Summary
यहाँ, हम एक हृदय शल्य atrioventricular (ए वी) - एक वयस्क लुईस चूहे की नाली में इंजीनियर ऊतक प्रत्यारोपण प्रक्रिया का वर्णन.
Abstract
कृंतक सर्जरी अक्सर इंजीनियर के ऊतकों की उपयोगिता का आकलन करने में एक महत्वपूर्ण घटक है. शल्यचिकित्सा की प्रक्रियाओं की एक विस्तृत विविधता आम प्रयोगशाला चूहों या चूहों में किया जा सकता है और ये काफी अक्सर पीठ टॉप प्रयोगों और बड़े पशु परीक्षण या मानवीय परीक्षणों के बीच एक मध्यवर्ती कदम के रूप में सेवा. यह देखते हुए कि कृन्तकों में मचान सामग्री और कोशिकाओं के उपन्यास संयोजनों का परीक्षण एक की स्थापना की, लागत प्रभावी, और physiologically प्रासंगिक मॉडल प्रणाली प्रदान करते हैं, वे विशेष रूप से कर रहे हैं अच्छी तरह से हृदय ऊतक इंजीनियरिंग के अध्ययन के लिए अनुकूल है. वर्तमान में, हम एक खुले दिल की शल्य चिकित्सा इंजीनियर atrioventricular में myogenic पूर्वपुस्र्ष कोशिकाओं से युक्त ऊतक (ए वी) के एक चूहे दिल की नाली प्रत्यारोपण प्रक्रिया का वर्णन. ये प्रत्यारोपण के लिए पूरा दिल ब्लॉक [1] के साथ बाल चिकित्सा रोगियों में पारंपरिक पेसमेकर आरोपण करने के लिए एक वैकल्पिक उपचार उपलब्ध कराने के अंतिम लक्ष्य के साथ सही atrium और सही वेंट्रिकल के बीच एक बिजली नाली बनाने का इरादा कर रहे हैं. इंजीनियर ए वी नाली ऊतक में एक thoracotomy के माध्यम से प्रत्यारोपित किया जाता है. हमारे प्रयोजनों के लिए, लुईस चूहों anesthetized और invasively बाँझ शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया के दौरान सकारात्मक airway दबाव बनाए रखने के लिए हवादार. दिल के लिए दृष्टिकोण एक सही thoracotomy द्वारा antero - पार्श्व एक चीरा के माध्यम से 5 में किया जाता है
Protocol
भाग 1: सामान्य संज्ञाहरण की प्रेरण
- एक 200-250 ग्राम लुईस चूहे 50 मिलीग्राम / किग्रा Ketamine और 4 मिलीग्राम / किग्रा intraperitoneal गुहा में एक 30 जी सुई इंजेक्शन के साथ Xylazine के साथ anesthetized है. पेट के ऊपरी हिस्से और सही छाती के बाल हटाने और चीरा साइट अच्छी तरह से 70% इथेनॉल और फिर एक povidone आयोडीन की सामयिक एंटीसेप्टिक समाधान के साथ साफ करने के लिए काटा गया हैं.
- जानवर endotracheally एक 16 जी नसों में एक छोटे जानवर श्वासयंत्र (हार्वर्ड उपकरण) से जुड़े कैथेटर का उपयोग intubated है. श्वासयंत्र 0.5 1.0 Isoflurane% (बैक्सटर) 100% ऑक्सीजन के साथ मिलाया सामान्य संज्ञाहरण बनाए रखने के लिए आपूर्ति vaporizer के लिए जुड़ा हुआ है. श्वसन दर और ज्वार की मात्रा चूहे के शरीर के वजन के अनुसार निकाला जाता है. जानवर एक हीटिंग पैड (हूड थर्मो - पैड) के लिए शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया के दौरान शरीर का तापमान बनाए रखने पर रखा गया है.
- वापस अंग पर दिल और शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया एक pulsoximeter डिवाइस (Nellcor) भर में ऑक्सीजन संतृप्ति की दर पर नजर रखने के लिए काटा गया है.
भाग 2: thoracotomy और इंजीनियर ऊतकों आरोपण
- शल्य साइट बाँझ शल्य draping है कि तौलिया clamps के साथ जगह में आयोजित किया जाता है के साथ तैयार है.
- एक चीरा antero - पार्श्व से सही सीने के पार्श्व दीवार के लिए बनाया है, सिर्फ 5 वें पसलियों के बीच अंतरिक्ष के ऊपर है. छाती के इंटीरियर 5 वें पसलियों के बीच अंतरिक्ष के माध्यम से पहुँचा है और एक छोटे से retractor (Roboz) दृश्य को अधिकतम करने के लिए तैनात है.
- पेरीकार्डियम सही atrium और दिल के शीर्ष की ओर आधार से सही वेंट्रिकल के परिशिष्ट बस के ऊपर कट जाता है. उसके बाद, ए.वी. नाली की पहचान की है और त्रिकोण aorto-atrio - निलय epicardial आसन्न परत धीरे अलग छेड़ा है.
- एक 7-0 Prolene सीवन (Ethicon) सही वेंट्रिकल के बेसल कंधे के माध्यम से रखा गया है. एक 2 x 2 x 2 मिमी टुकड़ा इंजीनियर के ऊतकों का निर्माण से dissected है और ए वी नाली के भीतर तैनात और धीरे Prolene सीवन के साथ बंधे.
- शल्य चिकित्सा के क्षेत्र में रक्तस्राव के लिए जाँच की है और दो 4-0 Vicryl sutures (Ethicon) ऊपरी और निचले पसलियों के बीच अंतरिक्ष के बीच रिब पिंजरे के बंद के लिए रखा जाता है.
- कोई स्पष्ट वातिलवक्ष वेंटीलेटर के रास्ते से फेफड़ों के विस्तार के द्वारा खुदाई है.
- छाती दीवार तो परतों में बंद कर दिया है.
भाग 3: रिकवरी
- जबकि जानवरों की सर्जरी से ठीक है, चीरा साइट 5 एमएल 0.25% Bupivacaine [2] के साथ घुसपैठ की है.
- जानवर श्वासयंत्र से प्रातः निम्नलिखित extubated है और ताजा बिस्तर के साथ एक पिंजरे में लौट एक बार यह पूरी तरह से जाग और sternal है. चूहा बाद में 3 दिनों के लिए 0.01 मिलीग्राम / किग्रा buprenorphine analgesia subcutaneously हर 12 घंटे दिलाई.
भाग 4: प्रतिनिधि के परिणाम
अगर ठीक से प्रदर्शन किया, दिल की ए वी नाली (चित्रा 1) परिणाम में पशुओं के 90 से अधिक% वसूली में इंजीनियर के ऊतकों की शल्य चिकित्सा आरोपण का वर्णन.
चित्रा 1 उजागर इंजीनियर ऊतक के आरोपण की साइट दिखाने के दिल की एक तस्वीर .
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Discussion
शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया के लिए एक अनुकूल परिणाम के लिए, यह ठीक intubate और invasively जानवर हवादार करने के लिए महत्वपूर्ण है. यदि चूहे बस बेहोश है और अनायास साँस लेने की अनुमति दी है, दोनों फेफड़ों को अनिवार्य रूप से गिर जाएगा जबकि छाती कृन्तकों में आम फुस्फुस का आवरण के कारण खोला है. सीने में बंद करने से पहले, किसी भी वातिलवक्ष पूरी तरह से समाप्त की जरूरत है और फेफड़ों को पूरी तरह से श्वासरोध कम विस्तार. अन्यथा, श्वास और वसूली से प्रातः असफल हो सकता है और जानवर hypercapnic और या / hypoxic [3] हो जाएगा. Epicardial ऊतक के ए.वी. नाली के भीतर हटाना संभावित खतरनाक है और सही atrium से चूहे atrial दीवार के नाजुक प्रकृति के कारण बड़े पैमाने पर शिरापरक खून बह रहा में परिणाम सकता है. जबकि 2.4 चरण में Prolene सीवन रखने, यह आवश्यक है के बारे में पता होना चाहिए और epicardial कोरोनरी शाखाओं से बचने. जानवरों की वसूली की अवधि के दौरान या उसके शरीर का तापमान अचानक गिर जाएगी एक शीर्ष पैड पर गर्म रखा जाना चाहिए.
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Disclosures
जानवरों पर प्रयोग संस्थागत पशु की देखभाल और बच्चों के अस्पताल के बोस्टन में उपयोग समिति द्वारा निर्धारित दिशा निर्देशों और नियमों के अनुसार में प्रदर्शन किया गया.
Acknowledgments
और बच्चों के अस्पताल के बोस्टन में हृदय चालन फंड के लिए योगदान, इस काम के स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थानों से अनुसंधान अनुदान (HL088206 HL068915) द्वारा समर्थित है.
Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| 7x4 Thermo Pad 4/box | Equipment | Hood Thermo-Pad, Summerland, BC Canada | MODEL 704R | |
| Inspira ASV Ventilator | Equipment | Harvard Apparatus | ||
| Handheld Pulse Oximeter | Equipment | Nellcor | N20PA | |
| Retractor | Equipment | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-6514 | |
| Isoflurane (Forane) | Reagent | Baxter Internationl Inc. | 1001936040 | |
| Ketamine HCl | Reagent | Hospira Inc. | RL-0065 | |
| Xylazine (AnaSed) | Reagent | Lloyd, Inc. | LB15705A | |
| Buprenorphine HCL Inject | Reagent | Bedford Laboratories | Div-BUP-P00 | |
| Bupivacaine 0.25% | Reagent | Hospira Inc. |
References
- Choi, Y. H. Cardiac conduction through engineered tissue. Am J Pathol. 169, 72-85 (2006).
- Shin, J. W. Low-dose systemic bupivacaine prevents the development of allodynia after thoracotomy in rats. Anesth Analg. 107, 1587-1591 (2008).
- Horstick, G. Surgical procedure affects physiological parameters in rat myocardial ischemia: need for mechanical ventilation. Am J Physiol. 276, H472-H479 (1999).
