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一种面向科研人员设计的开源常温灌注系统

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DOI：

10.3791/68722

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2025年7月18日

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1Surgical Oncology Program, National Cancer Institute, National Institutes of Health, 2Instrumentation Development and Engineering Application Solutions, National Institute of Biomedical Imaging and Bioengineering, National Institutes of Health, 3Radiology and Imaging Sciences, Department of Interventional Radiology, National Institutes of Health, 4Histopathology and Autopsy Pathology, Laboratory of Pathology, National Institutes of Health, 5Division of Cancer Treatment and Diagnosis, National Cancer Institute, National Institutes of Health, 6Department of Perioperative Medicine, National Institutes of Health, 7Blood Services Section, Department of Transfusion Medicine, National Institutes of Health, 8Translational Hepatology Section, Liver Disease Branch, National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Diseases, National Institutes of Health, 9Center for Immuno-Oncology, National Cancer Institute, National Institutes of Health

本文内容

摘要

在此，我们介绍一种开源、可修改的常温灌注方案 离体 一种灌注系统，旨在克服现有平台成本高昂和灵活性不足的问题，从而在临床前生物医学研究中实现更便捷、更经济且可重复使用的操作。

摘要

整合 离体 移植前用于人体器官的灌注设备已改善了受体的预后并提高了器官可及性，同时为转化医学研究揭示了新的探索方向。然而，这些设备可供实验改造的空间有限，且前期投入成本高昂，单次使用费用对科研人员而言亦难以承受。此外，生物医学研究迫切需要更优的临床前模型，以实现在多细胞器官环境中对细胞过程进行真实可靠的探究。

为了使更广泛的研究群体能够使用类似技术，我们利用 readily sourced 部件构建了一台低成本、模块化的常温灌注装置，并采用可由用户修改的 Python 代码进行控制。由于该系统不依赖定制化硬件，研究人员可根据特定研究需求自行搭建并扩展该系统。

本文详细描述了机器的设置和灌注过程，分享了我们在猪和人类器官方面的经验，并提供了初步的概念验证实验结果。这些研究证明了利用完整的人体组织来探究病理生理学和复杂细胞过程的潜力。

引言

尽管短时间（<12小时）常温机械灌注此前已用于移植前的肾脏和肝脏1,2,3,4,5，长时间常温 离体 2020年，随着Liver4Life机器的问世，肝脏灌注成为现实6该技术旨在扩大可用的供体器官数量，但其潜在的转化应用价值已迅速被科研界所认识。7,8,9,10,11,12对于 bench 科学家和传统研究实验室而言，由于前期投入和持续性成本高昂，这些临床工具几乎无法获得12,13临床常温灌注设备的价格超过25万美元，每次运行所需的单次使用耗材费用在9,500至60,000美元之间13,14,15,16,17,18,19,20,21,22,23此外，专有权利以及无法对现有技术进行定制化调整，使得科学应用面临挑战。

生物医学研究中对更优的临床前模型的迫切需求24,25,26，结合前述局限性，促使我们开发了一种开源且可修改的灌注系统（图1）。该系统的回路设计与开发遵循成本效益、实验室空间需求以及在转化应用中的可移动性原则。该系统构建成本为48,000–66,000美元，每次灌注成本为1,000–2,300美元，通过整合易于获取的独立组件并运行可免费下载的代码实现。系统通过迭代优化过程完成，使用了供体猪血和过期人血、猪肝脏以及手术室中获取的部分人肝组织（补充表1、补充表2和补充表3）。器官被安置在一个封闭的容器中，该容器可优化标本位置，以最大限度减少压力性坏死、便于理想插管路径、引流溢出液体，并确保恒温状态。储液器在将灌注液导向流入回路前可容纳约2–3 L灌注液。血液透析对于肝脏灌注中的电解质稳态和血液浓缩至关重要6,27,28,29，本系统通过一个带有独立滚压泵的旁路回路实现了血液透析功能。药物输注用于支持生理功能（例如全肠外营养[TPN]、胆盐等30），增强血管张力（依前列醇、去氧肾上腺素），防止凝血（依诺肝素）和感染（哌拉西林-他唑巴坦、两性霉素）。通过实时在线传感器监测血气、压力和流量数值，以确保生理性的灌注参数。该系统具有高度用户适应性，硬件组件可在回路中任意位置进行整合。此外，回路中的各个独立组件均可互换或修改，以适应特定的研究问题和实验需求。例如，通过简单移除泵头前的Y型连接器，即可将双流入回路调整为适用于单流入器官（如肾脏或胰腺）的灌注模式；同时可在回路任意位置安装输注/取样阀。此外，该系统由Python代码驱动，可根据最终用户设定的灌注参数实现半自动化灌注（补充图1）。例如，传感器持续采集动脉血气（ABG）、压力和流量读数，并作为输入信号自动调节氧合器气体流量、泵速等输出指令。图形用户界面（GUI）允许用户根据需要手动覆盖该自动化操作。该回路的高度可定制性是其显著特征，显著拓展了该系统在广泛实验研究中的整体适用性。

该系统的全部资源均可免费获取（https://github.com/CCR-SOP/OpenSourcePerfusionSystem.git），旨在促进协作与创新，推动转化科学多个领域迈向更深入的知识探索。

肝脏透析装置示意图及实验；药物输注、血液储液器、传感器、透析过程。
图1：开源灌注系统。（A）用于肝脏灌注的双入流设置的开源灌注系统示意图。（B）器官灌注期间系统的三维（3D）渲染图，显示屏幕上的软件集成。（C）猪器官灌注实验期间灌注设备的照片。图中暴露的配置仅用于演示目的；在实际灌注过程中，无菌加热罩会覆盖器官，以维持无菌环境。P/F传感器：压力和流量传感器。HA：肝动脉。PV：门静脉。HV：肝静脉。BD：胆管。请点击此处查看此图的放大版本。

方案

本方案的实施遵循本机构人类研究伦理委员会的伦理标准，并遵守所有涉及人类受试者和组织的研究适用指南与法规。

1. 仪器设置

  1. 表格准备
    1. 用70%酒精喷雾彻底消毒桌面和移动推车，并仔细擦拭。将移动推车垂直放置于桌面左侧。 在本实验方案中连接所有管路和硬件之前，应使用70%酒精喷洒进行消毒；如适用，可采用高压灭菌。
      注意：在进行任何器官操作或干预之前，应使用无菌手套和酒精喷雾，在灌注前及整个灌注过程中保持无菌状态。
    2. 用无菌蓝色手术单覆盖工作台，然后铺上吸水垫。
    3. 将储液罐支架固定在靠近实验台的推车支腿上，环状部分向外伸出，距离约12" 工作站台面底部下方
    4. 将鼓形漏斗放置在工作站右侧，其出口管悬于台面前缘之外。裁剪圆形记忆海绵以填充鼓形漏斗底部，预留4" 出水口附近留出溢流间隙。将与呼吸器相连的泡沫下方放置隔膜。
    5. 获取2个水加热毯，将其放置在泡沫垫插入物上，连接管朝向毯子的左上方。剪掉管路上的白色夹子，并插入3/16" 将雄性鲁尔接头分别插入每根管路中。将Y型分流的水加热罐的进水和出水管路各一条连接至每条毯子，并固定。
    6. 取无菌加温巾，找到中央蓝色方块。将其对折两次，在折叠角处剪去2 mm，形成一个流出孔。将无菌巾覆盖在滚筒上，使剪出的孔与流出管口对齐。
    7. 获取3D打印的出口连接器，并将磁铁放入凹槽中。将铺巾从出水口下方穿过，使铺巾上的切口与连接器及磁铁上的孔对齐。放置第二块磁铁，使其与出水口对齐，以固定铺巾。
    8. 将多余的无菌洞巾提起，完全覆盖鼓状漏斗，并用橡皮筋或弹性绑带固定。将多余的洞巾边缘向下折叠覆盖顶部，形成无菌屏障。在折叠好的洞巾上方重新放置第二个水浴套。
    9. 剪取约30" 1/4片" 将管路一端连接至鼓形漏斗出口底部的出口接头，另一端连接至储液瓶的进液倒刺接头。
  2. 泵和氧合器的准备
    1. 将泵放置在靠近工作台边缘的移动推车上，支架及两个夹子紧接置于泵的后方，使夹子距离泵6" 位于泵的上方。
    2. 获取2个泵头并固定 在泵中。
    3. 获取2个氧合器，并将其水平固定在支架的夹子中。将氧合器的方向调整为接头朝外，侧向接头朝右。
      注意：带有鲁尔接头的氧合器需要采用另一种配置方式，标签朝外，内侧卡爪朝上。
  3. 气体混合器准备
    1. 裁剪两段（2）4英尺长的1/8英寸材料" 管路并插入一个1/8英寸的公接头" 将每根管子的末端接上鲁尔接头。将一根管子分别连接至每条动脉和静脉气体流入端。
    2. 剪切两条（2）2" 1/4块" 管路并连接一个1/4" 将雌性鲁尔接头连接到一端。将每根管路分别安装在每个氧合器右上方的凸头上。
    3. 连接动脉和静脉的1/8" 将气体流入管连接至各自氧合器右上角的鲁尔接头。
  4. 血液透析管路准备
    1. 从血液透析套件中移除所有管路，仅保留直接连接至滤器的管路（蓝色、红色、绿色和黄色管路）。将滤器固定在工作站后方的打孔板上，约12" 位于泵的右侧，或与储液槽对齐。
    2. 在滤器右侧紧邻处放置1个大型滚柱泵，用于血液流入。在血液滚柱泵右侧放置2个较小的蠕动泵。
      1. 获取两根（2）1/8th 蠕动泵管路并放置 位于白色泵夹内。连接两个（2）雌性1/8th 每根管路两端均有鲁尔接头。
    3. 在工作站右侧悬挂一个5 L的透析液袋。
      1. 将透析液袋连接至血液透析滤器的进液端，通过接上1/8th 将管路连接至袋子的鲁尔接头。将1/8英寸公型鲁尔接头连接至该管路末端，并将其接入流入蠕动泵管路。
    4. 透析液流入/流出：获取3 1/8th 两端均配有1/8英寸公接头的软管th 鲁尔
      1. 流入：将近端连接至泵管的远端，远端连接至黄色流入管（带1/8英寸雌性鲁尔接头），再连接至血液透析滤器。
      2. 流出：将近端连接至带有1/8英寸雌性鲁尔接头的绿色流出管路，远端连接至蠕动泵流出管路。将1/8英寸管路连接至蠕动泵的远端，并通过鲁尔接头将液体排入废液袋中。
  5. 近端回路构建
    1. 将储液槽放入储液槽架中，确保外侧数字和黄色帽连接器朝外。
    2. 剪取约36" 5/16" 管路，并将近端连接至储液罐底部的出水阀。连接 5/16" 将Y型连接器连接至该管路的远端。
    3. 剪切两条（2）4" 5/16 的长度" 管路并将其连接至Y型连接器的末端。将这4条管路的每一端分别连接" 将管子套在每个泵头的水平插针上。
    4. 剪切两条（2）4" 1/4 长度" 管路并将其一端分别连接至泵头的垂直接头。将远端连接至每个氧合器的左下叉状接口。
    5. 剪切两条（2）2" 1/4 长度" 管路，并在一端连接一个雌性鲁尔接头。添加一个雄性鲁尔帽，将其连接到每个氧合器的右下叉口。
  6. 静脉通路建立
    1. 剪取一条 30" 5/16 的长度" 管路，并将近端连接至静脉氧合器的流出端（右侧）接头。将其切成两半，并放置一段5/16" Y型连接器套在远端切断处，将另一部分重新连接至Y型连接器的顶端接头。
    2. 侧向取样电路：截取一根（1）2" 1/4块" 导管，并使用持针器拉伸近端。将其连接到另一个5/16的凸缘上" Y型连接器
      1. 获取一个比色皿传感器，将带刺的一端连接到2" 连接至Y型接头的管路。剪去1-2" 远端比色皿管路末端并连接至1/4英寸公接头" 鲁尔接头。校准后连接至分流传感器的近端，远端连接1/8英寸公头" 鲁尔接头转1/8" 管路
      2. 将雌性T型接头的水平端连接至1/8" 管路和雄性鲁尔接头。在垂直方向上，连接一个采样 clave。连接一个 1/8" 将雄性鲁尔接头连接至T型连接管剩余的水平端。
      3. 切12" 1/8" 管路，将近端连接至采样 clave，并连接一个 1/8" 将公型鲁尔接头连接至远端，并与另一个母型三通连接器相连。在该母型三通连接器的一侧，连接一段1/4" 雄性鲁尔接头，并使用2连接至流入通道" 1/4" 管路
    3. 返回到 5/16 的远端" 管路并连接另一根5/16" Y型连接器。获取约55" ¼英寸管的一端并连接到5/16英寸管的顶端" Y型连接器
    4. 血液透析管路建立：连接1/4英寸" 雄性鲁尔接头连接至1/4的远端" 管路。将管路穿过大滚轮泵，连接至血液透析滤器顶部的血液流入端（带蓝色线条的管路）。
      1. 剪取一条（1）24" 一块 1/4英寸管路，并在近端连接一个1/4英寸公型鲁尔接头。将此管路连接至血液流出端的血液透析滤器（红色标记管路）。将远端连接至储液罐的进液倒刺接头。
    5. 返回以完成通向标本的静脉流入通路。剪取一段（1）36" 1/4块" 管路并拉伸以适配 5/16 的凸起接头" Y型连接器
    6. 药物输注部位：获取3 四通旋塞阀并线性连接。将此组件连接至一个雌性T型接头的垂直端口。在雌性T型接头的直线端口上，连接两个雄性1/4" 卢尔斯。插入第12片段" 从管路的左侧。
    7. 将外部流量传感器安装到 药物输注位点后使用1/4英寸管路。获取1个9" 在鼓形漏斗水平位置安装并固定。进行切割，切口为2" 位于流量传感器末端的远端，将带倒刺的压力传感器插入1/4" 管路。将管路的远端置于鼓形漏斗的中心。预留一根（1）1/4"用于标本静脉插管的雄性鲁尔接头
  7. 动脉回路建立
    1. 再剪取约30" 5/16英寸的一段" 管路，并连接动脉氧合器右侧流出端接头的近端。将此管路约在中间位置剪断，连接一个1 5/16" Y型连接器
    2. 侧向取样电路：按照步骤1.6.2所述，创建一个相同的侧向取样电路，并将其连接至Y型连接器的下端，省略比色皿。完成后，将出流端1/8" 鲁尔接头连接至T型连接管。
    3. 剪切一条（1）36" 1/4块" 管路并将其安装到5/16英寸接头的凸缘上" Y型连接器
    4. 重复步骤1.6.7。预留一个（1）¼英寸雄性鲁尔接头，用于向标本进行动脉插管。
  8. 静脉流出道建立
    1. 剪取约30" 1/4" 连接管路，将一个1个¼英寸鲁尔接头（雄性）连接至近端，用于连接标本的下腔静脉（IVC）流出道。将远端连接至储液罐的其中一个进液倒刺接头。
    2. 将这段管子剪成约6" 从储液槽中取出并连接2 两端各接一个1/4英寸公型鲁尔接头。在垂直端插入带 clave 的母型三通用于取样。
  9. 将灌注液按步骤4所述引入回路。按照步骤6.1.4或步骤6.2.4所述复温并连接标本，开始灌注。

2. CDI 传感器校准

  1. 确保校准气体瓶已装满，并按照用户操作手册安装，同时将监测仪设置为校准模式。按照制造商的说明进行校准。
  2. 校准完成后，立即断开传感器-电缆头装置与监测仪的连接，并迅速将其整合到相应的静脉和动脉侧管路中。鲁尔接头在步骤1.6.2和1.7.2中建立。

3. 代码启动

  1. 下载、安装并打开 GitHub 仓库中的 Python 代码。确保已正确安装 Python 和 PyCharm 软件。
  2. 为每次灌注运行创建独立的分支，以实现准确的数据记录。启动后，图形用户界面（GUI）将显示两个窗口。建议每个显示器各显示一个窗口，以便于硬件控制和灌注参数的查看。
  3. 通过图形用户界面上显示的相应按钮，手动调整灌注参数或实现灌注自动化（补充图 1）。

4. 灌注液制备与系统预充

  1. 在器官灌注前约2小时启动管路预充，以纠正代谢/电解质紊乱、恢复至正常体温，并给予抗凝剂、抗生素及其他药物。
  2. 猪源灌注液
    1. 获取2 L O型全猪血并引入 通过一个开放的50-100 mL注射器引流，将血液导入储液器。取约1 mL全血，使用床旁检测设备测量基础pH值、电解质和血细胞比容。
    2. 根据需要给予8.4%碳酸氢钠等分试样，以中和冷血液保存液引起的酸性。必要时启动血液透析，以纠正高钾血症和乳酸性酸中毒，并滴定至目标血细胞比容浓度。调节气体流量，使生理pO₂和pCO₂水平达到目标值。
    3. 按照下文所述（第5节）给予药物。
    4. 根据需要间歇性输注1-2 L O型全血，以在整个灌注实验过程中维持红细胞压积在约30-40%。
  3. 人体灌注液
    1. 从血库获取血型匹配的血液制品（接近有效期或捐赠用于科研目的）。
      注意：每次灌注实验大约需要浓缩红细胞（RBCs）和血浆各4个单位。
    2. 洗涤红细胞以去除防腐剂，并在灌注前纠正红细胞压积中的电解质紊乱。红细胞洗涤两次。
      1. 红细胞洗涤：将浓缩红细胞（pRBC）与0.9% NaCl按1:1比例加入离心管中。在1300 × g 孵育15分钟。用移液器吸除上清液，并按与红细胞沉淀物1:1的比例重新加入新鲜的0.9% NaCl溶液。再次按上述条件离心，弃去第二次上清液，获得最终洗涤的红细胞沉淀物。
    3. 将洗涤后的红细胞沉淀用50-100 mL开放式注射器注入储液器中。将4单位血浆放入储液器，开始循环。
    4. 开始灌注液循环后，启动透析、加温毯和气体流入。
    5. 根据需要采集灌注液样本并施加药理学干预，以确保在器官灌注前使灌注液水平尽可能接近生理状态。
    6. 洗涤并加入额外的洗涤后pRBC沉淀，必要时通过血液透析滴定容量状态，以维持红细胞压积水平在30%-40%。

5. 药理学干预与输注制剂的制备

  1. 抗生素和抗真菌药物给药
    1. 将两瓶 2.5 g 的哌拉西林/他唑巴坦与 40 mL 无菌生理盐水在无菌标本杯中混合。取 10 mL 加入储液器中作为"抗生素预充"。
      1. 将剩余混合液用 60 mL 无菌生理盐水稀释，并分装至两个 50 mL 注射器中。将其中一个注射器连接至注射泵，并设定为以 41 µL/min 的速度持续向门静脉药物输注部位（步骤 1.6.6）输注。
      2. 将剩余的抗生素溶液保存于 4 °C 冰箱中。
    2. 用 10 mL 无菌水重悬一瓶 50 mg 的两性霉素 B。
      1. 抽取 1 mL 浓缩的两性霉素 B，与 9 mL 无菌生理盐水混合。在灌注开始时，将此 10 mL 混合液加入储液器，作为"抗真菌预充"。
      2. 每 12 小时向储液器中加入 1 mL 浓缩的两性霉素 B。
  2. 抗凝
    1. 将 1 mL（100 mg）依诺肝素与 49 mL 无菌生理盐水混合。在灌注开始时，按每升灌注液加入 5 mL 混合液的比例加入储液器，作为"抗凝预充"。
      1. 将剩余的依诺肝素溶液保存于 4 °C 冰箱中。
      2. 每 12 小时向储液器中加入依诺肝素溶液（5 mL/1 L 灌注液）。
  3. 类固醇
    1. 用 20 mL 无菌水重悬 1 g 甲泼尼龙。
    2. 在开始灌注前，根据剂量要求进行系统预充：猪肝脏给予 10 mL（500 mg）甲泼尼龙；部分人肝脏给予 2 mL（100 mg）甲泼尼龙琥珀酸钠。
    3. 将剩余混合液用 40 mL 生理盐水稀释后装入 50 mL 注射器，置于注射泵中，以 33 µL/min 的速度持续向门静脉药物输注部位（步骤 1.6.6）输注。
  4. 肠外营养与胆盐
    1. 在无菌标本杯中，将 1.7 g 牛磺胆酸与 50 mL 10% 氨基酸+电解质浓缩型全肠外营养液（未与葡萄糖混合）混合。吸入 50 mL 注射器中，置于注射泵中，以 83 µL/min 的速度持续向门静脉药物输注部位（步骤 1.6.6）输注。
  5. 血管张力控制
    1. 血管扩张：在无菌杯中，将 0.5 mg 依前列醇与 50 mL 无菌生理盐水混合，装入 50 mL 注射器。将其置于注射泵中，并连接至肝动脉流量传感器近端的 clave 接口。
      1. 根据需要进行推注或持续输注（10 µL/min），以达到目标平均动脉压和/或对抗血管痉挛。
    2. 血管收缩：在无菌杯中，将 5 mL（50 mg）去氧肾上腺素与 45 mL 无菌生理盐水稀释，装入 50 mL 注射器。将混合液保存于 4 °C 冰箱中，根据需要进行推注以维持目标平均动脉压。
      注：此步骤很少需要，可省略重悬操作，仅在必要时实施。
  6. 压力与流量传感器校准
    1. 压力校准：在无灌注液流动的情况下校准压力传感器。当管路末端暴露于空气中时，若压力读数非零，应按照制造商说明将传感器重新归零（对应 0 mmHg 压力）。为验证压力测量准确性，可轻柔阻塞管路的近端和远端，产生升高的压力进行测试。
    2. 流量校准：在器官灌注前，待回路中灌注液开始循环后进行校准，以确保测量准确。夹闭流量传感器远端的管路以切断流动。若流量读数非零，应按照制造商说明将流量传感器重新归零。随后松开夹闭，恢复流动并进行准确的流量测量。

6. 肝脏获取

  1. 猪的获取
    注意：猪肝脏取自当地肉铺，符合美国农业部（USDA）关于牲畜人道处理的操作规范。解剖过程由研究团队指导，包括肝下和肝上腔静脉及胆管的分离。
    1. 用稀释的碘液在无菌生理盐水中对肝脏进行消毒，并将其置于盛有冰的无菌盆中。辨认门静脉、肝动脉、上腔静脉和胆总管，分别插管并用4-0丝线结扎固定。
      注意：由于胆管直径较小，且为防止猪的变异胆道系统发生胆道阻塞，通常使用带侧孔的血管导管进行胆管插管。
    2. 用3升冷的无菌生理盐水（门静脉2升，肝动脉1升）冲洗插管的门静脉和肝动脉，随后使用1升冷的器官保存液（门静脉750毫升，肝动脉250毫升）灌注。将肝脏浸没于冷的器官保存液中，置于冰上保存运输。
    3. 按照上述方法（步骤4.1）启动系统，直至达到生理参数。
    4. 将插管的肝脏浸入预热的无菌生理盐水中，以快速复温并清除可能存在的空气栓子。将相应的流入管路连接至门静脉和肝动脉插管。调节泵速，以达到生理范围内的血流和压力值。
    5. 将腔静脉插管连接至流出管道，以引导液体回流至储液器，从而完成循环回路。
    6. 在将注射器管路连接至胆管插管和收集用锥形小瓶之前，先排空胆囊中残留的胆汁。
  2. 人类样本获取
    1. 按照上述方法（步骤4.1）对系统进行预处理。
    2. 在标准肿瘤切除术后获取人体标本。测量 在体内 术中多普勒超声校准的流量速率 离体 系统。在手术分离过程中辨认段门静脉、肝动脉和胆管。按照标准手术技术横断三联结构，并将手术野标本传递至无菌后方器械台。
    3. 识别并插管节段门静脉、肝动脉、肝静脉和胆管，用4-0丝线或Prolene缝线固定。
      注意：如果该肝段没有主要的流出静脉，则省略流出道插管，以避免充血性肝病。此时，盆腔流出道作为肝静脉/下腔静脉流出管道使用。
    4. 返回到 离体 在实验室中称量标本。将标本浸入温热的无菌生理盐水中，并连接相应的流入/流出导管。将胆管插管连接至注射器导管，引流至锥形小瓶。
    5. 开始灌注，并滴定泵流速以达到目标灌注流量和压力参数。

7. 灌注参数滴定

  1. 在多个时间点采集肝前（肝动脉和门静脉侧回路）和肝后（下腔静脉或储液池出流）的灌注液样本，根据床旁血气、电解质、血细胞比容和血红蛋白值测定灌注参数。
  2. 在整个灌注过程中，使用手动标本分析对CDI传感器进行校准。
  3. 相应调整血液透析的流入和流出，以维持体液容量状态和30–40%的血细胞比容浓度，并纠正任何代谢和电解质紊乱。
  4. 根据需要手动补充5%葡萄糖、游离水、8.4%碳酸氢钠和0.9% NaCl，以纠正电解质异常。

8. 灌注回路的变体

  1. 运输适应
    1. 在运行期间将泵连接至移动电源，以便在运送至成像设备的途中实现持续灌注。在灌注过程中，将移动电源插入交流电源插座，以对内置外接电池充电。
    2. 灌注实验结束后，将移动电源从墙壁交流电源插座上拔下。
    3. 断开氧合器的气体输入。夹闭血液透析旁路回路，并断开至滤器的血液输入。停止透析液泵。
    4. 从输入管路中取下流量传感器。断开药物输注管路并关闭旋塞阀。将压力传感器从输入/输出插口拔下。
    5. 小心地将鼓形漏斗和管路移至移动推车上，此时该装置已成为独立单元，可运送至成像室。

结果

代表性猪肝脏灌注实验
为节约成本，整猪肝脏取自当地屠宰场，并用于机器开发过程中的各项优化和测试阶段（补充表1）。本文评估了三次代表性肝脏灌注实验的前24小时数据（图2）。平均肝动脉压为80 mmHg ± 11 mmHg，平均门静脉压为7.1 mmHg ± 3.3 mmHg，对应的血流速分别为107 mL/min ± 102 mL/min和501 mL/min ± 329 mL/min。压力和血流量较大的标准差与肝脏尺寸差异较大相关，实验所用猪体重范围为50磅至350磅。双入流回路可实现生理性的氧分压梯度，动脉血氧饱和度（SO2）平均为95 ± 7.4%，显著高于门静脉血平均SO2值85 ± 13%（p < 0.001）。肝静脉流出血液的SO2为74 ± 18%，表明器官存在氧消耗（p < 0.01）；外周pH值维持在生理范围内，为7.2 ± 0.09。其他生理参数，如总血红蛋白（9 ± 2.5 g/dL）、红细胞压积（28.3 ± 6.4%）、血糖水平（477 ± 15 mg/dL），以及乳酸（3.0 ± 2.5 mmol）和钾离子（-0.77 ± 2.3 mmol）的变化，均通过定期取样进行监测。在猪肝脏灌注中，胆汁生成量是器官活性的重要指标。当器官恢复至正常体温后，手动排空胆囊，并将胆总管连接至细导管以收集胆汁。整个灌注期间总胆汁产量为41 ± 6.9 mL，平均速率为6.9 ± 4.0 mL/h。

灌注指标图：流速、压力、氧合、pH值、红细胞指标；灌注实验结果。
图2：猪肝脏灌注期间灌注液各项指标（n = 3）。（A）肝动脉和门静脉随时间变化的平均血流流入速率（mL/min）。（B）肝动脉和门静脉随时间变化的平均血流流入压力（mmHg）。（C）肝动脉、门静脉与下腔静脉之间红细胞O2饱和度百分比的比较，显示双入流之间的氧差异以及流出液中的氧消耗情况。门静脉与动脉饱和度之间（p < 0.0001）、门静脉与下腔静脉饱和度之间（p < 0.01）、以及动脉与下腔静脉饱和度之间（p < 0.0001）均存在统计学显著差异。（D）肝动脉、门静脉和下腔静脉之间的血液pH值评估。（E）灌注过程中红细胞压积（%）和血红蛋白（g/dL）水平（上图），以及门静脉钾离子（mmol）的变化（下图），后者作为溶血的标志。（F）反映整个灌注过程中循环平均葡萄糖水平（mg/dL）的储液器葡萄糖浓度。（G）与0时刻肝动脉流入、下腔静脉流出及系统灌注液的乳酸值相比，整个灌注过程中乳酸水平（mg/dL）的变化。（H）灌注期间随时间变化的胆汁生成量（mL）。请点击此处查看该图的放大版本。

代表性的人类实验运行
三个携带肿瘤的人类肝段进行了灌注，灌注持续时间根据实验需求在48-72小时之间图3）。为了比较代表性应用运行之间的数据，我们评估了生化值的前48小时。灌注近似于 体内 参数包括持续低压、高容量的门静脉灌注流入，以及脉动性高压、低容量的动脉流入，这些参数可实时显示，便于进行精确调整。若肝脏在灌注开始后两小时内未能达到生理水平的生化指标，则终止实验。对于成功的肝脏灌注，平均肝动脉压为84 mmHg ± 11 mmHg，平均门静脉压为9 mmHg ± 4 mmHg，对应的血流量分别为113 mL/min ± 66 mL/min和317 mL/min ± 302 mL/min。双入流回路可实现生理性的氧分压差，平均动脉血氧饱和度（SO2) 与门静脉平均血氧饱和度相比为98% ± 3%2 92% ± 7%（p < 0.0001）。SO2 肝静脉流出道的血流中氧饱和度为86% ± 9%，提示存在氧消耗（p < 0.0001），系统内各部位的pH值均处于生理范围，为7.3 ± 0.09。通过定期取样，持续监测其他生理参数，包括总血红蛋白（10.2 g/dL ± 1.6 g/dL）、血细胞比容（30.2% ± 5.5%）、葡萄糖水平（170 mg/dL ± 68 mg/dL）以及乳酸变化（3.6 mmol/L ± 2.2 mmol/L）。在一次代表性实验中，胆汁平均生成速率为1.4 mL/h。在灌注实验开始前和结束时均采集组织活检用于组织学分析。代表性组织切片显示，灌注后肝脏实质、转移性神经内分泌肿瘤及转移性结直肠腺癌组织结构保存良好。

灌注指标图和肝脏图像；包括流入速率、葡萄糖、器官保存研究。
图 3：人肝脏节段灌注期间的灌注液和组织指标（n = 3）。（A）肝动脉和门静脉的平均灌注液流入速率（mL/min）。（B）肝动脉和门静脉随时间变化的平均灌注液流入压力（mmHg）。（C）流入肝动脉、流入门静脉和流出肝静脉的红细胞氧饱和度（%）。门静脉与动脉饱和度之间（p < 0.0001）、门静脉与下腔静脉（IVC）饱和度之间（p < 0.0001），以及动脉与IVC饱和度之间（p < 0.0001）存在统计学显著差异。（D）流入肝动脉、流入门静脉和流出肝静脉的灌注液pH值。（E）灌注过程中红细胞相关指标，包括平均血细胞比容（%）和血红蛋白（g/dL）水平（上图），以及灌注液钾离子（mmol）相对于基线随时间的变化（下图）。（F）肝动脉流入、门静脉流入和肝静脉流出的灌注液葡萄糖浓度（mg/dL）随时间的变化。（G）灌注液乳酸浓度（mg/dL）相对于基线随时间的变化，分别来自肝动脉流入、肝静脉流出和系统性灌注液。（H）随时间变化的胆汁生成量（mL）。（I）人肝脏节段（Couinaud II-IV）在灌注中（左）和灌注后（右）的状态，显示系统优化后无压力性坏死。左侧图像顶部存在因术中止血导致的表面烧灼区域。（J）灌注后组织切片，显示肝实质结构（苏木精-伊红染色，10倍放大，插图40倍放大；比例尺50 µM）。（K）灌注后组织切片，显示转移性神经内分泌肿瘤（苏木精-伊红染色，10倍放大，插图40倍放大；比例尺250 µM）。（L）灌注后组织切片，显示转移性结直肠腺癌（苏木精-伊红染色，10倍放大，插图40倍放大；比例尺50 µM）。请点击此处查看该图的放大版本。

代表性应用：灌注标本的CT成像
将临床数据源（如计算机断层扫描（CT）或磁共振（MR）成像）与病理学相结合，有望推动个性化诊断和医学的发展。然而，病理报告仅提供总结性发现，而实体瘤固有的异质性远超人类对病灶边界的识别能力。一种潜在的解决方案是进行ex vivo成像，随后立即制备大尺度组织切片，以实现空间保留的细胞数据（例如空间转录组学、高重免疫荧光）与放射组学的整合。为适配系统上的常规成像，构建了一套可移动装置，包括将灌注泵切换至外部电池供电，以确保在运输和成像过程中持续供电（图4A）。将肝脏置于CT检查台上后，注入含碘造影剂并获取图像，结果显示其放射学特征与in vivo获取的图像一致（图4B）。

代表性应用：肾脏和胰腺灌注
由于系统设计本身具有适应性，可扩展用于其他器官的灌注（图4C-F），无需双入路灌注，从而降低了单次使用成本。为验证该系统的适用性，我们移除了门静脉回路，采用单一动脉灌注入路（补充图2），对一个人体肾脏（图4C）和一个人体部分胰腺（图4E）进行了灌注。灌注后的代表性组织切片显示了肾小球（图4D）和胰岛（Langerhans岛）（图4F）的结构。

Liver perfusion system setup and results; CT scan, extracted liver, histology slices; organ study.
图 4灌注机器的代表性应用：CT成像与器官模块性 (A) 系统的移动式改装，用于运输。B注射碘对比剂后肝脏肿瘤的代表性CT图像 体内 （顶部）和 离体 灌注后（底部）。(C经改造机器单入口灌注人肾。D灌注后组织切片显示肾小球和集合管（苏木精-伊红染色，8×；比例尺 250 µm）。E单流入式改造机器上的人类远端胰腺灌注。F灌注后组织切片显示胰岛（苏木精-伊红染色，8×；比例尺 250 µm）。 请点击此处以查看此图的放大版本。

补充图1：用于实现半自动灌注的Python代码设置。 图示说明代码所使用的输入和输出参数，这些参数通过增加常用的手动调整项（见表格）来实现半自动化。 请点击此处下载该文件。

补充图2：用于肾脏和胰腺灌注的单流入示意图。P/F传感器：压力和流量传感器。请点击此处下载该文件。

补充图3：红细胞优化。（A）仅血液灌注实验表明，使用无血浆血红蛋白作为细胞裂解的替代指标时，低转速条件下的溶血程度显著低于高转速条件（p < 0.01）。（B）随时间变化的血浆溶血情况的定性比较在视觉上显示，低转速状态下的溶血程度低于高转速状态。（C-F）在具有不同阻力水平和储液池整合程度的系统中，使用血浆替代物评估溶血情况：（C）平行回路设置与封闭回路设置及带储液池设置之间的乳酸水平存在显著差异（p < 0.0001 和 p < 0.0001， respectively）。（D）平行回路设置与串联封闭回路设置及串联带储液池设置之间的钾离子水平存在显著差异（p < 0.0001 和 p < 0.0001， respectively）。（E）平行回路设置与串联封闭回路设置及串联带储液池设置之间的红细胞压积水平存在显著差异（p < 0.0001 和 p < 0.0001， respectively）。（F）平行回路设置与串联封闭回路设置及串联带储液池设置之间的血红蛋白水平存在显著差异（p < 0.0001 和 p < 0.0001， respectively）。请点击此处下载该文件。

补充表1：猪器官优化灌注。在优化阶段进行的35次猪器官灌注实验，包括25个部分肝脏、2个肾脏和8个完整肝脏。内容包含灌注持续时间及终止原因。请点击此处下载该文件。

补充表 2：人肝脏验证与应用灌注。14 例人部分肝脏灌注，包括从标准左、右半肝切除术到单肝段灌注实验的各类样本。内容包含病理学信息、实验目的、灌注持续时间以及终止灌注的原因。请点击此处下载该文件。

补充表3：灌注液优化实验。 22次仅使用灌注液的优化实验运行记录，包括物种类型、实验目的、实验持续时间以及终止原因。请点击此处下载该文件。

讨论

常温灌注设备在实体器官移植前的广泛应用已推动了显著进展 离体 灌注。尽管在某些情况下，将其用于部分器官在技术上是可行的7,8,9由于高昂的成本和有限的可获得性，它们对科研人员而言仍然难以获取。在本研究中，我们旨在通过使用易于获取的组件和可自由访问的代码，为更广泛的科研群体提供一种可与之媲美且开放源码的替代方案，以支持多种科研终点的实验需求。

该方案中的多个步骤对于实现稳定的器官灌注至关重要。其中最关键的步骤之一是有效减压，以防止实质塌陷和窦状隙扩张。通过采用由振荡隔膜支撑的记忆泡沫材料，可均匀分散器官重量，维持接近大气压的门脉压力，从而实现充分引流。最初使用金属格栅支撑肝脏时，组织学分析和灌注过程中的超声成像均观察到实质塌陷和窦状隙充血。改用带孔硅胶吊床后，该问题得到部分缓解。尽管宏观上的压力性坏死得以消除，但在灌注48小时后，仍存在明显的实质塌陷证据，表现为门静脉压力显著升高以及标本严重充血。也曾尝试将肝脏浸没于生理盐水或血液中，此方法虽可有效缓解充血和门脉高压，但由于所需灌注液体积过大、无菌条件难以维持以及向储液器引流效率低下，因而不具备可行性。与漂浮技术相比，当将肝脏置于带有振荡隔膜的记忆泡沫垫上以更均匀地分散重量时，我们观察到相似的接近大气压的门脉压力（图1B 和 图3I）。该设计使得组织更柔软、灌注更充分，同时仍允许标本血液流出物高效、顺畅地引流。

第二个关键步骤是尽量降低电路阻力，以减少对红细胞的剪切应力，从而防止溶血。为此，我们引入了带有节流组件的侧支回路，以促进生理性的血流，同时避免灌注液承受不必要的压力。在机器灌注过程中，溶血是一种不可避免且持续发生的现象。在系统早期版本中，严重的溶血是导致灌注提前终止的重要原因之一。系统对红细胞施加的剪切应力主要来源于泵，原因包括灌注液的停滞与再循环，以及管道和膜的管径过窄。目前使用的泵仍会造成一定程度的溶血，且溶血程度随时间推移而增加。泵的效率是影响溶血的重要因素，较高的流速可能更有利，因其可降低血液再循环率和二次流动，这可通过增加灌注液体积和/或降低泵速来实现。由于大量pRBCs（浓缩红细胞）通常难以获取，我们致力于重新设计系统，使其在较低泵速下仍能实现生理性的流量，从而整体降低回路中的阻力31。为进一步降低回路的固有阻力，我们采用了并联的侧支回路，结果随时间推移，乳酸和钾离子水平更低，血细胞比容和血红蛋白水平更高（补充图3）。最后，当前的血液滤过器集成在门静脉侧支回路中，血液由蠕动泵推动，但由于滤器及其泵本身产生显著的阻力和剪切应力，导致大量溶血。我们目前的一项优化工作重点是探索将血液透析管路整合至储液器中，以取代该侧支回路。若能去除临床级血液滤过器，则可进一步取消蠕动泵，从而进一步减少溶血，并降低系统的整体成本。

尽管本文所述系统具有实用性和适应性，但仍应认识到其局限性。值得注意的是，可重复的灌注存活时间约为3-4天。如上所述，溶血仍是限制灌注持续时间的主要因素。然而，我们发现，若需要更长的灌注时间，显著增加灌注液总体积可在很大程度上延长灌注持续时间，但这会超出本文所述范围，增加资源消耗。最佳灌注时间最终取决于针对该系统所提出的特定科学问题。例如，研究药物递送动力学或通路抑制可在2-12小时内有效完成，而涉及细胞募集进入肿瘤微环境的问题则可能需要48小时32。对于细胞外基质重塑（即纤维化）等应用而言，延长存活时间超过当前窗口可能具有重要意义，但我们认为大多数与癌症相关的应用无需额外的资源投入。本研究主要聚焦于以肿瘤学为导向的转化应用，旨在将人类肿瘤维持在可控的ex vivo环境中，使治疗药物能够通过完整的实质组织和肿瘤血管系统递送，从而更接近体内情况的复杂性25。在此背景下，该系统解决了当前临床前肿瘤学模型中长期存在的药物递送、肿瘤异质性和药物代谢等问题，这或许可以解释为何临床前研究的成功常常难以转化为临床疗效33,34。

与现有的商用设备相比，该系统具有显著的成本优势、模块化可扩展性以及实验灵活性。商用设备通常为专有系统，价格昂贵，且主要针对移植环境下的全器官灌注进行优化。该系统的可扩展性是商用设备所不具备的，因此其应用前景十分广泛。本文所展示的系统并非最终产品，而是一种可修改、可调整并可重新用于满足多种科研需求和实验问题的蓝图，能够填补多个学科领域科研人员的工具空白。

该平台未来的发展方向包括缩小至亚段肝组织并减少灌注液体积，以实现使用自体血液制品支持肿瘤免疫学应用。我们还在致力于整合多组学平台和实时成像技术，以动态监测治疗反应，为深入的药理学研究奠定基础。我们希望该系统能够促进跨学科合作与创新，推动转化科学多个领域取得更深层次的知识进展。

披露

作者在本研究及其研究结果中无任何利益冲突。本出版物中报告的研究由美国国立卫生研究院院内研究计划资助。标本成像和初步放射组学的研究经费来自工作人员临床医生研究奖，项目编号231145，授予Elliot Levy。

致谢

作者谨向以下单位致以感谢和诚挚谢意，感谢他们对本项目的支持：美国国立卫生研究院输血医学科、美国国立卫生研究院围手术期医学科、美国国立卫生研究院病理科、Wagner's Meats。

材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
1/4" ID x 3/8" OD × 1/16" Wall Versilon  C-219-A 柔性聚氯乙烯管美国塑料公司57682
10 cc 带 BD 鲁尔锁扣接头的注射器BD302995
1 cc 带 BD 鲁尔锁扣接头的注射器BD309628
25 Fr 通道套管XVIVO11.01.520
3D打印流体传感器支架n/an/a请参见 GitHub 获取 SDL 文件
3D打印磁铁支架n/an/a请参见 GitHub 以获取 SDL 文件
48 英寸高 x 24 英寸宽 白色打孔板家得宝109099
四通旋塞阀，黄色，两端为雌性鲁尔锁，带旋转锁的雄性鲁尔接头World Precision Instruments14057-10
50 cc 带 BD 鲁尔锁扣接头的注射器BD309653
ACF00023 Tygon S3  由 Saint Gobain 提供 | 5/16" 内径 × 1/2" O.D. × 3/32" 壁式 | E-3603 非DEHP | 无邻苯二甲酸盐实验室管路 | 50英尺包装长度软管仓库ACF00023
两性霉素兽医药学n/ahttps://mms.mckesson.com/product/505635/Xgen-Pharmaceuticals-39822105505
带倒刺接头，Y型连接器，3/8" 管子编号，聚丙烯，5个/包VWRMFLX06368-24材料类型无特殊要求
CDI 540 校准品Terumo540CL
CDI 电缆头支架TerumoCDI519CL
CDI 监测仪Terumo500AVHCTCL
CDI 极夹TerumoCDI517CL
Clave IV 输液管无针连接器，每箱100个Henry Schein Dental1097422
含电解质的克林米克斯Baxter2B7721仅使用氨基酸侧，切勿与葡萄糖侧混合
CO2 USP 级 50 LB罗伯特的氧气R25
用于图形用户界面的计算机显示器 n/an/a用于查看图形用户界面的任意类型屏幕
数据采集设备Measurement ComputingUSB-202需要2个或3个，具体取决于设备的连接方式
泵用台式电源Levitronix100-40015需要2个，一个用于HA，一个用于PV
Eagle 1662 型鼓形漏斗配黄铜筛网，18" 直径 × 7" 身高，黄色全球工业WB440139
依前列醇兽医药学n/ahttps://mms.mckesson.com/product/1239813/Sun-Pharmaceuticals-62756005940
雌性鲁尔接头 ¼" 天然尼龙洁净室制造刷毛；10 个装VWRMFLX40314-26材料类型无特殊要求
聚丙烯接头，直型，雌性鲁尔接头转软管接头，1/8" ID；25/PKVWRMFLX30800-08材料类型无特殊要求
聚丙烯接头，直型，公鲁尔锁扣转软管接头，1/8" ID；25/PKVWRMFLX30800-18材料类型无特殊要求
接头，聚偏氟乙烯，直通型，软管接头异径管，5/16英寸" ID x ¼" ID；10/PKVWRMFLX40614-62材料类型无特殊要求
流式样本制备 n/an/a请参见 GitHub 获取 SDL 文件
流量传感器夹KeyenceFD-XC20R1
流量传感器控制器KeyenceFD-XA1
流量传感器探头KeyenceFD-XS20
流量传感器电源KeyenceMS2-H50
气体混合器 多项选择题GB100+2需要2个，一个用于HA，一个用于PV
气体瓶 A，CDI 500TerumoCDI506
气体瓶 B，CDI 500TerumoCDI507
胰高血糖素试剂盒，胰高血糖素 1 mg，无菌水 1 mL，西林瓶Fresenius0593-03
H/S 比色皿 1/4x1/4 带6" EXT 1CA=10EA 70-2006-4298-4Terumo6934
硬壳型储液槽与 150 µm 过滤器Haemonetics Corporation00205-00
热冷敷垫，Mul-T-Pad，TP12E 型号，垫片尺寸 13" × 18" Gaymar TP700 泵专用穆尔特帕德8002-062-012https://www.amazon.com/Heat-Cold-Mul-T-Pad-Gaymar-TP700/dp/B00HFF7876。  注意，Stryker 也提供与之类似的加热水套 "Mul-T-Pad C2Dx 8002-062-012"
胰岛素兽医药学https://mms.mckesson.com/product/294668/Novo-Nordisk-Pharmaceutical-00169183311
Ismatec 型号 Ecoline 泵 VC-280 IIIsmatecISM1078B-115
LTV 1200 儿科呼吸机Carefusionhttps://coastbiomed.com/product/carefusion-ltv-1200-ventilator/?srsltid=AfmBOopSCKwTLmKhZXcI
CgGQHfiKwj__78jNWxVaznJCS
aq3RjXw2E-H
该儿科呼吸机模型由医院富余设备改装而成，并非购买所得。任何商用间歇性泵或通气装置均可作为合适的替代设备。
主泵电缆Levitronix190-10331需要2个，一个用于HA，一个用于PV
MaPerSol 器官保存液，1L 袋装保存溶液PS005
Masterflex  适配器接头，鲁尔接鲁尔，三通，Avantor VWRMFLX45508-56材料类型无特殊要求
Masterflex  雌性鲁尔接头 3/16" 天然PVDF洁净室制造ID巴氏消毒棒VWRMFLX40314-22材料类型无特殊要求
Masterflex Ismatec Reglo 数字泵，配备 MasterflexLive，4 通道，8 滚轮；115/230 VACMasterflexMFLX78018-22https://www.avantorsciences.com/us/en/product/NA5139147/masterflex-ismatec-reglo-digital-multichannel-pumps-avantor
Masterflex 雄性鲁尔接头 1/4" 天然PVDF洁净室制造ID巴氏管，10个/包VWRMFLX40318-27材料类型无特殊要求
Masterflex 雄性鲁尔接头 3/16" 天然PVDF洁净室制造ID巴氏接头VWRMFLX40318-22材料类型无特殊要求
Medline 胎盘盆标准托盘MedLineDYNJS胎盘
美敦力 DLP 2" 血管套管，3 mm 斜面尖端可吸收缝合线MDT30007
记忆泡沫 最佳价格床垫https://www.amazon.com/Best-Price-Mattress-Twin-Topper/dp/B07999TQWB/ref=sr_1_2_sspa?crid=17LQXX80WX5FK&dib=eyJ2Ijo
iMSJ9.oRyEE5KwmKy1pb-VvY9MOJg
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=se&关键词=记忆泡沫&qid
=1748632609&记忆泡沫
%2Caps%2C133&sr=8-2-spons&sp_csd
=sp_atf&th=1
带直通无螺纹孔的钕磁铁McMaster Carr336K834
氮气，125 立方英尺，4.5 级高纯度罗伯特的氧气R32
氧气，255立方英尺，4.5级高纯度罗伯特的氧气R5
PDMSXA-2500：PermSelect  2500 平方厘米膜组件——带倒刺接头，不含 MCC选择性渗透PDMSXA-2500可选用鲁尔接头或带凸纹接头，但连接方式会有所不同
盐酸去甲肾上腺素注射液，USP 10 mg/mL，1 mL 小瓶健康第一1000520
用于 ORS 液体加温系统的无菌聚氨酯加温毯，44" x 66"MedLineORS-300H
猪血Lampire7204911
压力传感器监测器PendoTECHPMAT2HR
PRISMAFLEX M60 套件巴克斯特医疗公司106696
用于连续性肾脏替代治疗的 PrismaSol BGK0/2.5 替代液，非 PVC 包装Baxter110240S
泵安装底板Levitronix190-10313需要2个，一个用于HA，一个用于PV
泵用USB适配器Levitronix100-30391需要2个，一个用于HA，一个用于PV
PuraLev 驱动系统Levitronix100-91025需要2个，一个用于HA，一个用于PV
PuraLev IP 适配器电缆 Levitronix190-10475需要2个，一个用于HA，一个用于PV
SHUNT 传感器系统 SYS500 - CA = 20EA 98-0702-1541-7TerumoCDI510H可从 esutures 购买过期产品——效果相同，有时会出现轻微的 pH 漂移
一次性使用压力传感器，非无菌，聚砜材质，1/4英寸软管接头PendoTECHPREPS-N-025
一次性压力传感器PendoTECHPREPS-N-025可经灭菌后重复使用，但每次使用前需测试传感器
8.4% 碳酸氢钠溶液 实验级Lab Alley144-55-8
水合牛磺胆酸钠Millipore Sigma86339-25G
Solumedrol兽医药学n/ahttps://mms.mckesson.com/product/1212228/Dr-Reddys-Laboratories-43598013074
Stryker 加热垫 亚马逊B01M74Y8DI
SU泵头，聚丙烯，3/8卡套“，伽马 >25 kGy，DCP-30.2-G25，PuraLev Levitronix100-91071可经灭菌后重复使用 
注射泵（Pump 11 Elite）哈佛仪器公司70-4504每种输注药物各需一个
注射器管路GSSME2020
热水器与循环泵格兰特科学TC120
Zosyn兽医药学n/ahttps://mms.mckesson.com/product/1009456/Auromedics-Pharmaceuticals-55150011930

参考文献

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