我们描述了一种详细的方案,用于制备经冷冻保存后的hESC来源的视光感受器前体细胞,并将其移植到rd10小鼠的视网膜下腔。
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| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| 0.3% 妥布霉素 | 诺华 | NDC 0078-0813-01 | Tobrex (3.5 g) |
| 0.3% 妥布霉素和 0.1% 地塞米松 | 诺华 | NDC 0078-0876-01 | Tobradex (3.5 g) |
| 0.5% 盐酸丙帕他卡因 | 爱尔康 | NDC 0998-0016-15 | 0.5% Alcaine (15 mL) |
| 1 mL 结核菌素注射器 | Turemo | SS01T2713 | |
| 1% 托吡卡胺 | 爱尔康 | NDC 0998-0355-15 | 1% Mydriacyl (15 mL) |
| 2.5% 盐酸去氧肾上腺素 | 爱尔康 | NDC 0998-0342-05 | 2.5% Mydfrin (5 mL) |
| 24 孔组织培养板 | Costar | 3526 | |
| 30 G 一次性针头 | 贝克顿·迪金森 (BD) | 305128 | |
| 33 G,20 mm 长钝针 | Hamilton | 7803-05 | |
| 自动细胞计数仪 | NanoEnTek | 型号:Eve | |
| 不含维生素 A 的 B27 | Life Technologies | 12587001 | 2%36 |
| 丁丙诺啡 | Ceva | Vetergesic vet (0.3 mg/mL) | |
| CKI-7 | Sigma | C0742 | 5 µM36 |
| 环孢素 | 诺华 | 260 g/L 饮用水 | |
| 第 32 天人胚胎干细胞来源的光感受器前体细胞 | 杜克-国大医学院 | 人胚胎干细胞分化 32 天。参见参考文献 36 中的方案。 | |
| 纱布 | Winner Industries Co. Ltd. | 1SNW475-4 | |
| 格拉斯哥最低必需培养基 | Gibco | 11710–035 | |
| 人胚胎干细胞系 H1 | WiCell 研究所 | WA01 | |
| 人脑源性神经营养因子 (BDNF) | Peprotech | 450-02-50 | 10 ng/mL36 |
| 人睫状神经营养因子 (CNTF) | Prospec-Tany Technogene | CYT-272 | 10 ng/mL36 |
| 盐酸氯胺酮 (100 mg/mL) | Ceva Santé Animale | KETALAB03 | |
| LN-521 | Biolamina | LN521-02 | 1 µg36 |
| mFreSR | STEMCELL Technologies | 5854 | |
| 微量玻璃注射器 (10 mL) | Hamilton | 7653-01 | |
| N-[N-(3,5-二氟苯乙酰基-L-丙氨酰)]-S-苯基甘氨酸叔丁酯 (DAPT) | Selleckchem | S2215 | 10 µM36 |
| N-2 补充剂 | Life Technologies | A13707-01 | 1%36 |
| 非必需氨基酸 (NEAA) | Gibco | 11140–050 | 1x36 |
| NutriStem XF 培养基 | Satorius | 05-100-1A | |
| 手术显微镜 | 蔡司 | OPMI LUMERA 700 | 带内置 iOCT 功能 |
| PRDM(光感受器分化培养基,50 mL) | 杜克-国大医学院 | 参见培养基成分36。基础培养基:10 µM DAPT、10 ng/mL BDNF、10 ng/mL CNTF、0.5 µM 视黄酸、2% B27 和 1% N2。基础培养基组成:1x GMEM、1 mM 丙酮酸钠、0.1 mM β-巯基乙醇、1x 非必需氨基酸 (NEAA)。 | |
| 丙酮酸 | Gibco | 11360–070 | 1 mM36 |
| Rd10 小鼠 | 杰克逊实验室 | B6.CXB1-Pde6brd10/J 小鼠 | 性别:雄性/雌性,年龄:P20(注射时),体重:3–6 g |
| 视黄酸 | Tocris Bioscience | 0695/50 | 0.5 µM36 |
| 圆形盖玻片 (12 mm) | 赛默飞世尔科技 | 12-545-80 | |
| SB431542 | Sigma | S4317 | 0.5 µM36 |
| Vidisic 凝胶 (10 g) | Dr. Gerhard Mann | ||
| 盐酸赛拉嗪 (20 mg/mL) | Troy Laboratories | LI0605 | |
| β-巯基乙醇 | Life Technologies | 21985–023 | 0.1 mM36 |
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