الحصول على خلايا سرطان المبيض الأولية من العينات الصلبة: طريقة لزراعة خلايا سرطان المبيض الظهارية من عينات ورم المبيض
موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 4:35 دقيقة • April 30th, 2023
قد تخضع الخلايا الظهارية الموجودة على السطح الخارجي للمبيض لتحول خبيث إلى خلايا سرطانية يمكن أن تنمو إلى أورام المبيض.
لعزل خلايا سرطان المبيض الظهارية أو EOCs ، ابدأ بأخذ عينة من ورم المبيض وفرمها إلى قطع صغيرة. انقل القطع المفرومة إلى أنبوب يحتوي على عازل هضم مكمل بإنزيم البروتياز المطلوب.
تعمل هذه البروتياز على تدهور بروتينات المصفوفة خارج الخلية داخل الأنسجة ، وتطلق خلايا EOC ، وكريات الدم الحمراء ، وعدد قليل من الخلايا الليفية المنفصلة في معلق.
قم بتصفية ملاط الخلية من خلال مصفاة لفصل الخلايا المفردة العالقة عن قطع الأنسجة غير المنفصلة. الطرد المركزي المعلق لتكوير خلايا EOC وكريات الدم الحمراء والخلايا الليفية. تخلص من المادة الطافية المحتوية على الإنزيم.
أعد تعليق حبيبات الخلية في وسط نمو ظهاري ونقلها إلى طبق ثقافة. احتضان المزرعة للسماح لخلايا EOC والخلايا الليفية بالالتصاق بقاعدة الطبق بينما تطفو كريات الدم الحمراء في الوسط.
قم بإزالة كريات الدم الحمراء العالقة عن طريق تحديث الوسائط. بمرور الوقت ، تسهل الوسائط النمو الانتقائي لخلايا EOC على الخلايا الليفية لتشكيل طبقة أحادية من خلايا سرطان المبيض الأولية.
اجمع العينة من غرفة العمليات وانقلها على الجليد إلى المختبر. لا تزال داخل الحاوية المنقولة ، ضع العينة في غطاء أمان بيولوجي. انقل العينة من أنبوب مخروطي سعة 50 مليلتر إلى
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية