موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:42 دقيقة • February 26th, 2026
ابدأ بفأر تم إعداده ملوثا بسلالة بكتيرية مقاومة للمضادات الحيوية تحاكي العدوى المزمنة في الأمعاء.
كشف تجويف البطن للوصول إلى الأيقوص والطحال.
احصد الأنسجة المخروفية والأنسجة الطحالية، التي تمثل مواقع الاستعمار البكتيري في المعاء والجهاز.
ضع كل منديل في أنبوب منفصل يحتوي على حاجز وخرزة فولاذية.
قم بتجانس الأنسجة عن طريق تحريك الأنابيب بسرعة، مما يؤدي إلى اصطدام الخرزات الفولاذية بالنسيج، وتحطيمها، وإطلاق البكتيريا في التعليق.
قم بتخفيفات متسلسلة للمتجانسات في المخزن لتقليل تركيز البكتيريا.
يتم جمع القطع من كل تخفيف على أجار المغذي مع مضاد حيوي لاستعادة البكتيريا المقاومة للمضادات الحيوية بشكل انتقائي.
حضن الصفائح للسماح للبكتيريا الحية بالنمو لتصبح مستعمرات.
عد المستعمرات لتقدير عدد البكتيريا الحية لكل جرام من الأنسجة وقارن الأحمال البكتيرية في الأيثار والطحال.
أولا، ضع أنابيب دقيقة دائرية بسعة 2 مليلتر بقفل آمن وأسفل دائري، أضف 1 ملليلتر من PBS المعقمة وخرزة من الفولاذ المقاوم للصدأ معقم إلى كل أنبوب. قم بوزن الأنابيب مسبقا قبل جمع الأنسجة.
بعد القتل الرحيم للفئران، قم باستئصال الأنسجة الخلصية والأنسجة الطحالية، مع التأكد من جمع الأنسجة من الحيوانات الفردية في أنابيب منفصلة. وزن كل أنبوب لتحديد أوزان الأنسجة.
استخدم جهاز مطحنة الخلاط لتجانس الأنسجة عند 30 هرتز لمدة 15 دقيقة. ثم انقل 900 ميكرو
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية