Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
Summary
Please note that all translations are automatically generated.
Vi leverer en detaljeret protokol til et allestedsnærværende assay af et specifikt substrat og en E3 ubiquitin-ligase i pattedyrceller. HEK293T-cellelinjer blev anvendt til proteinoverekspression, det polyubiquitylerede substrat blev oprenset fra cellelysater ved immunoprecipitation og løst i SDS-PAGE. Immunoblotting blev brugt til at visualisere denne posttranslationelle modifikation.