ما هي خلايا OEG؟

خلايا OEG هي خلايا دبقية شمية بشرية معمرة تعرف بخصائصها التجددية العصبية.

كيف يتم تمييز الخلايا العقدية الشبكية للتصوير؟

يتم تمييز الخلايا العقدية الشبكية لكي تتألق باللون الأحمر للجسم الخلوي والأخضر للمحاور.

ما هو الغرض من استخدام مجهر التألق الجانبي؟

يُستخدم مجهر التألق الجانبي لالتقاط صور مفصلة للخلايا العقدية الشبكية للتحليل.

كيف يتم حساب مؤشر تجديد المحاور؟

يُحسب بقسمة مجموع أطوال جميع المحاور على العدد الكلي للخلايا العقدية الشبكية.

ما هو البرنامج المستخدم لقياس أطوال المحاور؟

يُستخدم برنامج ImageJ مع البرنامج الإضافي NeuronJ لقياس أطوال المحاور.

لماذا من المهم دراسة تجديد المحاور؟

تعتبر دراسة تجديد المحاور ضرورية لتطوير علاجات للإصابات والأمراض العصبية.

تصوير وقياس التجديد المحوري في الخلايا العصبية العقدية الشبكية للفئران

JoVE Encyclopedia of Experiments

Neuroscience

0 views • 2:23 min • June 17th, 2025

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

خذ ثقافة مشتركة للخلايا الدبقية الشمية البشرية الخالدة ، أو خلايا OEG ، والخلايا العصبية العقدية الشبكية للفئران المحسمة ، أو RGNs ، على غطاء.

تظهر خلايا OEG خصائص التجدد العصبي التي تسهل التجديد المحوري في RGNs.

يتم تصنيف RGNs مناعية بحيث تتألق أجسامها الخلوية باللون الأحمر بينما تتألق محاورها باللون الأخضر.

باستخدام وسائط التثبيت ، قم بتركيب الغطاء الذي يحتوي على الخلايا.

استخدم مجهر epifluorescence لالتقاط صور متعددة ل RGNs.

افتح صورة في برنامج التصوير.

حدد النسبة المئوية للخلايا العصبية ذات المحاور بالنسبة إلى العدد الإجمالي ل RGNs.

بعد ذلك ، تتبع محور عصبي بدءا من سوما حتى النهاية وابدأ تتبع المحور العصبي لتحديد أطوال جميع المحاور.

حدد مؤشر التجديد المحوري بقسمة مجموع جميع الأطوال المحورية على العدد الإجمالي ل RGNs.

قم بتركيب الأغطية بوسط تثبيت واحتفظ بها عند 4 درجات مئوية. استخدم هدف 40 مرة من المجهر المحوري لتحديد التجديد المحوري. تحديد النسبة المئوية للخلايا العصبية ذات المحاور بالنسبة إلى إجمالي عدد الخلايا العصبية العقدية الشبكية.

استخدم المكون الإضافي NeuronJ في ImageJ لتحديد مؤشر التجديد المحوري ، أو متوسط الطول المحوري ، وهو مجموع أطوال جميع المحاور المحددة مقسوما على العدد الإجمالي للخلايا العصبية المحسوبة ، سواء قدمت محورا عصبيا أم لا. بعد فتح الصورة ، انقر فوق تحليل وتعيين المقياس وفقا لإعدادات المجهر ، والعمل بالبكسل لكل ميكرومتر. حدد إضافة تتبعات لبدء تتبع المحاور العصبية ، ثم تتبع المحاور من السوما حتى النهاية. انقر فوق قياس التتبع وعرض قياسات التتبع وتشغيل.