती है। चाय सुगंध विश्लेषण के लिए एक पूर्ण चरण-दर-चरण प्रक्रिया इस लेख में प्रस्तुत की गई है, जिसमें चाय जलसेक तैयारी, विलायक निष्कर्षण, सुरक्षित आसवन, निकालने की एकाग्रता और जीसी-एमएस द्वारा विश्लेषण शामिल है। इस प्रक्रिया को दो चाय के नमूनों (हरी चाय और काली चाय) पर लागू किया गया था, और चाय के नमूनों की अस्थिर संरचना पर गुणात्मक और मात्रात्मक परिणाम प्राप्त किए गए थे। इस विधि का उपयोग न केवल विभिन्न प्रकार के चाय के नमूनों के सुगंध विश्लेषण के लिए किया जा सकता है, बल्कि उन पर आणविक संवेदी अध्ययन के लिए भी किया जा सकता है।
Introduction
चाय दुनिया भर में कई लोगों का पसंदीदा पेय है 1,2. चाय की सुगंध एक गुणवत्ता मानदंड के साथ-साथ चाय की पत्तियों के लिए मूल्य-निर्धारण कारकभी है। इस प्रकार, चाय की सुगंध संरचना और सामग्री का विश्लेषण आणविक संवेदी अध्ययन और चाय के गुणवत्ता नियंत्रण के लिए बहुत महत्व रखता है। नतीजतन, सुगंध संरचना विश्लेषण हाल के वर्षों में चाय अनुसंधान में एक महत्वपूर्ण विषयरहा है 5,6,7.
चाय में सुगंध घटकों की सामग्री बहुत कम है, क्योंकि वे आम तौर पर चायकी पत्तियों के सूखे वजन का केवल 0.01% -0.05% होते हैं। इसके अलावा, नमूना मैट्रिक्स में गैर-वाष्पशील घटकों की बड़ी मात्रा गैस क्रोमैटोग्राफी 9,10 द्वारा विश्लेषण में काफी हस्तक्षेप करती है। इसलिए, चाय में वाष्पशील यौगिकों को अलग करने के लिए एक नमूना तैयार करने की प्रक्रिया आवश्यक है। अलगाव और संवर्धन विधि के लिए महत्वपूर्ण विचार मैट्रिक्स हस्तक्षेप को कम करना है और साथ ही, नमूने के मूल गंध प्रोफ़ाइल के संरक्षण को अधिकतम करना है।
विलायक-सहायता प्राप्त स्वाद वाष्पीकरण (SAFE), मूल रूप से एंगेल, बहर और शिबेरले द्वारा विकसित, एक बेहतर उच्च-वैक्यूम आसवन तकनीक है जिसका उपयोग जटिल खाद्य मैट्रिक्स11,12 से वाष्पशील यौगिकों को अलग करने के लिए किया जाता है। एक उच्च-वैक्यूम पंप (5 x 10−3 पीए के विशिष्ट ऑपरेटिंग दबाव के तहत) से जुड़ी एक कॉम्पैक्ट ग्लास असेंबली विलायक अर्क, तैलीय खाद्य पदार्थों और जलीय नमूनों से वाष्पशील यौगिकों को कुशलतापूर्वक एकत्र कर सकती है।
इस लेख में एक विधि का वर्णन किया गया है जो काली चाय जलसेक से वाष्पशील पदार्थों को अलग करने के लिए विलायक निष्कर्षण के साथ सेफ तकनीक को जोड़ती है, इसके बाद जीसी-एमएस का उपयोग करके विश्लेषण किया जाता है।
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Protocol
1. आंतरिक मानक और चाय जलसेक की तैयारी
- स्टॉक समाधान: आंतरिक मानक के 1,000 पीपीएम स्टॉक समाधान तैयार करने के लिए निर्जल इथेनॉल के 10.0 मिलीलीटर में 10.0 मिलीग्राम पैराक्सीलीन-डी 10 ( सामग्री की तालिका देखें) को भंग करें।
- कार्य समाधान: आंतरिक मानक के 10 पीपीएम कामकाजी समाधान तैयार करने के लिए शुद्ध पानी के साथ स्टॉक समाधान (चरण 1.1) के 1 एमएल को 100 एमएल तक पतला करें।
नोट: कार्य समाधान विश्लेषण के रूप में उसी दिन तैयार किया जाना चाहिए। - 3 ग्राम चाय की पत्तियों (हरी चाय और काली चाय दोनों के लिए, सामग्री की तालिका देखें) को एर्लेनमेयर फ्लास्क में रखें, और 150 एमएल उबलते पानी जोड़ें। फ्लास्क को ग्लास स्टॉपर से ढक दें।
- 5 मिनट के बाद, जल्दी से 300-जाल छलनी के माध्यम से चाय जलसेक को छान लें।
- खर्च की गई चाय की पत्तियों को 30 मिलीलीटर पानी के साथ दो बार धोएं, और चाय जलसेक के साथ धोने के घोल को मिलाएं।
- बर्फ के पानी के स्नान में कमरे के तापमान पर चाय जलसेक को जल्दी से ठंडा करें।
- चाय जलसेक में 1.00 मिलीलीटर कार्यशील समाधान (चरण 1.2) जोड़ें, और उन्हें अच्छी तरह मिलाएं।
2. डिस्टिलेट के सुरक्षित और तरल-तरल निष्कर्षण द्वारा चाय जलसेक का आसवन
- नीचे दिए गए चरणों का पालन करके सेफ असेंबली तैयार करें।
- सेफ असेंबली (चित्रा 1) स्थापित करें, और निचले बाईं ओर आसवन बोतल (चित्रा 1[3]) और निचले दाईं ओर संग्रह बोतल को कनेक्ट करें (चित्रा 1[4])। सेफ ग्लास असेंबली के पीछे परिसंचारी पानी ट्यूब को कनेक्ट करें। कोल्ड ट्रैप स्थापित करें (चित्रा 1[5]), और ट्यूब को वैक्यूम पंप (सामग्री की तालिका देखें) से ग्लास असेंबली के ऊपरी दाईं ओर कनेक्ट करें।
नोट: परिसंचारी पानी ट्यूब के कनेक्शन की जांच करें; सुनिश्चित करें कि इनलेट शीर्ष में प्रवेश करता है और आउटलेट नीचे से बाहर निकलता है। सेफ असेंबली में सफेद ट्यूब को अवरुद्ध करने से स्केल को रोकने के लिए परिसंचरण के लिए विआयनीकृत पानी का उपयोग करें, जिसके परिणामस्वरूप परिसंचारी पानी का खराब परिसंचरण होगा और सेफ असेंबली का अंतिम विस्फोट होगा। आसवन तल (चित्रा 1[3]) को नमूने के वाष्पीकरण की सुविधा के लिए एक सरगर्मी पट्टी द्वारा हिलाया जा सकता है। - परिसंचारी पानी का तापमान 50 डिग्री सेल्सियस और नमूना फ्लास्क के लिए पानी के स्नान का तापमान 40 डिग्री सेल्सियस पर सेट करें। वैक्यूम वाल्व बंद करें (चित्रा 1[2])।
- सेफ असेंबली (चित्रा 1) स्थापित करें, और निचले बाईं ओर आसवन बोतल (चित्रा 1[3]) और निचले दाईं ओर संग्रह बोतल को कनेक्ट करें (चित्रा 1[4])। सेफ ग्लास असेंबली के पीछे परिसंचारी पानी ट्यूब को कनेक्ट करें। कोल्ड ट्रैप स्थापित करें (चित्रा 1[5]), और ट्यूब को वैक्यूम पंप (सामग्री की तालिका देखें) से ग्लास असेंबली के ऊपरी दाईं ओर कनेक्ट करें।
- वैक्यूम पंप ऑपरेशन करें।
- वैक्यूम पंप पर बिजली।
- धीरे-धीरे गति को 100% की अधिकतम गति तक बढ़ाएं।
नोट: यदि गति 100% तक नहीं पहुंचती है, तो जांचें कि क्या सिस्टम एयरटाइट है और क्या सिस्टम के अंदर विलायक अवशेष हैं। - एक उच्च वैक्यूम तक पहुंचने के बाद (अधिमानतः 10-3 पीए)।
नोट: जब तरल नाइट्रोजन को ठंडे जाल में जोड़ा जाता है तो वैक्यूम में सुधार होगा।
- नमूना आसवन करें।
- जल परिसंचरण शुरू करें।
- इकट्ठा करने वाली बोतल के बाहर को कवर करने के लिए ठंडे जाल में तरल नाइट्रोजन जोड़ें।
- चाय जलसेक को शीर्ष बाईं ओर नमूना फ़नल में डालें (चित्र 1[1]), और फिर इसे ग्लास स्टॉपर के साथ कवर करें।
- नमूने को आसवन फ्लास्क ड्रॉपवाइज में पेश करें। नमूना ड्रॉप गति को नियंत्रित करें ताकि वैक्यूम को लगभग 10−3 पीए की उचित सीमा में रखा जाए।
नोट: यह सुनिश्चित करने के लिए प्रक्रिया के दौरान तरल नाइट्रोजन जोड़ें कि सही एकत्र करने वाली बोतल हमेशा तरल नाइट्रोजन में डूबी हुई है। ठंडे जाल में घनीभूत गठन से बचने की कोशिश करें।
- आसवन पूरा होने के बाद वैक्यूम पंप बंद कर दें।
- पावर स्विच दबाएँ। जब "STOP" चमकता है, तो पुष्टि करने के लिए Enter कुंजी दबाएँ।
- जब आणविक पंप की गति "0" तक कम हो जाती है तो पावर कॉर्ड को अनप्लग करें।
नोट: केवल तभी पुनरारंभ करें जब गति "0" तक कम हो जाती है।
- सिस्टम को वायुमंडलीय दबाव में पुनर्स्थापित करें।
- नमूना बोतल के ऊपर पीसने वाले प्लग को हटा दें।
- सिस्टम को वायुमंडलीय दबाव में बहाल करने के लिए वैक्यूम वाल्व के नॉब को धीरे-धीरे अनस्क्रू करें।
- नमूने के साथ एकत्र करने वाली बोतल को नीचे ले जाएं।
- सिस्टम को वायुमंडलीय दबाव में पुनर्प्राप्त करने के बाद संग्रह बोतल के बाहर तरल नाइट्रोजन को हटा दें।
- संग्रह बोतल को धीरे-धीरे खोलें। नमूने के साथ एकत्र करने वाली बोतल को सावधानी से नीचे ले जाएं।
- परिसंचारी पानी को बंद करें।
- सेफ डिस्टिलेट का तरल-तरल निष्कर्षण करें।
- बोतल में सेफ डिस्टिलेट को कमरे के तापमान पर गर्म होने दें।
- 50 एमएल डाइक्लोरोमेथेन के साथ तीन बार सेफ डिस्टिलेट निकालें ( सामग्री की तालिका देखें)।
- डाइक्लोरोमेथेन परतों को मिलाएं। निर्जल सोडियम सल्फेट के साथ अर्क को सुखाएं ( सामग्री की तालिका देखें)।
नोट: विलायक में निर्जल सोडियम सल्फेट को पर्याप्त सूखा माना जाता है जब यह अब सीमेंटेड नहीं होता है और स्वतंत्र रूप से बह सकता है। - एक कोमल नाइट्रोजन धारा का उपयोग करके अर्क को लगभग 2 एमएल तक केंद्रित करें।
- 1-2 एमएल की नमूना शीशी में स्थानांतरित करें, और आगे एक कोमल नाइट्रोजन स्ट्रीम का उपयोग करके 200 μL पर ध्यान केंद्रित करें।
3. जीसी-एमएस विश्लेषण और डेटा प्रोसेसिंग
- फ्यूज्ड सिलिका केशिका स्तंभों से लैस जीसी-एमएस सिस्टम (चित्रा 2) का उपयोग करके प्रोटोकॉल अनुभाग 2 में तैयार सुगंध सांद्रता का विश्लेषण करें ( सामग्री की तालिका देखें)।
- 40 सेमी / सेकंड के रैखिक वेग के साथ वाहक गैस के रूप में हीलियम का उपयोग करें।
- स्प्लिटलेस इंजेक्शन मोड में कंसंट्रेट के 3 μL इंजेक्ट करें।
- जीसी ओवन तापमान कार्यक्रम सेट करें: (1) 5 मिनट के लिए 40 डिग्री सेल्सियस पर पकड़ो; (2) 5 डिग्री सेल्सियस / मिनट पर 200 डिग्री सेल्सियस तक बढ़ाएं; (3) 10 डिग्री सेल्सियस / मिनट पर 280 डिग्री सेल्सियस तक बढ़ाएं; (4) 10 मिनट के लिए 280 डिग्री सेल्सियस पर पकड़ो।
- 70 ईवी पर 30 मीटर / जेड से 350 मीटर / जेड तक द्रव्यमान स्कैन रेंज के साथ सकारात्मक ईआई मोड13 में मास सेलेक्टिव डिटेक्टर संचालित करें।
- ऑटोमेटेड मास स्पेक्ट्रल डीकन्वोल्यूशन एंड आइडेंटिफिकेशन सिस्टम (एएमडीआईएस, सामग्री की तालिका देखें) का उपयोग करके जीसी-एमएस डेटा को डीकॉन्वोल्यूट करें।
- एनआईएसटी (नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ स्टैंडर्ड एंड टेक्नोलॉजी) 17 मास स्पेक्ट्रोमीटर सर्च प्रोग्राम3 का उपयोग करके डीकॉन्वोल्यूशन के बाद डेटा का मिलान करें और अर्हता प्राप्त करें।
- समान जीसी स्थितियों के तहत एन-अल्केन्स (सी 5-सी 25, सामग्री की तालिका देखें) के एक सेट के परिणाम के आधार पर यौगिकों के अवधारण सूचकांक14 की गणना करें।
- द्रव्यमान और अवधारण सूचकांक के एक साथ मिलान के आधार पर एनआईएसटी मास स्पेक्ट्रोमेट्री लाइब्रेरी और अवधारण सूचकांक डेटाबेस का उपयोग करके जीसी चोटियों की पहचान करें।
- टीआईसी (कुल आयन क्रोमैटोग्राफी) शिखर क्षेत्र का उपयोग करके आंतरिक मानक के सापेक्ष सुरक्षित नमूने में प्रत्येक वाष्पशील घटक की एकाग्रता की गणना करें।
- चाय जलसेक की तैयारी से शुरू करते हुए, विश्लेषण को तीन बार दोहराएं।
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Representative Results
ऊपर वर्णित विश्लेषणात्मक प्रक्रिया को काली चाय और हरी चाय के नमूनों के सुगंध विश्लेषण के उदाहरण का उपयोग करके इस खंड में चित्रित किया गया है।
एक प्रतिनिधि जीसी-एमएस क्रोमैटोग्राम चित्रा 3 में दिखाया गया है। चित्रा 3 ए एन-अल्केन्स का एक सेट दिखाता है, और चित्रा 3 बी एक आंतरिक मानक की प्रोफ़ाइल दिखाता है। हरी चाय और काली चाय के नमूनों से अर्क के लिए मूल्यांकन परिणाम क्रमशः चित्रा 3 सी और चित्रा 3 डी में दिखाए गए हैं। आंतरिक मानकों का विश्लेषण करके, एक स्थिर आधार रेखा के साथ एक निश्चित शिखर का पता लगाया जा सकता है (चित्रा 3 बी)। जीसी क्रोमैटोग्राम कुल आयन गिनती के बाद हरी चाय और काली चाय जलसेक अर्क से प्राप्त पूर्ण जीसी प्रोफाइल दिखाता है।
प्रतिधारण सूचकांक के साथ संयुक्त मास स्पेक्ट्रोमेट्री मिलान द्वारा हरी चाय और काली चाय के नमूनों में कुल 104 सुगंध यौगिकों की पहचान की गई थी। सापेक्ष परिमाणीकरण की गणना आंतरिक मानक के सापेक्ष यौगिक के चरम क्षेत्र द्वारा की गई थी। गुणात्मक और मात्रात्मक परिणामों के अनुसार तैयार किया गया गर्मी मानचित्र, हरी चाय और काली चाय के नमूनों के लिए आंतरिक मानक के सापेक्ष सुगंध यौगिक सामग्री दिखाता है (चित्रा 4)।
चित्र 1: SAFE सिस्टम का योजनाबद्ध आरेख। (1) नमूना संग्रह के लिए नमूना बोतल। (2) वैक्यूम वाल्व; नमूने जोड़ने से पहले सिस्टम को बंद रखा जाना चाहिए, और नमूने के ड्रॉप प्रवाह को उचित रूप से समायोजित किया जाना चाहिए। (3) नमूना आसवन के लिए आसवन बोतल। (4) आसुत नमूने के संग्रह के लिए संग्रह बोतल। (5) संग्रह बोतल द्वारा एकत्र नहीं किए गए नमूनों की वसूली के लिए और विलायक को वैक्यूम पंप में प्रवेश करने से रोकने के लिए ठंडा जाल। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्र 2: जीसी-एमएसडी प्रणाली का योजनाबद्ध आरेख। एमएस सिस्टम (1) एक मल्टी-मोड इंजेक्शन पोर्ट, (2) एक फ्लो कंट्रोल मॉड्यूल (पीसीएम) से लैस है जो हीलियम वाहक प्रवाह को नियंत्रित करता है, (3) एक 60 मीटर x 0.25 मीटर x 0.25 मीटर 5 एमएस केशिका कॉलम, और (4) एक जीसी कॉलम ओवन। इंजेक्शन के नमूने में चाय के अर्क को जीसी कॉलम में अलग किया जाता है, जिसके माध्यम से वाहक गैस बहती है और ओवन का तापमान बढ़ जाता है। घटकों को एक ईआई आयन स्रोत द्वारा आयनित किया जाता है और फिर एक द्रव्यमान विश्लेषक में विश्लेषण किया जाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्रा 3: एक सफल जीसी-एमएस विश्लेषण से विशिष्ट कुल आयन क्रोमैटोग्राम। (ए) एन-अल्केन्स का क्रोमैटोग्राम। सभी एन-अल्केन चोटियों को संबंधित कार्बन संख्या को सौंपा गया है। (बी) आंतरिक मानक का क्रोमैटोग्राम (पैराक्सीलीन-डी 10)। (सी) हरी चाय जलसेक की प्रतिनिधि सुगंध प्रोफ़ाइल। (डी) काली चाय जलसेक की प्रतिनिधि सुगंध प्रोफ़ाइल। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्रा 4: काली चाय (बीटी) और हरी चाय (जीटी) नमूनों में पहचाने गए 104 सुगंध यौगिकों का हीटमैप। गर्मी मानचित्र के दाईं ओर रंग नोट के बगल में संख्या यौगिक की सामग्री (आंतरिक मानक के सापेक्ष) को इंगित करती है। रंग की गहराई पदार्थ सामग्री के स्तर को इंगित करती है; रंग जितना गहरा होगा, सापेक्ष सामग्री उतनी ही अधिक होगी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
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Discussion
यह आलेख SAFE और GC-MS विश्लेषण का उपयोग करके चाय के जलसेक में वाष्पशील यौगिकों का विश्लेषण करने के लिए एक कुशल विधि का वर्णन करता है।
चाय जलसेक में गैर-वाष्पशील घटकों की उच्च सामग्री के साथ एक जटिल मैट्रिक्स होता है। चाय के जलसेक से वाष्पशील घटकों को अलग करने के लिए साहित्य में कई तरीकों का वर्णन किया गया है। एक सामान्य विधि एक साथ आसवन निष्कर्षण (एसडीई) 15,16 है। हालांकि, यह चाय की सुगंध के विश्लेषण के लिए उपयुक्त नहीं है क्योंकि चाय की पत्तियों को पूरी आसवन / निष्कर्षण प्रक्रिया के लिए पानी के साथ उबाला जाना चाहिए, जिसके परिणामस्वरूप चाय के घटक रासायनिक प्रतिक्रिया से गुजरते हैं और इस प्रकार, मूल नमूना17 से बहुत अलग गंध प्रोफ़ाइल उत्पन्न करते हैं। सेफ एक उच्च वैक्यूम के तहत कम तापमान पर चाय जलसेक को डिस्टिलेट करता है, इस प्रकार विश्लेषणों में परिवर्तन को कम करता है और मूल सुगंध संरचना को संरक्षित करने की अनुमति देता है।
ठोस-चरण माइक्रोएक्सट्रैक्शन (एसपीएमई) एक और विधि है जिसका उपयोग आमतौर पर चाय18,19 के सुगंध विश्लेषण के लिए किया जाता है। इसके फायदे सरल और विलायक मुक्त प्रक्रिया में निहित हैं। हालांकि, सुगंध घटकों के फाइबर सोखना की चयनात्मकता नमूने की सुगंध विशेषताओं को दर्शाते हुए मात्रात्मक प्रोफ़ाइल प्राप्त करना मुश्किल बनाती है, जो चाय सुगंध विश्लेषण20 के लिए इस विधि के आवेदन को सीमित करती है।
उच्च वैक्यूम ट्रांसफर (एचवीटी) तकनीक को सुगंध विश्लेषण21 में कलाकृतियों के गठन की संभावना को कम करने के लिए विकसित किया गया था। हालांकि, एचवीटी में उच्च क्वथनांक और मजबूत ध्रुवीयता वाले पदार्थों के लिए कम निष्कर्षण उपज है, जो इसके उपयोग के दायरे को सीमित करता है।
उपरोक्त कस्टम विधियों के विपरीत, चाय जलसेक का सेफ डिस्टिलेट किसी भी गैर-वाष्पशील घटकों22,23,24 से मुक्त है। डिस्टिलेट में सुगंध को कार्बनिक सॉल्वैंट्स का उपयोग करके मात्रात्मक रूप से निकाला जा सकता है, जिसका अर्थ है कि मूल नमूने के करीब गंध प्रोफ़ाइल वाला अर्क प्राप्त किया जा सकता है। दक्षता की जांच करने के लिए एचवीटी या सेफ आसवन का उपयोग करके एन-अल्केन्स के आसुत मिश्रण। सेफ सिस्टम का उपयोग करके डिस्टिलेट पैदावार प्रत्येक एल्केन के लिए एचवीटी की तुलना में काफी अधिक पाई गई। इसके अतिरिक्त, 285 डिग्री सेल्सियस से नीचे क्वथनांक वाले एल्केन्स को सेफ द्वारा पूरी तरह से पुनर्प्राप्त किया जा सकता है।
आगे के सफल विश्लेषण के लिए प्रयोगात्मक विवरणों पर पूरा ध्यान देने की आवश्यकता है। (1) सेफ आसवन के दौरान वैक्यूम दबाव वाष्पशील घटकों की वसूली को प्रभावित कर सकता है और इसे उच्च स्तर पर बनाए रखा जाना चाहिए, जैसे कि नमूना जोड़ को धीमा करके। (2) यह सुनिश्चित करना आवश्यक है कि सिस्टम को वायुमंडलीय दबाव में लौटने से पहले संग्रह बोतल तरल नाइट्रोजन में डूबी हुई है ताकि विलायक वाष्पशील को ऊपरी-दाएं ठंडे जाल द्वारा संघनित होने या वैक्यूम पंप में प्रवेश करने से बचाया जा सके। (3) किसी को यह सुनिश्चित करना चाहिए कि परिसंचारी पानी पहले चालू हो और अंत में बंद हो। परिसंचारी पानी को केवल तरल नाइट्रोजन को हटाने के बाद बंद किया जाना चाहिए; अन्यथा, यह डिवाइस को फ्रीज कर देगा। (4) गर्मी हस्तांतरण में सहायता के लिए पानी के स्नान को चुंबक के साथ हिलाया जाना चाहिए।
इस अध्ययन में, विलायक निष्कर्षण से पहले सेफ आसवन किया गया था। एक उलट प्रक्रिया भी संभव है, और यह विशेष रूप से फायदेमंद होगा यदि चाय जलसेक की एक बड़ी मात्रा पहले निकाली जाती है और प्राप्त अर्क को फिर एसएएफई द्वारा आसुत किया जाता है। कार्बनिक विलायक का उपयोग करके जलसेक निष्कर्षण की चुनौती एक इमल्शन का संभावित गठन है। इस मामले में, कार्बनिक परत को पुनर्प्राप्त करने के लिए अतिरिक्त चरणों की आवश्यकता होती है, जैसे सेंट्रीफ्यूजेशन या विभिन्न सॉल्वैंट्स चुनना। प्रयोग के बाद, सेफ ग्लास असेंबली को साफ किया जाना चाहिए। इथेनॉल या एसीटोन का उपयोग सफाई विलायक के रूप में किया जा सकता है। उपयोग करने से पहले भागों को सुखाया जाना चाहिए।
सारांश में, यह प्रोटोकॉल विलायक निष्कर्षण के बाद सुरक्षित आसवन का उपयोग करके मूल चाय के नमूने के करीब गंध प्रोफ़ाइल के साथ एक सुगंध एकाग्रता प्राप्त करने की एक विधि का प्रस्ताव करता है। इस विधि को सभी प्रकार के चाय के नमूनों पर लागू किया जा सकता है, उदाहरण के लिए, तत्काल चाय पाउडर और चाय सांद्रण, और चाय के आणविक संवेदी अध्ययन के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है।
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Disclosures
लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है।
Acknowledgments
इस शोध को चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (32002094, 32102444), एमओएफ और एमएआरए (सीएआरएस -19) के चीन कृषि अनुसंधान प्रणाली और चीनी कृषि विज्ञान अकादमी (सीएएएस-एएसटीआईपी-टीआरआई) के लिए नवाचार परियोजना द्वारा समर्थित किया गया था।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Alkane mix (C10-C25) | ANPEL | CDAA-M-690035 | |
| Alkane mix (C5-C10) | ANPEL | CDAA-M-690037 | |
| AMDIS | National Institute of Standards and Technology | version 2.72 | Gaithersburg, MD |
| Analytical balance | OHAUS | EX125DH | |
| Anhydrous ethanol | Sinopharm | ||
| Anhydrous sodium sulfate | aladdin | ||
| Black tea | Qianhe Tea | Huangshan, Anhui province, China | |
| Concentrator | Biotage | TurboVap | |
| Data processor | Agilent | MassHunter | |
| Dichloromethane | TEDIA | ||
| GC | Agilent | 7890B | |
| GC column | Agilent | DB-5MS | |
| Green tea | Qianhe Tea | Huangshan, Anhui province, China | |
| MS | Agilent | 5977B | |
| p-Xylene-d10 | Sigma-Aldrich | ||
| SAFE | Glasbläserei Bahr | ||
| Ultra-pure deionized water | Milipore | Milli-Q | |
| Vacuum pump | Edwards | T-Station 85H |
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