موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 5:00 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ تلطيخ الهيماتوكسيلين والإيوسين عن طريق أخذ شريحة زجاجية تحتوي على قسم الأنسجة المضمنة في البارافين. اغمس الشريحة في محلول إزالة البارافين الذي يحتوي على الزيلين - وهو مذيب عضوي يذيب طبقة البارافين حول الأنسجة ، مما يجعلها في متناول البقع في الخطوات اللاحقة.
عالج قسم الأنسجة بالكحول المطلق لإزالة الزيلين. اغمر الأنسجة في تركيزات متناقصة من الكحول. تعمل هذه الخطوة على ترطيب الأنسجة عن طريق استبدال الكحول بالماء لتحسين التوافق مع الأصباغ القابلة للذوبان في الماء.
تلطخ الأنسجة بالهيماتوكسيلين الأساسي ، والذي يرتبط في شكله المؤكسد بكاتيون معدني. يرتبط هذا المركب إلكتروستاتيكيا بالأحماض النووية في الجينوم ، مما يؤدي إلى تلطيخ النواة الأرجواني.
اغمر القسم الملون في محلول تمايز حمضي لإزالة الهيماتوكسيلين الزائد من السيتوبلازم ، مما يجعل النواة التي تحتفظ بالصبغة تبدو مميزة. عالج الأنسجة بعامل أزرق قلوي لتحييد الأحماض الحرة. يؤدي هذا إلى تراجع لون الصبغة الأرجواني إلى اللون الأزرق ، مما يعزز التفاصيل النووية.
اغمر الشريحة في محلول اليوزين الحمضي لتلطيخ مكونات البروتين الأساسية في السيتوبلازم وألياف النسيج الضام بظلال من الأحمر إلى الوردي. عالج الأنسجة بالكحول للتخلص من اليوزين الزائد. استخدم تركيزات متزايدة من الإيثانول لتجفيف الأنسجة. اغمس الشريحة في الزيلين لمسح أي كواشف متبقية.
عند
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية