方法文章

专为研究科学家设计的开源常态灌注系统

DOI：

10.3791/68722

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2025年7月18日

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Surgical Oncology Program, National Cancer Institute, National Institutes of Health, 2Instrumentation Development and Engineering Application Solutions, National Institute of Biomedical Imaging and Bioengineering, National Institutes of Health, 3Radiology and Imaging Sciences, Department of Interventional Radiology, National Institutes of Health, 4Histopathology and Autopsy Pathology, Laboratory of Pathology, National Institutes of Health, 5Division of Cancer Treatment and Diagnosis, National Cancer Institute, National Institutes of Health, 6Department of Perioperative Medicine, National Institutes of Health, 7Blood Services Section, Department of Transfusion Medicine, National Institutes of Health, 8Translational Hepatology Section, Liver Disease Branch, National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Diseases, National Institutes of Health, 9Center for Immuno-Oncology, National Cancer Institute, National Institutes of Health

本文内容

摘要

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

在这里，我们提出了一种开源、可修改的常温 离体 灌注系统的方案，旨在克服现有平台的高成本和有限的灵活性，从而在临床前生物医学研究中实现更可及、更具成本效益和迭代的使用。

摘要

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

在移植前整合人体器官离 体 灌注机改善了受者的结果并增加了器官的可用性，同时揭示了转化医学研究的新途径。然而，这些机器用于实验修改的可用性有限，同时给研究科学家带来了大量的前期成本投资和高昂的每次使用成本。此外，生物医学研究中非常需要改进的临床前模型，以允许在多细胞器官环境中对细胞过程进行真实询问。

为了向更大的研究界提供获得类似技术的机会，我们构建了一个具有成本效益的模块化常温灌注机，完全由现成的部件运行，并使用用户可修改的 Python 代码运行。由于该系统没有定制的硬件，研究人员可以根据个性化研究应用的需要构建和增强系统。

在本文中，我们详细描述了机器设置和灌注过程，传达了我们在猪和人体器官方面的经验，并提供了早期的概念验证实验结果。这些研究表明，使用完整的人体组织研究病理生理学和复杂的细胞过程具有潜力。

引言

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

尽管在移植前曾将短时 （<12 h） 常温机器灌注用于肾脏和肝脏 1,2,3,4,5，但 2020 年，Liver4Life 机器6 实现了长时间的正常离体肝脏灌注。这项技术的目的是为了扩增活的供体器官，但可能的转化应用对研究界来说是显而易见的 7,8,9,10,11,12。对于实验室科学家和传统研究实验室来说，由于大量的前期和经常性成本，这些临床工具几乎肯定是遥不可及的12,13。临床常态吸热灌注机的价格在 250,000 美元以上，一次性用品每次运行的价格从 9,500 美元到 60,000 美元不等 13,14,15,16,17,18,19,20,21,22,23.此外，专有权利和无法定制现有技术使科学应用具有挑战性。

生物医学研究中对改进的临床前模型 24,25,26 的突出需求，加上上述限制，激发了开源、可修改灌注系统的创建（图 1）。电路设计和开发以成本利用、实验室空间要求和转化应用的移动性原则为指导。该系统的构建成本为 48,000 美元至 66,000 美元，每次灌注成本在 1,000 美元至 2,300 美元之间，这是通过集成由可免费下载代码运行的现成单个组件来实现的。该系统通过迭代过程进行了优化，该过程利用供体猪血和来自手术室的过期人血、猪肝和部分人肝段（补充表 1、补充表 2 和补充表 3）。器官被安置在一个封闭的盆中，该盆对标本进行最佳定位，以最大限度地减少压力坏死，实现理想的插管轨迹，排出径流，并确保体温正常。储液罐在流向流入回路之前容纳大约 2-3 L 灌注液。血液透析对肝脏灌注 6,27,28,29 中的电解质稳态和血液浓缩至关重要，通过带有独立滚轮泵的侧回路进行集成。药物输注支持生理功能（例如，全肠外营养 （TPN）、胆盐等30）、增强血管张力（依前列醇、去氧肾上腺素）、防止凝血（依诺肝素）和感染（哌拉西林-他唑巴坦、两性霉素）。使用实时在线传感器确保生理灌注参数，以获得血气、压力和流量值。该系统允许最大的用户适应性，因此硬件组件的集成可以在电路中的任何位置进行。此外，电路中的每个单独元件都可以互换或修改，以便根据特定的研究问题和实验需求进行定制。例如，只需在泵头之前移除 Y 型连接器，就可以改变双进流回路，以便对具有单个进流的器官（即肾脏或胰腺）进行灌注，并且用于输注/采样的灭菌器可以安装在回路内的任何位置。此外，该系统使用 Python 代码运行，允许根据最终用户规定的一组指定灌注参数进行半自动灌注（补充图 1）。例如，传感器可获取连续的动脉血气 （ABG）、压力和流量读数，这些读数作为输入来实施输出命令，以自动调整氧合器气体流量、泵速等。图形用户界面 （GUI） 允许根据需要手动覆盖此自动化。电路的可定制性是其标志，它拓宽了该系统对各种实验研究的整体适用性。

免费 （https://github.com/CCR-SOP/OpenSourcePerfusionSystem.git） 访问整个系统，以鼓励协作和创新，努力在转化科学的多个领域打造新的知识深度。

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图 1：开源灌注系统。 （A） 用于肝脏灌注双流入设置的开源灌注系统示意图。（B） 器官灌注期间系统的三维 （3D） 渲染，并集成了软件，如屏幕上所示。（C） 猪灌注实验过程中的灌注机照片。图中公开的配置仅用于演示目的。在灌注过程中，无菌加热帘覆盖器官以保持无菌外壳。P/F 传感器：压力和流量传感器。HA： 肝动脉。PV： 门静脉。HV：肝静脉。BD： 胆管。 请单击此处查看此图的较大版本。

方案

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

该协议是根据我们机构人类研究伦理委员会的道德标准进行的，并遵守涉及人类受试者和组织的研究的所有适用指南和规定。

1. 机器设置

  1. 餐桌准备
    1. 用 70% 酒精喷雾对桌面和移动推车消毒并彻底擦拭。将移动推车垂直于桌子的左侧放置。在整个方案中连接所有管道和硬件之前，喷洒 70% 酒精或高压灭菌器（如果适用）进行消毒。
      注意：在进行任何器官处理或干预之前，请使用无菌手套和酒精喷雾剂，以促进灌注前和灌注过程中的无菌。
    2. 用无菌的蓝色窗帘覆盖工作站，然后用吸水垫覆盖。
    3. 将储液槽支架连接到最靠近工作台的推车支腿上，环向外突出，在工作站顶部底部下方约 12 英寸处。
    4. 将鼓漏斗放在工作站的右侧，喷嘴悬垂在桌子的前边缘。剪出圆形记忆泡沫以填充滚筒的底部，在出水口附近留出 4 英寸的间隙以供流出。将隔膜放在连接到呼吸器的泡沫下方。
    5. 获取 2 个水加热毯，将它们放在泡沫插件的顶部，连接器管朝向毯子的左上角。从管子上剪下白色夹子，然后将 3/16“ 公鲁尔倒钩插入每个管子中。从 Y'ed 水加热箱管线到每条毯子，确保 1 条流入线和 1 条流出线。
    6. 获得无菌保暖窗帘并确定中心的蓝色方块。对折两次，并从折痕的角上切下 2 毫米，形成一个流出孔。将无菌窗帘放在滚筒顶部，使切孔与流出口对齐。
    7. 获取 3D 打印的出口连接器并将磁铁放入凹槽中。通过流出口放在悬垂下，并将切割孔对准连接器和磁铁上的孔。放置第二个与流出口对齐的磁铁以固定窗帘。
    8. 抬起多余的悬垂帘以覆盖整个滚筒漏斗，并用橡皮筋/松紧带固定。将多余的窗帘折叠在顶部以形成无菌屏障。更换折叠窗帘顶部的第二个水套。
    9. 剪下一段 ~30 英寸的 1/4 英寸管子，并将近端从滚筒漏斗喷口底部连接到出口件，并将远端连接到储液罐流入倒钩。
  2. 泵和氧合器准备
    1. 将泵放在最靠近工作站边缘的移动推车上，并在泵后方放置支架和两个夹具，使夹具位于泵上方 6 英寸处。
    2. 获得 2 个泵头并固定在泵中。
    3. 获得 2 个氧合器，并放置在水平配置连接到支架的夹子内。调整氧合器的方向，使倒钩朝外，横向倒钩指向右侧。
      注意： 带有 Luer 连接器的氧合器需要替代配置，标签朝外，内插脚朝上。
  3. 气体混配器准备
    1. 剪下两 （2） 根 4' 的 1/8“ 管子，并将一个 1/8” 公鲁尔接头插入每根管子的末端。将一根管子连接到每个动脉和静脉气体流入处。
    2. 剪下两 （2） 条 2 英寸 1/4 英寸的管子，并将 1/4 英寸的母鲁尔接头连接到一端。将这些管子中的每一个安装在每个氧合器的右上方倒钩上。
    3. 将动脉和静脉 1/8 英寸气体流入管连接到各自氧合器的右上方鲁尔接头。
  4. 血液透析回路准备
    1. 从血液透析套件中取出除直接进入过滤器的管道外的所有管道（蓝线、红线、绿线和黄线）。将过滤器固定在工作站背面的钉板上，距离泵右侧 ~12 英寸，或与储液槽对齐。
    2. 将 1 个大滚轮泵放在过滤器的右侧，用于血液流入。将 2 个较小的蠕动泵放在血液滚轮泵的右侧。
      1. 获取两 （2） 根 1/8蠕 动管，并放置在白色泵夹内。在每根管路的每一端连接两 （2） 个 1/8th 鲁尔接头内螺纹。
    3. 将一袋 5 L 透析液挂在工作站的右侧。
      1. 通过将 1/8管 路连接到透析袋的鲁尔接头，将透析液袋连接到血液透析过滤器入口处。将外螺纹 1/8th 鲁尔接头连接到该管路的末端，并将其连接到流入蠕动泵管路。
    4. 透析液流入/流出：获得 3 1/8管 路，每端配备一个 1/8外 螺纹鲁尔接头。
      1. 流入：将泵管的近端连接到远端，将黄色流入管（带有 1/8 内螺纹鲁尔接头）的远端连接到血液透析过滤器。
      2. 流出管：将近端连接到绿色流出管（带有 1/8 内螺纹鲁尔接头），将远端连接到流出蠕动泵管。将第 1/8 管连接到蠕动泵的远端，并通过鲁尔接头将其排入废液袋中。
  5. 近端电路创建
    1. 将储液槽放在储液槽支架内，外部编号和黄色盖连接器朝外。
    2. 切割 ~36 英寸的 5/16 英寸管，并将近端连接到储液槽底部的流出口。将 5/16“ Y 型连接器连接到该管路的远端。
    3. 剪下两 （2） 条 4 英寸长的 5/16 英寸管，并将它们连接到 Y 型连接器的末端。将这些 4 英寸管子的每一端连接到每个泵头的水平插脚上。
    4. 剪下两 （2） 根 4 英寸长的 1/4 英寸管，并将 1 根连接到泵头的每个垂直倒钩上。将远端连接到每个氧合器的左下叉。
    5. 切割两 （2） 根 2 英寸长的 1/4 英寸管，并将母鲁尔接头连接到一端。添加一个公鲁尔帽并将其连接到每个氧合器的右下叉。
  6. 建立静脉回路
    1. 剪下一 （1） 根 30 英寸长的 5/16 英寸管，并将近端连接到静脉氧合器的流出口（右）倒钩。切成两半，并在远端切割端放置一个 5/16“ Y 型连接器。将另一半重新连接到 Y 型连接器的顶部倒钩。
    2. 侧面采样电路：切割一 （1） 条 2 英寸 1/4 英寸管，并使用针头驱动器拉伸近端。将其连接到 5/16“ Y 型连接器的另一个倒钩。
      1. 获取比色皿传感器。将带倒钩的一侧连接到连接到 Y 型连接器的 2“ 管。切掉 1-2 英寸的远端比色皿管并连接到外螺纹 1/4 英寸鲁尔接头。校准后连接到分流传感器的近端，并在远端将公 1/8“ 鲁尔接头连接到 1/8” 管。
      2. 将母 T 型连接器的水平方向连接到 1/8“ 管路和公鲁尔接头。在垂直方面，连接采样 clave。将 1/8“ 公鲁尔接头连接到 T 型连接器的其余水平方向。
      3. 剪下 12 英寸的 1/8 英寸管，将近端连接到采样器上，并将 1/8 英寸的公鲁尔接头连接到远端。将其连接到另一个母 T 型连接器。在母 T 型连接器的一侧，连接一个 1/4“ 公鲁尔接头，并使用 2” 的 1/4“ 管连接到流入通道。
    3. 返回到 5/16“ 管路的远端并连接另一个 5/16” Y 型连接器。获取 ~55 英寸的 1/4 英寸管，并连接到 5/16 英寸 Y 型连接器的顶端。
    4. 血液透析血液回路创建：将 1/4“ 公鲁尔接头连接到 1/4” 管的远端。将管路穿过大型滚轮泵。连接到血液透析过滤器顶部的进血口（蓝色线条管）。
      1. 切割一 （1） 条 24 英寸 1/4 英寸的管子，并将一个 1/4 英寸的外螺纹鲁尔接头连接到近端。将此管路连接到血液流出血液透析过滤器（红线管）。将远端连接到储液罐的流入倒钩。
    5. 返回以完成通向标本的静脉流入回路。剪下一 （1） 条 36 英寸 1/4 英寸的管子，并将其拉伸以适合 5/16 英寸 Y 型连接器的倒钩。
    6. 药物输注部位：获得 3 个四通旋塞阀，线性连接。将此部件连接到母 T 型连接器的垂直臂上。在母 T 型连接器的直插臂上，连接两个 1/4“ 公鲁尔接头。从管子的左侧插入 12 英寸。
    7. 在药物输注部位后，将外部流量传感器连接到 1/4 英寸管上。获得 1 个 9 英寸支架并固定在鼓漏斗的水平上。在流量传感器末端远端 2 英寸处切开一个，然后将带有倒钩的压力传感器插入 1/4 英寸的管道中。将管路的远端放入鼓漏斗的中心。保留一 （1） 个 1/4 英寸外螺纹 Luer 接头，用于将静脉插管到样本中。
  7. 动脉回路创建
    1. 再剪下一根 ~30 英寸的 5/16 英寸管，并连接动脉氧合器右侧流出倒钩的近端。大约在一半处剪断此管路并连接一个 1 5/16“ Y 型连接器。
    2. 侧面采样电路：按照步骤 1.6.2 中的说明创建一个重复的侧面采样电路，并将其连接到 Y 型连接器的下部，省略比色皿。完成后，将流出口 1/8“ 鲁尔接头连接到 T 型连接器。
    3. 剪下一 （1） 条 36 英寸 1/4 英寸的管子，并将其安装到 5/16 英寸 Y 型连接器的倒钩上。
    4. 重复步骤 1.6.7。保留一 （1） 个 1/4“ 公鲁尔接头，用于将动脉插管到样本中。
  8. 静脉流出道创建
    1. 切割 ~30 英寸的 1/4 英寸管，并将 1 个凸型 1/4 英寸鲁尔接头连接到近端，以连接到标本的下腔静脉 （IVC） 流出处。将远端连接到储液罐的流入倒钩之一。
    2. 从储液槽 ~6 英寸处剪下此管子，并将 2 1/4 英寸的公鲁尔接头连接到每端。插入一个母 T，并在垂直方面连接一个 clave 进行采样。
  9. 如步骤 4 中所述，将灌注液引入电路中。如步骤 6.1.4 中所述重新加热并连接样品。或步骤 6.2.4。并开始灌注。

2. CDI 传感器校准

  1. 确保校准器气瓶已装满并按照用户作手册进行安装，并且显示器设置为校准模式。按照制造商的说明进行校准。
  2. 校准完成后，断开传感器电缆头装置与监护仪的连接，并立即将其集成到相应的静脉和动脉侧回路中。鲁尔连接在步骤 1.6.2 和 1.7.2 中创建。

3. 代码启动

  1. 下载、安装并打开在 GitHub 存储库中找到的 Python 代码。确保正确安装 Python 和 PyCharm 软件。
  2. 为每次灌注运行创建一个唯一的分支，以实现准确的数据记录。启动后，将显示一个带有两个窗口的 GUI。每个显示器定位一个窗口，以便于控制硬件和灌注参数。
  3. 手动调整灌注参数或通过 GUI 上显示的相应按钮自动灌注（补充图 1）。

4. 灌注液创建和系统灌注

  1. 在器官灌注前约 2 小时灌注回路，以纠正代谢/电解质紊乱，升温至正常体温，并给予抗凝、抗生素和其他药物。
  2. 猪灌注液
    1. 获得 2 L OO 型全猪血，并通过打开的 50-100 mL 注射器排空，将其引入储液槽。取大约 1 mL 全血，在床旁机器上测量基线 pH 值、电解质和血细胞比容。
    2. 必要时服用 8.4% 碳酸氢钠等分试样，以抵消冷血防腐剂引起的酸度。根据需要开始血液透析以使高钾血症和乳酸血症恢复正常，并逐渐调整至所需的血细胞比容浓度。调整气体流量，使剂量达到生理性 pO2 和 pCO2 水平。
    3. 如下所述给药（第 5 节）。
    4. 根据需要保留 1-2 L 型 OO 全血用于间歇性推注，以在整个灌注实验中将血细胞比容维持在 ~30-40%。
  3. 人灌注液
    1. 从血库获取类型匹配的血液制品（接近过期或出于研究目的而捐献）。
      注：每次灌注实验大约需要 4 个单位的浓缩红细胞 （RBC） 和血浆。
    2. 在灌注之前，洗涤 pRBC 以去除防腐剂并使 RBC 沉淀中的电解质紊乱正常化。洗涤 RBC 两次。
      1. RBC 洗涤：将 pRBC 和 0.9% NaCl 以 1：1 的比例放入离心管中。以 1300 × g 离心 15 分钟。用移液管除去上清液，并以 1：1 的比例向 RBC 沉淀中加入新鲜的 0.9% NaCl。如上所述再次离心并去除第 2 个上清液，用于最终洗涤的 RBC 沉淀。
    3. 使用开口的 50-100 mL 注射器将洗涤后的 RBC 沉淀物引入储液槽中。将 4 单位的血浆放入储液槽中并开始循环。
    4. 开始透析、加热毯子，并在灌注液循环后引入气体。
    5. 对灌注液进行采样，并根据需要进行药物干预，以确保在器官灌注前尽可能接近生理灌注液水平。
    6. 洗涤并引入额外的洗涤 pRBC 沉淀，并根据需要通过血液透析滴定体积状态，以维持 30-40% 的血细胞比容水平。

5. 药物干预和输液准备

  1. 抗生素和抗真菌药物给药
    1. 将两瓶 2.5 g 哌拉西林/他唑巴坦混合在无菌标本杯中，加入 40 mL 无菌盐水。向储液槽中加入 10 mL 作为“抗生素引物”。
      1. 用 60 mL 无菌盐水稀释剩余的混合物，并分装在两个 50 mL 注射器中。将一个注射器连接到注射泵并编程，以 41 μL/min 的速度连续输送到门静脉药物输注部位（步骤 1.6.6）。
      2. 将剩余的抗生素保存在 4 °C 冰箱中。
    2. 用 10 mL 无菌水配制一瓶 50 mg 两性霉素。
      1. 吸取 1 mL 浓的两性霉素，并将其与 9 mL 无菌盐水混合。将 10 mL 混合物注入储液槽中，作为灌注开始时的“抗真菌初免”。
      2. 每 12 小时向储液器中施用 1 mL 浓的两性霉素。
  2. 抗凝
    1. 将 1 mL （100 mg） 依诺肝素与 49 mL 无菌盐水混合。在灌注开始时，每升灌注液中施用 5 mL 混合物，以进行“抗凝灌注”。
      1. 将剩余的依诺肝素溶液保存在 4 °C 冰箱中。
      2. 每 12 小时向储液器中施用依诺肝素溶液（5 mL/1 L 灌注液）。
  3. 类固醇
    1. 用 20 mL 无菌水配制 1 g 甲泼尼龙。
    2. 灌注开始前根据剂量规格灌注系统：猪肝接受 10 mL （500 mg） 甲泼尼龙。部分人类肝脏接受 2 mL （100 mg） 的 solumedrol。
    3. 在 50 mL 注射器中用 40 mL 生理盐水稀释剩余的混合物，并将其放入注射泵中，以 33 μL/min 的速度连续输送到门静脉药物输注部位（步骤 1.6.6）。
  4. 肠外营养和胆盐
    1. 在无菌标本杯中，用 50 mL 10% 氨基酸 + 电解质浓缩肠外营养成分 TPN（未与葡萄糖混合）配制 1.7 g 牛磺胆酸。吸入 50 mL 注射器中并放入注射泵中，以 83 μL/min 的速度连续输送到门静脉药物输注部位（步骤 1.6.6）。
  5. 血管张力控制
    1. 血管舒张：在无菌杯中放入 0.5 mg 依前列醇和 50 mL 无菌生理盐水重新配制，并放入 50 mL 注射器中。将其放入注射泵中，并将其连接到肝动脉流量传感器近端的刮刀上。
      1. 根据需要推注或持续输注 （10 μL/min） 以达到所需的平均动脉压和/或抵消血管痉挛。
    2. 血管收缩：在无菌杯中用 45 mL 无菌盐水稀释 5 mL （50 mg） 去氧肾上腺素，然后放入 50 mL 注射器中。将混合物储存在 4 °C 冰箱中，并根据需要推注以维持所需的平均动脉压。
      注意：这很少需要，可以省略重组，仅在需要时实施。
  6. 压力和流量传感器校准
    1. 压力校准：校准压力传感器，无需灌注液流动。如果按照制造商的说明显示非零压力读数，而管道末端对空气开放时压力为 0 mmHg，则传感器将重新归零。通过轻轻阻塞管的近端和远端以产生更高的压力，确保正确的压力测量。
    2. 流量校准：在器官灌注之前，一旦回路循环灌注液，就进行校准，以确保准确测量。夹住流量传感器远端的管道以切断流量。如果按照制造商的说明显示非零流量，则重新归零流量传感器。松开管子以允许流量和准确的流量测量。

6. 肝脏采购

  1. 猪采购
    注意：猪肝是从当地肉店采购的，符合美国农业部对牲畜的人道处理协议。解剖由研究团队指导，包括肝下和肝上腔静脉和胆管。
    1. 用无菌盐水中稀释的碘对肝脏进行消毒，并将其放入冰上的无菌盆中。识别门静脉、肝动脉、上腔静脉和胆总管，插管并用 4-0 丝带固定。
      注意：由于胆管直径小，通常用带孔的血管导管插管，以防止不同型猪胆系统的胆道阻塞。
    2. 用 3 L 冷无菌盐水（2 L PV：1 L HA）冲洗空心门静脉和肝动脉，然后用 1 L 冷器官保存溶液（750 mL PV：250 mL HA）冲洗。将肝脏浸入含冰的冷器官保存溶液中进行运输。
    3. 如上所述（步骤 4.1）灌注系统，直到满足生理参数。
    4. 将空心肝脏浸入温热的无菌盐水中，以快速复温并去除任何空气栓塞。将适当的流入管连接到门静脉和肝动脉插管。根据生理流量和压力值滴定泵速。
    5. 将腔静脉套管连接到流出管，以促进流出到储液器以完成回路。
    6. 在将注射器管连接到胆管套管和锥形小瓶进行收集之前，排空胆囊中的残留胆汁。
  2. 人力采购
    1. 如上所述灌注系统（步骤 4.1）。
    2. 在指定的标准护理肿瘤切除术后获取人体标本。通过术中超声测量 体内 流速，以便在 离体 系统上进行校准。在手术解剖过程中识别节段性门静脉、肝动脉和胆管。按照标准手术技术横切三联体，并将手术野的标本交给无菌后台。
    3. 识别并插管节段性门静脉、肝动脉、肝静脉和胆管，用 4-0 丝带或前线缝合固定。
      注意：如果该节段没有优势流出静脉，则省略流出插管，以避免充血性肝病。然后，盆地流出口充当肝静脉/IVC 流出管。
    4. 返回 离体 实验室并称量标本。将样品浸入温热的无菌盐水中，并连接相应的流入/流出管。将胆管套管连接到注射器管，以便将管子排至锥形瓶。
    5. 开始灌注并滴定泵流量以获得所需的流量和压力灌注参数。

7. 灌注参数滴定

  1. 在多个时间点从肝前（HA 和 PV 侧回路）和肝后（IVC 或盆流出）灭菌器中采样灌注液，用于根据床旁血气、电解质、血细胞比容和血红蛋白值滴定灌注参数。
  2. 使用手动样本分析在整个灌注过程中校准 CDI 传感器。
  3. 相应地调整血液透析的流入和流出量，以维持容量状态和血细胞比容浓度 30-40%，并纠正任何代谢和电解质紊乱。
  4. 根据需要手动加注 5% 葡萄糖、游离水、8.4% 碳酸氢钠和 0.9% NaCl 等分试样，以纠正电解质异常。

8. 灌注回路变体

  1. 运输适应
    1. 在运行期间将泵插入移动电源，以促进在到达成像机的途中持续灌注。将移动电源插入交流电源插座，在灌注过程中为外部电池充电。
    2. 灌注实验结束后，从墙上的交流电源插座上拔下移动电源。
    3. 断开氧气发生器的进气口。夹住血液透析侧回路并断开血液流入过滤器。停止透析液泵。
    4. 从进水管上拆量传感器。断开药物输注并关闭旋塞阀。从输入/输出插头上拔下压力传感器。
    5. 小心地将鼓漏斗和管路移动到移动推车上，该推车现在是一个独立的装置，可以运输到成像套件中。

结果

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

代表性猪运行
为了提高成本效益，从当地屠夫那里获得了整只猪肝，并灌注用于机器开发的各个优化和测试阶段（补充表 1）。在这里评估三种代表性肝脏运行的前 24 小时（图 2）。平均肝动脉压为 80 mmHg ± 11 mmHg，平均门静脉压为 7.1 mmHg ± 3.3 mmHg，流速分别为 107 mL/min ± 102 mL/min 和 501 mL/min ± 329 mL/min。压力和流量的大标准差与肝脏大小的巨大差异相关，猪的体重从 50 磅到 350 磅不等。双流入回路允许生理氧差异，平均动脉饱和度 （SO2） 为 95 ± 7.4%，而平均门静脉 SO2 为 85 ± 13% （p < 0.001）。肝静脉流出的 SO2 为 74 ± 18%，表明耗氧量 （p < 0.01），外周 pH 测量值在 7.2 ± 0.09 的生理范围内。通过定期取样，在整个灌注过程中监测其他生理参数，如总血红蛋白 （9 ± 2.5 g/dL）、血细胞比容水平 （28.3 ± 6.4%）、葡萄糖水平 （477 ± 15 mg/dL） 以及乳酸 （3.0 ± 2.5 mmol） 和钾 （-0.77 ± 2.3 mmol） 的变化。对于猪灌注，胆汁产生表明器官活力。一旦器官变温，就手动引流胆囊，并将胆总管连接到一根小管上进行收集。整个灌注过程中的总胆汁产生量为 41 ± 6.9 mL，速率为 6.9 ± 4.0 mL/h。

figure-results-1
图 2：猪肝灌注期间的灌注液指标 （n = 3）。 （A） 肝动脉和门静脉随时间变化的平均血液流入率 （mL/min）。（B） 肝动脉和门静脉随时间变化的平均血液流入压 （mmHg）。（C） 肝动脉、门静脉和下腔静脉之间 RBC O2 百分比饱和度的比较，显示双流入和流出耗氧量之间的氧差。确定门静脉和动脉饱和度 （p < 0.0001）、门静脉和 IVC 饱和度 （p < 0.01） 以及动脉和 IVC 饱和度 （p < 0.0001） 之间存在统计学显着差异。（D） 肝动脉、门静脉和下腔静脉之间血液 pH 值的评估。（E） 整个灌注过程中的血细胞比容 （%） 和血红蛋白 （g/dL） 水平（上图），以及作为溶血标志物的 PV 钾 （mmol） 的变化（下图）。（F） 反映整个灌注过程中平均回路葡萄糖 （mg/dL） 的储液器葡萄糖水平。（G） 与肝动脉流入、IVC 流出和系统灌注液中时间 0 乳酸值相比，整个灌注过程中乳酸水平 （mg/dL） 的变化。（H） 整个灌注过程中随时间推移的胆汁产生量 （mL）。 请单击此处查看此图的较大版本。

代表性的人类跑步
灌注 3 个荷瘤人肝段，灌注持续时间为 48-72 小时，具体取决于实验的要求（图 3）。为了比较代表性应用程序运行之间的数据，我们评估了前 48 小时的生化值。灌注近似 于 体内参数，具有连续低压、大容量门静脉流入和脉动性高压、低容量动脉流入，实时显示以便于滴定。如果灌注后 2 小时内肝脏未达到生理生化值，则终止实验。对于成功的肝脏灌注，平均肝动脉压为 84 mmHg ± 11 mmHg，平均门静脉压为 9 mmHg ± 4 mmHg，流速分别为 113 mL/min ± 66 mL/min 和 317 mL/min ± 302 mL/min。双流入回路允许生理氧差，平均动脉饱和度 （SO2） 为 98% ± 3%，而平均门静脉 SO2 为 92% ± 7% （p < 0.0001）。肝静脉流出的 SO2 为 86% ± 9%，表明耗氧量 （p < 0.0001），整个系统的 pH 测量值在 7.3 ± 0.09 的生理范围内。通过定期取样，在整个灌注过程中监测其他生理参数，如总血红蛋白 （10.2 g/dL ± 1.6 g/dL）、血细胞比容水平 （30.2% ± 5.5%）、葡萄糖水平 （170 mg/dL ± 68 mg/dL） 和乳酸变化 （3.6 mmol/L ± 2.2 mmol/L）。在代表性运行中，平均产生 1.4 mL/h 的胆汁。在灌注实验之前和结束时，获得活检用于组织分析。代表性组织切片显示灌注后肝实质、转移性神经内分泌肿瘤和转移性结直肠腺癌。

figure-results-2
图 3：人肝段灌注期间的灌注液和组织指标 （n = 3）。 （A） 肝动脉和门静脉的平均灌注液流入率 （mL/min）。（B） 肝动脉和门静脉随时间变化的平均灌注液流入压力 （mmHg）。（C） 流入肝动脉、流入门静脉和流出肝静脉的红细胞氧饱和度 （%）。确定门静脉和动脉饱和度 （p < 0.0001）、门静脉和 IVC 饱和度 （p < 0.0001） 以及动脉和 IVC 饱和度 （p < 0.0001） 之间存在统计学显着差异。（D） 流入肝动脉、流入门静脉和流出肝静脉的灌注液 pH 值。（E） 整个灌注过程中的红细胞指标，包括平均血细胞比容 （%） 和血红蛋白 （g/dL） 灌注液水平（上图）以及灌注液钾 （mmol） 随时间相对于基线的变化（下图）。（F） 流入肝动脉、流入门静脉和流出肝静脉随时间变化的平均葡萄糖浓度 （mg/dL）。（G） 流入肝动脉、流出肝静脉和全身灌注液的灌注液乳酸浓度 （mg/dL） 随时间相对于基线的变化。（H） 随时间推移的胆汁产生量 （mL）。（I） 灌注期间（左）和灌注后（右）的人肝段 （Couinaud II-IV） 显示系统优化后没有压力坏死。由于术中止血，浅表烧灼区域出现在左图的顶部。（J） 灌注后组织切片显示肝实质（苏木精和伊红染色，10 倍，插图 40 倍;比例尺 50 μM）。（K） 灌注后组织切片显示转移性神经内分泌肿瘤（苏木精和伊红染色，10 倍，插图 40 倍;比例尺 250 μM）。（L） 灌注后组织切片显示转移性结直肠腺癌（苏木精和伊红染色，10 倍，插图 40 倍;比例尺 50 μM）。 请单击此处查看此图的较大版本。

代表应用：灌注标本的 CT 成像
将计算机断层扫描 （CT） 或磁共振 （MR） 成像等临床数据源与病理学相结合的能力将促进个性化诊断和医学的发展。然而，病理报告是总结性发现，实体瘤固有的异质性远远超出了人类的描述能力。一种潜在的解决方案是进行 离体 成像，然后立即制备宏观组织切片，以允许空间保存的细胞数据的放射组学整合（例如，空间转录组学、高度多重免疫荧光）。为了在系统上适应常规成像，构建了一个移动装置，包括将泵过渡到外部电池电源，以在运输和成像过程中提供不间断的电力（图 4A）。肝脏在 CT 台上，施用碘造影剂，并获得图像，这些图像显示出与 体内 获得的放射学特征一致的影像学特征（图 4B）。

代表应用：肾脏和胰腺灌注
该系统的设计本身就适用于其他器官的灌注（图 4C-F），这消除了双流入的需要，从而降低了每次使用的成本。为了证明，我们移除了单个动脉流入的门静脉回路（补充图 2）并灌注了人肾（图 4C）和人部分胰腺（图 4E）。灌注后代表性组织切片显示肾小球（图 4D）和朗格汉斯胰岛（图 4F）。

figure-results-3
图 4：灌注机的代表性应用：CT 成像和器官模块化。 （A） 系统的移动适应以进行运输。（B） 体内 碘造影 剂给药后（上图）和灌注后 离体 （下）肝脏肿瘤的代表性 CT 图像。（C） 在重新配置的机器上进行单次流入的人肾灌注。（D） 灌注后组织切片显示肾小球和集合管（苏木精和伊红染色，8x;比例尺 250 μm）。（E） 人远端胰腺在重新配置的机器上进行单次流入灌注。（F） 灌注后组织切片显示胰岛（苏木精和伊红染色，8x;比例尺 250 μm）。 请单击此处查看此图的较大版本。

补充图 1：促进半自动灌注的 Python 代码设置。 描述代码使用的输入和输出参数的示意图，通过添加常用的手动调整实现半自动化（表）。 请点击此处下载此文件。

补充图 2：用于肾脏和胰腺灌注的单流入示意图。 P/F 传感器：压力和流量传感器。 请点击此处下载此文件。

补充图 3：红细胞优化。 （A） 纯血灌注实验表明，与使用无血浆血红蛋白作为细胞裂解替代物的高 RPM 条件相比，低 RPM 条件下的溶血显着减少 （p < 0.01）。（B） 血浆溶血随时间的定性比较直观地表明，与高 RPM 状态相比，低 RPM 状态下的溶血较少。（C-F）评估具有不同阻力水平和与血浆替代物的盆地整合系统中的溶血：（C） 确定并联回路设置与封闭和盆地设置之间的乳酸水平存在显着差异（分别为 p < 0.0001 和 p < 0.0001）。（D） 确定并联电路设置与串联闭路和串联带池设置之间的钾含量存在显着差异（p 分别为 0.0001 < p < 0.0001）。（E） 确定并联电路设置与串联闭路和串联带盆设置之间的血细胞比容水平存在显着差异（分别为 p < 0.0001 和 p < 0.0001）。（F） 确定并联电路设置与串联闭路和串联带水池设置之间的血红蛋白水平存在显着差异（p <分别为 0.0001 < 0.0001）。请点击此处下载此文件。

补充表 1：猪器官优化灌注。 在优化阶段进行了 35 次猪灌注实验，包括 25 次部分肝脏、2 次肾脏和 8 次全肝。包括灌注的持续时间和终止的原因。 请点击此处下载此文件。

补充表 2：人类肝脏验证和应用灌注。 14 例人类部分肝脏灌注，包括正式的左、右肝切除术，跨度单段灌注实验。包括病理学、实验目标、灌注持续时间和终止理由。 请点击此处下载此文件。

补充表 3：仅灌注液优化。 22 次仅灌注液优化运行，包括物质类型、实验目标、实验持续时间和终止原因。 请点击此处下载此文件。

讨论

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

实体器官移植前通常使用的常态灌注机使离体灌注取得了重大进展。虽然在某些情况下，它们与部分器官一起使用在技术上是可行的 7,8,9，但由于成本高且可用性有限，研究科学家仍然无法获得它们。在这项工作中，我们试图通过使用现成的组件和可免费访问的代码来为广泛的研究端点运行系统，从而为更大的研究社区提供一种可比的开源替代方案。

方案中的几个步骤对于实现稳定的器官灌注至关重要。最关键的步骤之一是有效的减压，以防止实质塌陷和正弦扩张。这是通过实施由振荡隔膜支撑的记忆泡沫来实现的，以均匀分布器官重量并保持接近大气的门静脉压力以实现足够的引流。最初使用金属格栅支撑肝脏导致实质塌陷和鼻窦充血，如灌注期间的组织学分析和超声成像所观察到的那样。通过过渡到穿孔硅胶吊床，这部分解决了。虽然大体压力坏死得到解决，但仍有明显的实质塌陷证据，灌注 48 小时后门静脉压力高和标本明显充血证明了这一点。还尝试将肝脏浸入盐水或血液中，并成功缓解充血和门静脉高压症;然而，由于需要大量的灌注液、难以保持无菌以及无法有效地排入储液槽，因此这是不可行的。与浮动技术相比，当肝脏放置在带有振荡隔膜的记忆泡沫垫上以更均匀地分散重量时，我们观察到相同的接近大气压的门静脉压力（图 1B 和 图 3I）。这种设计可产生更柔软、灌注更好的节段，同时仍能轻松、有效地引流血液从标本中流出。

第二个关键步骤是最大限度地减少对红细胞施加剪切应力以防止溶血的电路电阻。这是通过引入带有限制性组件的侧回路来实现的，以促进生理流动，而不会使灌注液承受不必要的压力。溶血是机器灌注过程中不可避免的持续过程。在该系统的早期迭代中，广泛溶血是导致早期终止的重要因素。该系统施加在红细胞上的剪切应力主要来自泵，这是由于灌注液的滞留和再循环，以及管子和膜的窄直径。目前使用的泵会导致一定程度的溶血，这种溶血会随着时间的推移而增加。泵效率是溶血的一个重要因素，因为较高的流量可能是有益的，因为较低的血液循环和二次流速，而较高的灌注液量和/或较低的泵速可以减轻这种情况。由于通常难以获得大量 pRBC，因此我们专注于重新设计系统，以在较低的泵速下提供生理流速，从而在回路中赋予较低的整体阻力31。为了进一步降低电路的内在电阻，我们并联集成了侧电路，随着时间的推移，这导致较低的乳酸和钾水平以及较高的血细胞比容和血红蛋白水平（补充图 3）。最后，当前的血液过滤器被集成到门静脉侧回路中，血液由蠕动泵推动，由于过滤器及其泵施加的显着阻力和剪切应力，蠕动泵会产生大量的溶血。我们目前的优化工作之一是通过研究在储液器中实施血液透析管的可能性来消除这个侧回路。移除临床级血液过滤器将允许随后移除蠕动泵，进一步减少溶血，并降低系统的总成本。

尽管此处描述的系统具有实用性和适应性，但应承认其局限性。值得注意的是，活灌注的持续时间可重复 3-4 天。如上所述，溶血仍然是限制灌注寿命的核心因素。然而，我们发现，如果需要更长的灌注时间，显着增加总灌注液体积可以显着延长灌注的持续时间，但这会增加资源利用率，超出了我们在此处描述的范围。最佳灌注持续时间最终将取决于对系统提出的具体实验问题。例如，调查药物递送动力学或通路抑制的研究可以在 2-12 小时内有效进行，而涉及细胞募集到肿瘤微环境中的问题可能需要 48 小时32 小时。将活力扩展到当前窗口之外对于细胞外基质重塑（即纤维化）等应用可能很重要，但我们相信大多数癌症相关应用不需要额外的资源支出。主要重点是面向肿瘤学的转化应用，旨在将人类肿瘤维持在受控的离体环境中，在该环境中，可以通过完整的实质和肿瘤脉管系统进行治疗，这些条件更接近于体内场景的复杂性25。在这种情况下，该系统解决了当前临床前肿瘤学模型中与药物递送、肿瘤异质性和药物代谢相关的长期问题，这可能解释了临床前成功经常未能转化为临床疗效的原因33,34。

与现有的商用机器相比，该系统具有显著的成本优势、模块化可扩展性和实验灵活性。商业设备通常是专有的、昂贵的，并且针对移植环境中的全器官灌注进行了优化。该系统的可扩展性是商用机器所不具备的，因此我们可以广泛地设想它的适用性。此处介绍的系统不是最终产品，而是一个蓝图，可以对其进行修改、调整和重新调整用途，以适应各种研究兴趣和实验问题，填补了许多学科科学家的空白。

该平台的未来方向包括缩小到亚段肝脏段和灌注液体积，以能够使用自体血液制品来支持免疫肿瘤学应用。我们还致力于整合多组学平台和实时成像，以提供治疗反应的动态监测，为详细的药理学研究铺平道路。我们希望该系统能够鼓励协作和创新，以努力在转化科学的多个领域打造新的知识深度。

披露

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

作者报告说，这项研究及其发现没有利益冲突。本出版物中报告的研究得到了美国国立卫生研究院校内研究计划的支持。标本成像和初步放射组学的资金来源，由员工临床医生研究奖提案 ID 231145 Elliot Levy 支持。

致谢

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

作者要感谢并支持以下团体支持该项目：NIH 输血医学系、NIH 围手术期医学系、NIH 病理学系、Wagner's Meats。

材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
1/4“ 内径 x 3/8” 外径 x 1/16“ 墙 Versilon C-219-A 软质 PVC 管材美国塑料公司57682
10 cc 注射器，带 BD Luer-Lock 吸头屋宇 署302995
1cc 注射器，带 BD 鲁尔锁吸头屋宇 署309628
25 Fr 门户插管XVIVO的11.01.520
3D 打印流量传感器支架不适用不适用请参阅 GitHub for SDL files
3D 打印磁铁支架不适用不适用请参阅 GitHub for SDL files
48 英寸。高 x 24 英寸W 白色钉板家得宝109099
4 通旋塞阀，黄色，2 个内螺纹鲁尔锁，带旋转锁的外螺纹鲁尔世界精密仪器14057-10
50 cc 注射器，带 BD Luer-Lock 吸头屋宇 署309653
ACF00023 泰贡 S3 by 圣戈班 |5/16“ 内径 x 1/2” 外径 x 3/32“ 墙 |E-3603 非 DEHP |不含邻苯二甲酸盐的实验室管 |50' 包装长度软管仓库ACF00023
两性霉素兽医药房不适用https://mms.mckesson.com/product/505635/Xgen-Pharmaceuticals-39822105505
倒钩接头，Y 型连接器，3/8“ 管内径，PP，5/PK大众MFLX06368-24材料类型不重要
CDI 540 校准器Terumo540厘升
CDI 电缆头支架TerumoCDI519CL
CDI监控器Terumo500AVHCTCL型
CDI 极夹TerumoCDI517CL
Clave IV 无针管接头 100/Ca亨利·沙因牙科1097422
含电解质的 Clinimix巴克斯特2B7721只用氨基酸面，不要与葡萄糖面混用
CO2USP 等级 50 磅罗伯特的氧气R25
用于 GUI  的计算机显示器;不适用不适用用于查看 GUI 的任何类型的屏幕
数据采集设备测量计算USB-202 接口需要 2 或 3 个，具体取决于机器的连接方式
泵台式电源李维特尼克斯100-40015需要2个，一个用于HA，一个用于光伏
Eagle 1662 滚筒漏斗，带黄铜筛网，直径 18 英寸 x 高 7 英寸，黄色全球工业WB440139
依前列醇兽医药房不适用https://mms.mckesson.com/product/1239813/Sun-Pharmaceuticals-62756005940
雌鲁尔¼“倒钩在天然尼龙洁净室中制造;10包大众MFLX40314-26材料类型不重要
接头，聚丙烯，直型，内螺纹鲁尔到软管倒钩适配器，1/8“ 内径;25/PK大众MFLX30800-08材料类型不重要
接头，聚丙烯，直，外螺纹鲁尔锁到软管倒钩适配器，1/8“ 内径;25/PK大众MFLX30800-18材料类型不重要
接头，PVDF，直型，软管倒钩异径管，5/16“ 内径 x ¼“ ID;10/PK大众MFLX40614-62材料类型不重要
流动支架 不适用不适用请参阅 GitHub for SDL files
流量传感器夹具基恩士FD-XC20R1
流量传感器控制器基恩士FD-XA1型
流量传感器头基恩士FD-XS20型
流量传感器电源基恩士MS2-H50型
气体混合器 多选题GB100+2需要2个，一个用于HA，一个用于光伏
气瓶 A，CDI 500Terumo中极型506
气瓶 B，CDI 500Terumo光碟机507
胰高血糖素试剂盒，胰高血糖素 1 mg，无菌水 1 mL，小瓶费森尤斯0593-03
H/S 比色皿 1/4x1/4 W/6“ EXT 1CA=10EA 70-2006-4298-4Terumo6934
硬壳储液罐，150 &M 过滤器血液学公司00205-00
加热冷垫，Mul-T-Pad，TP12E 垫尺寸 13“ x 18”，适用于 Gaymar TP700 泵多字垫8002-062-012https://www.amazon.com/Heat-Cold-Mul-T-Pad-Gaymar-TP700/dp/B00HFF7876。的 请注意，Stryker 还提供与“Mul-T-Pad C2Dx 8002-062-012”类似的加热水套
胰岛素兽医药房https://mms.mckesson.com/product/294668/Novo-Nordisk-Pharmaceutical-00169183311
Ismatec 型 Ecoline 泵 VC-280 II伊斯马泰克ISM1078B-115
LTV 1200 儿科呼吸机护理融合https://coastbiomed.com/product/carefusion-ltv-1200-ventilator/?srsltid=AfmBOopSCKwTLmKhZXcI
CgGQHfiKwj__78jNWxVaznJCS
aq3RjXw2E-H.
该型号的儿科呼吸机是从医院剩余的中重新利用的，没有购买。任何商用间歇泵或曝气机都是合适的替代品。
主泵电缆李维特尼克斯190-10331需要2个，一个用于HA，一个用于光伏
MaPerSol 器官保存液，1 升袋保鲜解决方案PS005型
Masterflex 适配器接头，鲁尔对鲁尔，三通，Avantor 大众MFLX45508-56材料类型不重要
Masterflex 内螺纹鲁尔 3/16“ 内径倒钩，天然 PVDF 洁净室制造大众MFLX40314-22材料类型不重要
Masterflex Ismatec Reglo 数字泵，带 MasterflexLive，4 通道，8 辊;115/230伏交流电万世高振MFLX78018-22https://www.avantorsciences.com/us/en/product/NA5139147/masterflex-ismatec-reglo-digital-multichannel-pumps-avantor
Masterflex 外螺纹鲁尔 1/4“ 内径倒钩，天然 PVDF 洁净室制造，10 个/包大众MFLX40318-27材料类型不重要
Masterflex 外螺纹鲁尔 3/16“ 内径倒钩，天然 PVDF 洁净室制造大众MFLX40318-22材料类型不重要
Medline 胎盘盆标准托盘医疗线DYNJSPLACENTA
美敦力 DLP 2 英寸血管插管，3 毫米斜头缝合线MDT30007
记忆海绵 最优惠的价格床垫https://www.amazon.com/Best-Price-Mattress-Twin-Topper/dp/B07999TQWB/ref=sr_1_2_sspa?crid=17LQXX80WX5FK&dib=eyJ2Ijo
iMSJ9.oRyEE5KwmKy1pb-VvY9MOJg
_MF3wr0PmXqKcOrSEbeJWS2X
5BkFs_WSfuE1OU8GS0u_T1qM
IJbsoy3omRv1wfBCy2sw2fOUIX
JMqAO6BSb7t_D3j745MoXjedLbo
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=d2lkZ2V0TmFtZT1zcF9hdGY&th=1
带直无螺纹孔的钕磁铁麦克马斯特·卡尔336K834
氮气，125 CU FTGrade 4.5 高纯度罗伯特的氧气R32
氧气，255 CU FTGrade 4.5 高纯度罗伯特的氧气R5
PDMSXA-2500：PermSelect 2500 厘米平方薄膜模块 -- 带倒钩配件，不带 MCC烫选PDMSXA-2500型可以进行鲁尔或倒刺接头，但连接会发生变化
盐酸去氧肾上腺素注射液，USP 10mg/mL 1mL 小瓶健康第一1000520
用于 ORS 流体加温系统的聚氨酯加温窗帘，无菌，44 英寸 x 66 英寸医疗线ORS-300H
猪猪血兰皮尔7204911
压力传感器监视器PendoTECH公司PMAT2HR
PRISMAFLEX M60 套装百特医疗公司106696
PrismaSol BGK0/2.5 用于连续肾脏替代治疗的替代溶液，非 PVC巴克斯特110240S
泵安装底板李维特尼克斯190-10313需要2个，一个用于HA，一个用于光伏
泵 USB 适配器李维特尼克斯100-30391需要2个，一个用于HA，一个用于光伏
PuraLev 驱动系统李维特尼克斯100-91025需要2个，一个用于HA，一个用于光伏
PuraLev IP 适配器电缆 李维特尼克斯190-10475需要2个，一个用于HA，一个用于光伏
分流传感器 SYS500 - CA = 20EA 98-0702-1541-7TerumoCDI510H可以从缝合线中购买过期的 - 工作原理相同，有时有一点 pH 漂移
一次性压力传感器，非无菌，聚砜 1/4 英寸软管倒钩PendoTECH公司预备-N-025
一次性压力传感器PendoTECH公司预备-N-025可重复使用灭菌，但每次使用前都要测试传感器
碳酸氢钠 8.4% 溶液实验室级实验室巷144-55-8
牛磺胆酸钠水合物米利波尔西格玛86339-25克
索美曲兽医药房不适用https://mms.mckesson.com/product/1212228/Dr-Reddys-Laboratories-43598013074
史赛克加热垫 亚马逊河B01M74Y8DI
SU 泵头，PP，倒钩 3/8“，伽马 >25kGy，DCP-30.2-G25，PuraLev 李维特尼克斯100-91071灭菌后可重复使用 
注射泵（11 Elite泵）Harvard Apparatus70-4504每种输注药物需要一个
注射器管GSS系统ME2020
热水器和循环器格兰特科学TC120型
佐辛兽医药房不适用https://mms.mckesson.com/product/1009456/Auromedics-Pharmaceuticals-55150011930

参考文献

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
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