Summary
İlaca dirençli Candida albicans'ın artan insidansı dünya çapında ciddi bir sağlık sorunudur. Antimikrobiyal fotodinamik tedavi (aPDT), ilaca dirençli mantar enfeksiyonlarına karşı savaşmak için bir strateji sunabilir. Bu protokol, in vitro olarak çoklu ilaca dirençli C. albicans suşu üzerinde Gül bengal aracılı aPDT etkinliğini tanımlamaktadır.
Abstract
İnvaziv Candida albicans enfeksiyonu, insanlarda önemli bir fırsatçı mantar enfeksiyonudur, çünkü bağırsak, ağız, vajina ve cildin en yaygın kolonizatörlerinden biridir. Antifungal ilaçların mevcudiyetine rağmen, invaziv kandidiyazisin mortalite oranı ~% 50 oranında kalmaktadır. Ne yazık ki, ilaca dirençli C. albicans insidansı küresel olarak artmaktadır. Antimikrobiyal fotodinamik tedavi (aPDT), C. albicans biyofilm oluşumunu inhibe etmek ve ilaç direncinin üstesinden gelmek için alternatif veya adjuvan bir tedavi sunabilir. Gül bengal (RB) aracılı aPDT, bakteri ve C. albicans'ın etkili hücre öldürmesini göstermiştir. Bu çalışmada, RB-aPDT'nin çoklu ilaca dirençli C. albicans üzerindeki etkinliği tanımlanmıştır. Ev yapımı yeşil ışık yayan diyot (LED) ışık kaynağı, 96 delikli bir plakanın kuyusunun ortasına hizalanacak şekilde tasarlanmıştır. Mayalar, farklı RB konsantrasyonlarına sahip kuyucuklarda inkübe edildi ve değişen yeşil ışık akıcılıkları ile aydınlatıldı. Öldürme etkileri plaka seyreltme yöntemi ile analiz edildi. Optimal bir ışık ve RB kombinasyonu ile 3 log büyüme inhibisyonu sağlandı. RB-aPDT'nin ilaca dirençli C. albicans'ı potansiyel olarak inhibe edebileceği sonucuna varılmıştır.
Introduction
C. albicans , sağlıklı bireylerin gastrointestinal ve genitoüriner yollarında kolonize olur ve bireylerin yaklaşık yüzde 50'sinde normal mikrobiyota olarak tespit edilebilir1. Konakçı ve patojen arasında bir dengesizlik yaratılırsa, C. albicans istila edebilir ve hastalığa neden olabilir. Enfeksiyon lokal mukoza zarı enfeksiyonlarından çoklu organ yetmezliğine kadar değişebilir2. ABD'de yapılan çok merkezli bir sürveyans çalışmasında, 2009 ve 2017 yılları arasında invaziv kandidiyazisli hastalardan alınan izolatların yaklaşık yarısı C. albicans3'tür. Kandidemi yüksek morbidite oranları, mortalite, hastanede kalış süresinin uzaması ile ilişkili olabilir4. ABD Hastalık Kontrol ve Önleme Merkezleri, test edilen tüm Candida kan örneklerinin yaklaşık% 7'sinin antifungal ilaç flukonazol5'e dirençli olduğunu bildirmiştir. İlaca dirençli Candida türlerinin ortaya çıkması, antimikotik ajanlara alternatif veya adjuvan bir tedavi geliştirme endişesini artırmaktadır.
Antimikrobiyal fotodinamik tedavi (aPDT), PS6'nın tepe absorpsiyon dalga boyunda ışıkla spesifik bir fotosensitizörün (PS) aktive edilmesini içerir. Uyarmadan sonra, uyarılmış PS enerjisini veya elektronlarını yakındaki oksijen moleküllerine aktarır ve zemin durumuna geri döner. Bu işlem sırasında reaktif oksijen türleri ve singlet oksijen oluşur ve hücre hasarına neden olur. aPDT, 1990'lardan beri mikroorganizmaları öldürmek için yaygın olarak kullanılmaktadır7. aPDT'nin faydalarından biri, ışınlama sırasında çoklu organellerin bir hücrede singlet oksijen ve / veya reaktif oksijen türleri (ROS) tarafından hasar görmesidir; bu nedenle aPDT'ye karşı direnç bugüne kadar bulunamamıştır. Ayrıca, yakın tarihli bir çalışma, aPDT'den sonra hayatta kalan bakterilerin antibiyotiklere karşı daha duyarlı hale geldiğini bildirmiştir8.
aPDT'de kullanılan ışık kaynakları arasında lazerler, filtreli metal halojen lambalar, yakın kızılötesi ışık ve ışık yayan diyot (LED)9,10,11,12 bulunur. Lazer, genellikle 0,5 W /cm2'den daha büyük olan ve çok kısa sürede yüksek ışık dozunun verilmesine izin veren yüksek ışık gücü sağlar. Oral enfeksiyonlar için aPDT gibi daha uzun bir tedavi süresinin sakıncalı olduğu durumlarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Bir lazerin dezavantajı, spot aydınlatma boyutunun birkaç yüz mikrometreden bir difüzörle 10 mm'ye kadar değişen küçük olmasıdır. Dahası, lazer ekipmanı pahalıdır ve çalışması için özel eğitime ihtiyaç duyar. Öte yandan, filtreli metal bir halojen lambanın ışınlama alanı nispeten daha büyüktür13. Ancak, lamba çok ağır ve pahalıdır. LED ışık kaynakları, dermatolojik alanda aPDT'nin ana akımı haline gelmiştir, çünkü küçük ve daha ucuzdur. Işınlama alanı, LED ampulün bir dizi düzenlemesi ile nispeten büyük olabilir. Tüm yüz aynı anda aydınlatılabilir9. Bununla birlikte, bugün mevcut olan LED ışık kaynaklarının hepsi olmasa da çoğu klinik kullanım için tasarlanmıştır. Bir laboratuvardaki deneyler için uygun olmayabilir, çünkü yer kaplayan ve pahalıdır. Çok küçük ve bir LED şeritten kesilip monte edilebilen ucuz bir LED dizisi geliştirdik. LED'ler farklı deneysel tasarımlar için farklı düzenlemelere takılabilir. Bir deneyde 96 delikli bir plakada veya hatta 384 delikli bir plakada farklı aPDT koşulları tamamlanabilir.
Gül bengal (RB), insan gözlerinde kornea hasarlarının görselleştirilmesini arttırmak için yaygın olarak kullanılan renkli bir boyadır14. RB aracılı aPDT, Staphylococcus aureus, Escherichia coli ve C. albicans üzerinde, Toluidin mavisi O15'inkiyle kabaca karşılaştırılabilir verimlilikte öldürücü etkiler göstermiştir. Bu çalışma, RB-aPDT'nin çoklu ilaca dirençli C. albicans üzerindeki etkisini doğrulamak için bir yöntem göstermektedir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. aPDT sistem hazırlığı
- Bir LED şeritten dört yeşil ışık yayan diyotu (LED'ler) kesin ( Malzeme Tablosuna bakınız) ve bunları 96 delikli bir plakanın dört kuyucuğuyla hizalayın (Şekil 1).
NOT: LED'ler 4 x 3'lük bir dizi halinde düzenlenmiştir. LED'in arkası, ışınlama sırasında ısıyı dağıtmak için bir ısı emiciye yapıştırıldı. - LED'in akıcılık hızı11'i bir ışık gücü ölçerle 540 nm'de ölçün (bkz. LED'in akıcılık hızının 510-560 nm arasında olduğundan emin olmak için Ek Şekil 1'e bakınız.
- Sabit sıcaklığı (25 ± 1 °C)11 korumak için ışınlama sırasında plakanın yanına elektrikli bir fan yerleştirin. Işınlama sırasında ortamın sabit sıcaklığının korunmasını sağlamak için Ek Şekil 2'ye bakınız.
2. C. albicans'ın maya formunun kültürlenmesi
NOT: Deneyler için flukonazol de dahil olmak üzere çoğu antifungale dirençli çoklu ilaca dirençli bir C. albicans (BCRC 21538 / ATCC 10231) kullanılmıştır16.
- Antimikotik ilaç duyarlılığını daha önce yayınlanmış rapor17'yi takiben disk difüzyon yöntemi ile belirlemek.
- Mikro-ekolojik ortamlara bağlı olarak maya, hifaj ve psödohifa formlarında C. albicans yetiştirin18.
NOT: Hifa ve psödohifa formları doğru bir hesaplama için zordur. Maya formu mikroskop altında veya akış sitometrisi ile hassas bir şekilde hesaplanabilir. Hücre büyümesi sırasındaki sıcaklık, morfolojisini belirler. Oda sıcaklığında (25 ° C), neredeyse tüm hücreler maya formundadır. C. albicans'ın 30 °C'de 4 saatlik kısa bir inkübasyonu, maya morfolojisini etkilemedi.
3. Planktonik C. albicans üzerinde aPDT
- Tek bir C. albicans kolonisini steril bir döngü ile bir agar plakasından izole edin ve sterilize edilmiş bir cam tüp içinde 3 mL maya özü pepton dekstroz (YPD) ortamına ekleyin (bkz.
- C. albicans'ı genişletmek ve mantarı doğru niceleme için maya formunda tutmak için tüpü 155 rpm dönme hızına sahip bir inkübatörde gece boyunca 25 ± 1 ° C'de (14-16 saat) inkübe edin.
- Gece kültürünü, 30 ° C'de yaklaşık0,5 OD 600 değerine kadar orta ila bir OD 600 değeri ile seyreltin ve C. albicans'ın kütük büyüme fazını elde etmek için 4 saat boyunca 155 rpm hızında döndürün.
- Log fazı kültürünü tekrar taze YPD ortamı ile 0,65 OD600 değerine kadar seyreltin (yaklaşık 1 x 107 koloni oluşturan birim, CFU / mL). Son konsantrasyonu bir agar plakası8 üzerinde seri seyreltme yöntemiyle onaylayın.
- Tozu 1x PBS'de çözerek bir Rose bengal (RB) stok çözeltisi (% 4) hazırlayın. 0,22 μm'lik bir filtre ile filtreleyip sterilize edin ve karanlıkta 4 °C'de saklayın. RB'nin son çalışma konsantrasyonu% 0.2'dir.
- RB'nin hücrelerdeki emilimini anlamak için oda sıcaklığında 1.5 mL'lik bir mikrosantrifüj tüpüne ve farklı zaman noktalarında (0, 15 ve 30 dakika) ko-kültüre 111 mL'lik log faz C. albicans'a 111 μL% 2 RB ekleyin (Şekil 2).
- Ko-kültürü, oda sıcaklığında 2,5 dakika boyunca 16.100 x g'de santrifüjleme ile 1 mL 1x PBS ile üç kez yıkayın.
NOT: aPDT dört farklı koşul içerir: mutlak kontrol (ışığa maruz kalma yok, RB yok), karanlık kontrol (ışık yok ancak RB ile inkübe ediyor), ışık kontrolü (RB olmadan ışığa maruz kalıyor), aPDT (RB varlığında ışığa maruz kalıyor). - C. albicans'ı 1 mL'lik 1x PBS'de yeniden askıya alın ve her koşul için 96 kuyu plakasında üç farklı kuyuya ayırın. Yıkadıktan sonra kuyucukları LED dizisi ile hizalayın.
- Işığa maruz kalan gruplarda, elektrikli fanı ve ışığı açın.
NOT: Kuyucukların değişen zaman periyotlarına maruz bırakılmasıyla farklı bir akıcılık (J/cm2) elde edilebilir. Örneğin, 16,7 dakikalık bir ışık pozlaması, 10 mW / cm2 LED ampulle 10 J /cm2'ye gelir. - Işınlamadan sonra, 10x seyreltme hazırlamak için 180 μL 1x PBS içeren 1,5 mL'lik bir santrifüj tüpüne bir kuyucuktan 20 μL ko-kültür çözeltisi ekleyin. Ayrıca, daha sonra aynı yöntemi izleyerek on kez seyreltin.
- Plakanın sayılabilir kolonilerini elde etmek için her seri seyreltmenin üç damlasını bir YPD agar plakasının bir çeyreğine 20 μL'lik damlatın. CFU / mL'yi, kolonileri seyreltme faktörleri3 ile çarparak hesaplayın.
4. İstatistiksel analiz
- Toplanan verileri bir grafik ve istatistik yazılımı kullanarak analiz edin (bkz.
- Verileri ortalamaya ± ortalamanın standart hatasına göre gösterin. Farklı test koşulları arasındaki önemli farklılıkları değerlendirmek için varyans8'in iki yönlü ANOVA analizini gerçekleştirin.
- İkili karşılaştırmalar için Tukey'in çoklu karşılaştırma testlerini gerçekleştirin8. Her farklı tedavi için en az üç bağımsız deney yapın. P değerinin 0,05 < istatistiksel olarak anlamlı olduğunu düşünün.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Şekil 1'de bu çalışmada kullanılan aPDT sistemi görülmektedir. Yüksek sıcaklıklar önemli hücre ölümüne neden olabileceğinden, LED dizisi bir elektrikli fan tarafından soğutulur ve ışınlama sırasında 25 ± 1 ° C'de sabit bir sıcaklığı korumak için bir ısı emici kullanılır. Isı etkisi azaltılabilir. Eşit bir ışık dağılımına sahip olmak da başarılı bir aPDT için önemli bir belirleyici faktördür; bu nedenle, aydınlatma sırasında LED ampulün kuyuya tam olarak hizalanması çok önemlidir. LED'in parlaklığı nedeniyle, ışığı açmadan önce güneş gözlüğünün donatılması gerekir.
C. albicans , floresan mikroskopi altında kırmızı floresan ile görselleştirildiği gibi RB ile hemen boyanır ( Şekil 2'de 0 dakika). RB'nin hücrelere zamana bağlı bir şekilde girdiği görülebilir (Şekil 2). Çalışma, 15 dakika sonra hücrelerin çoğunun RB ile boyandığı 15 dakikalık bir RB inkübasyonu kullandı. Daha yüksek bir RB konsantrasyonu, mantarları öldürmek için daha fazla serbest radikal üreterek daha güçlü bir floresana yol açar. Bununla birlikte, normal hücrelerde önemli hücre ölümüne de neden olabilir; bu nedenle kliniklerde %0.2 RB konsantrasyonu yaygın olarak kullanılmaktadır. Böylece, bu çalışmada tam konsantrasyon seçildi.
PDT, RB'nin ışıkla aktivasyonunu içerir. Aktif RB zemin durumuna geri döndüğünde, serbest radikaller ve singlet oksijen üretmek için enerjiyi ve elektronları yakındaki oksijene aktarır ve hücre ölümüyle sonuçlanır. Şekil 3, ışınlama olmaması veya RB'nin yokluğu koşulu altında hücre ölümü göstermemektedir. C. albicans , yeşil ışık ışınlamasından sonra %0.2 RB varlığında hafif doza bağımlı bir şekilde inhibe edildi (Şekil 3). Mantarların 30 J /cm2 ile yeşil ışığa maruz bırakılması, hücre büyümesinin 4 log (% 99.99) inhibisyonu ile sonuçlandı.
Resim 1: Fotodinamik sistem . (A) Işınlama sırasında ısıyı dağıtmak için metal bir ısı emiciye yeşil bir LED dizisi yapıştırıldı. Sıcaklığı 25 ± 1 °C'de sabit tutmak için ışık kaynağının yanına bir elektrikli fan yerleştirildi. (B) Işık açıldı. (C) 96 kuyu plakasının kuyuları, LED'in merkezi ile hizalanmıştır. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 2: C. albicans'a giren Rose bengal'in zamana bağlı çalışması. 0-30 dakika sonra C. albicans'ın parlak alan (A-D) ve floresan görüntüleri (E-H)% 0.2 Gül bengal (RB) ile birlikte kültürlenir. (A) ve (E) RB ortak kültürlü olmadan kontrol. (B) ve (F) Hücreler hemen% 0.2 RB ile boyandı. (C) ve (G) 15 dakikalık kültürden sonra, çoğu hücre, hücrelerin içinde RB'yi gösteren kırmızı floresan gösterdi. (D) ve (H) RB'nin daha güçlü floresansı 30 dakikalık bir inkübasyonla kaydedildi. Ölçek çubuğu = 50 μm. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 3: Antimikrobiyal fotodinamik tedavinin çoklu ilaca dirençli C. albicans üzerine etkileri. Hücrelerin büyüme inhibisyonu ışık akıcılığına bağlıdır. C. albicans'ın 10 J / cm2'lik bir akıcılığa maruz bırakılması, hücre büyümesini 1.5 log, 20 J / cm2 ile 2 log ve 30 J /cm2 ile 4 kütük, sırasıyla% 0.2 Gül bengal varlığında inhibe etti. -RB, Gül bengal inkübasyonu olmadan; +RB, 15 dakika boyunca Rose bengal ile birlikte kültürlenmiştir. Veriler, yinelenen olarak gerçekleştirilen üç ayrı deneyin SEM'± anlamına gelir. p değerleri şekilde belirtilmiştir (Tukey'in çoklu karşılaştırma testleri, iki yönlü ANOVA). Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Ek Şekil 1: LED çıkış spektrumu. Akıcılık hızı, bir güç ölçer ile 510-560 nm arasında her 2 nm'de bir ölçülmüştür. Veriler, üçlü ölçümlerle iki bağımsız deneyden bir araya getirilmiştir. Bu Dosyayı indirmek için lütfen tıklayınız.
Ek Şekil 2: Işınlama sırasında ortamın sıcaklığı. Sıcaklığı ölçmek için 100 μL et suyuyla doldurulmuş 96 delikli bir plakanın her bir kuyucuğuna bir termokupl yerleştirildi. Sıcaklık 25 ± 1 ° C'de sabitti. Veriler, üçlü kuyularla çoğaltılmış deneylerden toplanır. Bu Dosyayı indirmek için lütfen tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
RB-PDT'nin fungal keratit için klinik uygulamalarının cesaret verici sonuçları son zamanlarda bildirilmiştir19. RB'nin absorpsiyon zirvesi 450-650 nm'dir. Başarılı bir aPDT için ışık kaynağının akıcılık oranını belirlemek esastır. Kanser hücrelerini tedavi etmek için yüksek bir fluans (genellikle >100 J /cm2) gerekirken, enfekte lezyonları tedavi etmek için daha düşük bir fluans beklenmektedir6. Yüksek akıcılık, klinik bir ortamda pratik olmayabilecek uzun bir maruz kalma süresi anlamına gelir. Mikotik keratit tedavisi için, oftalmolojik topluluk20'de 5.4 J /cm2 üzerinde anlaşmaya varılmıştır. RB'nin uzun bir kuluçka süresi, bir hastanın aPDT tedavisi alması için de sakıncalıdır. Böylece, daha ileri deneyler için 15 dakikalık bir kuluçka süresi seçildi.
Başarılı bir deneme için bazı adımlar kritik öneme sahiptir. Mantar kültürü için kullanılan agar plakaları, yüzeydeki nemi azaltmak için fan açıkken lamel bir akış kabininde 15-20 dakika kurutuldu. Nemli bir yüzey, mantar damlacıklarının akışının karışmasına izin verecek ve tek bir koloninin oluşumunu önleyecektir.
Tüm deneylerin loş ışıkta yapılması, RB'nin fotobeyazlatmayı önlemek için hayati önem taşımaktadır. Elektrik devresi paralel bir bağlantıdaydı, böylece devrelerden birinde bir kırılma olursa, kalan cihazlar etkilenmeyecekti. Diğerlerinin menzili dışında kalan sonuçlar varsa, tüm LED ampullerin iyi çalıştığından emin olmak için önce dizi kontrol edilebilir.
Bir LED ışık kaynağı kullanmanın bir sınırlaması, sıcaklığa bağımlılığıdır. Bir LED'de, ısı LED ampulün kendisi tarafından üretilmez, ancak cihaz9 içindeki yarı iletken bağlantıda üretilir. Nominal akımlarının üzerindeki aşırı sürüş LED'leri, bağlantı sıcaklığının yükselmesini ve sonunda ampulün erken arızalanmasına yol açtığından, bağlantının uygun şekilde soğutulmasını sağlamak için cihazı metal bir ısı emici ile donatmak gerekir. LED dizisinin mevcut tasarımının bir başka sınırlaması, 96 delikli bir plakanın yalnızca bir kuyusunu barındıran her LED ampul tarafından aydınlatılan sınırlı alandır. Daha geniş bir aydınlatma alanına ihtiyaç duyulursa, eşit aydınlatma elde etmek için plakanın üstünde veya altında uygun karşılık gelen mesafelere sahip farklı bir LED ampul düzenlemesi gereklidir.
Bu çalışma tasarımının avantajları, aPDT deneyleri için fotodinamik sistemin kolay ve ucuz kurulumudur. Mantar enfeksiyonları ile ilgili deneylerde kullanılabilir. Virüsler ve bakteriler de aynı sistemde test edilebilir. LED ışık şeridi, görünür olandan yakın kızılötesi ışık spektrumuna kadar değişen farklı fotosensitizörlerin emme zirveleri ile ilişkilendirmek için farklı bir ışık renginden seçilebilir. Piyasadan kolayca satın alınabilirler. Şerit, yüksek verimli bir analiz için 96 delikli bir plaka ile hizalamak üzere kesilebilir ve farklı dizilere monte edilebilir. 96 delikli bir plakanın kullanılması, laboratuvarda zamandan ve yerden tasarruf etmek için aynı anda farklı test koşullarına izin verir.
Sonuç olarak, bu çalışmada kurulan sistem, çeşitli mikroorganizmalar ve hücreler üzerindeki farklı fotodinamik etkileri incelemek için basit, kolay ve çok yönlüdür.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar çıkar çatışması olmadığını beyan ederler.
Acknowledgments
Bu çalışma, Eğitim Bakanlığı (MOE) ve Tayvan Bilim ve Teknoloji Bakanlığı [MOST 109-2327-B-006-005] tarafından Yüksek Öğrenim Filiz Projesi çerçevesinde Öne Çıkan Alanlar Araştırma Merkezi Programı'ndan Ulusal Cheng Kung Üniversitesi Uygulamalı Nanotıp Merkezi'nden TW Wong'a fon almıştır. J.H. Hung, Tayvan Ulusal Cheng Kung Üniversite Hastanesi'nden [NCKUH-11006018] ve [MOST 110-2314-B-006-086-MY3] gelen fonları kabul ediyor.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 1.5 mL microfuge tube | Neptune, San Diego, USA | #3745.x | |
| 5 mL round-bottom tube with cell strainer cap | Falcon, USA | #352235 | |
| 96-well plate | Alpha plus, Taoyuan Hsien, Taiwan | #16196 | |
| Aluminum foil | sunmei, Tainan, Taiwan | ||
| Aluminum heat sink | Nanyi electronics Co., Ltd., Tainan, Taiwan | BK-T220-0051-01 | Disperses heat from the LED array. |
| Centrifuge | Eppendorf, UK | 5415R | |
| Graph pad prism software | GraphPad 8.0, San Diego, California, USA | graphing and statistics software | |
| Green light emitting diode (LED) strip | Nanyi electronics Co., Ltd., Tainan, Taiwan | 2835 | Emission peak wavelength: 525 nm, Viewing angle: 150°; originated from https://www.aliva.com.tw/product.php?id=63 |
| Incubator | Yihder, Taipei, Taiwan | LM-570D (R) | |
| Light power meter | Ophir, Jerusalem, Israel | PD300-3W-V1-SENSOR, | |
| Millex 0.22 μm filter | Merck, NJ, USA | SLGVR33RS | |
| Multidrug-resistant Candida albicans | Bioresource Collection and Research CenterBioresource, Hsinchu, Taiwan | BCRC 21538/ATCC 10231 | http://catalog.bcrc.firdi.org.tw/BcrcContent?bid=21538 |
| OD600 spectrophotometer | Biochrom, London, UK | Ultrospec 10 | |
| Rose Bengal | Sigma-Aldrich, MO, USA | 330000 | stock concentration 40 mg/mL = 4%, prepare in PBS, stored at 4 °C |
| Sterilized glass tube | Sunmei Co., Ltd., Tainan, Taiwan | AK45048-16100 | |
| Yeast Extract Peptone Dextrose Medium | HIMEDIA, India | M1363 |
References
- Naglik, J. R., Challacombe, S. J., Hube, B. Candida albicans secreted aspartyl proteinases in virulence and pathogenesis. Microbiology and Molecular Biology Reviews. 67 (3), 400-428 (2003).
- Pappas, P. G., et al. Clinical practice guideline for the management of candidiasis: 2016 update by the Infectious Diseases Society of America. Clinical Infectious Diseases. 62 (4), 1-50 (2016).
- Ricotta, E. E., et al. Invasive candidiasis species distribution and trends, United States, 2009-2017. Journal of Infectious Diseases. 223 (7), 1295-1302 (2021).
- Koehler, P., et al. Morbidity and mortality of candidaemia in Europe: an epidemiologic meta-analysis. Clinical Microbiology and Infection. 25 (10), 1200-1212 (2019).
- Toda, M., et al. Population-based active surveillance for culture-confirmed candidemia - four sites, United States, 2012-2016. Morbidity and Mortality Weekly Report Surveillance Summaries. 68 (8), 1-15 (2019).
- Lee, C. N., Hsu, R., Chen, H., Wong, T. W. Daylight photodynamic therapy: an update. Molecules. 25 (21), 5195 (2020).
- Wainwright, M.
- Wong, T. W., et al. Indocyanine green-mediated photodynamic therapy reduces methicillin-resistant staphylococcus aureus drug resistance. Journal of Clinical Medicine. 8 (3), 411 (2019).
- Kim, M. M., Darafsheh, A. Light sources and dosimetry techniques for photodynamic therapy. Photochemistry and Photobiology. 96 (2), 280-294 (2020).
- Wong, T. W., Sheu, H. M., Lee, J. Y., Fletcher, R. J. Photodynamic therapy for Bowen's disease (squamous cell carcinoma in situ) of the digit. Dermatologic Surgery. 27 (5), 452-456 (2001).
- Wong, T. W., et al. Photodynamic inactivation of methicillin-resistant Staphylococcus aureus by indocyanine green and near infrared light. Dermatologica Sinica. 36 (1), 8-15 (2018).
- Stasko, N., et al. Visible blue light inhibits infection and replication of SARS-CoV-2 at doses that are well-tolerated by human respiratory tissue. Scientific Reports. 11 (1), 20595 (2021).
- Crosbie, J., Winser, K., Collins, P. Mapping the light field of the Waldmann PDT 1200 lamp: potential for wide-field low light irradiance aminolevulinic acid photodynamic therapy. Photochemistry and Photobiology. 76 (2), 204-207 (2002).
- Feenstra, R. P., Tseng, S. C. Comparison of fluorescein and rose bengal staining. Ophthalmology. 99 (4), 605-617 (1992).
- Demidova, T. N., Hamblin, M. R. Effect of cell-photosensitizer binding and cell density on microbial photoinactivation. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 49 (6), 2329-2335 (2005).
- Shahid, H., et al. Duclauxin derivatives from fungi and their biological activities. Frontiers in Microbiology. 12, 766440 (2021).
- Arendrup, M. C., Park, S., Brown, S., Pfaller, M., Perlin, D. S. Evaluation of CLSI M44-A2 disk diffusion and associated breakpoint testing of caspofungin and micafungin using a well-characterized panel of wild-type and fks hot spot mutant Candida isolates. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 55 (5), 1891-1895 (2011).
- Mukaremera, L., Lee, K. K., Mora-Montes, H. M., Gow, N. A. R. Candida albicans yeast, pseudohyphal, and hyphal morphogenesis differentially affects immune recognition. Frontiers in Immunology. 8, 629 (2017).
- Hung, J. H., et al. Recent advances in photodynamic therapy against fungal keratitis. Pharmaceutics. 13 (12), 2011 (2021).
- Martinez, J. D., et al. Rose Bengal photodynamic antimicrobial therapy: a pilot safety study. Cornea. 40 (8), 1036-1043 (2021).
