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研究文章

308 nm准分子激光联合苦参碱通过调节血清免疫球蛋白和炎性细胞因子治疗白癜风的疗效研究

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DOI:

10.3791/70371

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2026年3月10日

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本文内容

摘要

308 nm 准分子激光联合口服苦参碱通过促进黑素细胞再生并恢复免疫平衡,显著增强了白癜风患者的复色效果。这种双模式治疗可降低促炎性细胞因子水平,使免疫球蛋白恢复正常,提升白细胞介素-10(IL-10)水平,并在具有良好安全性和患者耐受性的同时,实现了更优的临床疗效。

摘要

白癜风是一种慢性自身免疫性色素脱失性疾病,其特征为功能性黑素细胞的丧失以及免疫系统的异常激活。尽管光疗技术已取得进展,但临床疗效仍不一致,主要归因于持续存在的炎症活动和免疫调节不足。本研究探讨了308 nm准分子激光光疗联合口服苦参碱(一种具有抗炎和免疫调节特性的天然生物碱)的治疗效果及其免疫学机制。共纳入232例非节段型白癜风患者,前瞻性地分为单用准分子激光治疗组或联合治疗组,疗程为12周。采用白癜风面积评分指数(VASI)评估临床改善情况,并检测血清免疫球蛋白和细胞因子水平以评估系统性免疫调节作用。两种治疗方案均显著促进色素恢复,但联合治疗组的VASI评分降低更为明显(从基线时的9.72 ± 3.24降至治疗后的5.76 ± 2.18),优于单用准分子激光组(从9.68 ± 3.37降至6.63 ± 2.34,p < 0.001)。联合治疗组中达到良好或极佳色素恢复的患者比例(76.7%)显著高于单药治疗组(58.7%)。同时,血清IgG水平显著下降(从13.72 ± 2.64 g/L降至11.85 ± 2.18 g/L,p < 0.001),而IgA水平则轻度升高(从2.07 ± 0.68 g/L升至2.23 ± 0.61 g/L,p = 0.041)。促炎性细胞因子IFN-γ和IL-17水平均显著降低(两者均p < 0.001),而抗炎性细胞因子IL-10则从8.3 ± 3.2 pg/mL上升至12.9 ± 3.5 pg/mL(p < 0.001)。VASI评分的改善与IFN-γ(r = –0.482,p < 0.05)和IL-17(r = –0.451,p < 0.001)的下降呈负相关,与IL-10的升高呈正相关(r = 0.503,p < 0.001)。这些结果表明,苦参碱可通过促进黑素细胞再生并恢复免疫平衡,增强准分子激光的疗效,从而建立一种基于生物标志物的双模态策略,实现对白癜风的精准且持久的管理。

引言

白癜风是一种慢性的获得性色素脱失性皮肤病,其特征是表皮黑素细胞的选择性破坏或功能障碍,导致出现边界清晰、大小和分布各异的白色斑片。该病影响全球约0.5%–2%的人口,无性别或种族倾向,常在30岁前发病1,2。尽管该病并不危及生命,但会给患者带来显著的心理社会和情感负担,严重损害自尊心、社会功能和生活质量3。白癜风的发病机制是多因素的,尚未完全阐明,涉及遗传易感性、氧化应激、自身免疫反应以及神经体液因子等多种因素4。近年来的研究尤其强调了免疫失调在黑素细胞破坏的启动和持续过程中所起的关键作用5,6。在表皮中,自身反应性CD8⁺细胞毒性T淋巴细胞识别黑素细胞抗原(如酪氨酸酶和gp100),释放穿孔素和颗粒酶B,诱导黑素细胞凋亡7。同时,促炎性细胞因子(包括干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6和IL-17)放大炎症级联反应,损害黑素细胞存活,并抑制色素细胞的迁移8。调节性T细胞(Tregs)与效应T细胞之间的失衡进一步导致持续的免疫活化和黑素细胞丢失9。因此,旨在促进黑素细胞再生并重建免疫稳态的治疗策略具有重要的临床意义。

除了局部免疫异常外,越来越多的证据表明白癜风是一种系统性自身免疫性疾病。患者血清中免疫球蛋白(IgG、IgA 和 IgM)水平发生改变,反映了全身性的 B 细胞活化及体液免疫异常10,11。免疫球蛋白生成失调可能促进针对黑素细胞特异性抗原的自身抗体形成,从而加剧组织损伤。此外,白癜风患者的细胞因子环境常表现为 IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-17 和 IL-23 水平升高,提示免疫活化不仅局限于皮损皮肤,而是涉及全身12,13。这些免疫介质不仅是致病驱动因素,还与疾病活动度及治疗反应相关,因而有望作为治疗监测的潜在生物标志物14。因此,能够通过调节细胞免疫和体液免疫反应来恢复免疫平衡的干预措施,可能带来更优且持久的临床疗效。尽管目前已有外用糖皮质激素、钙调磷酸酶抑制剂、系统性免疫抑制剂以及光疗等治疗手段,但许多患者(尤其是皮损广泛或难治性患者)的治疗效果仍不理想15。因此,近年来针对多种病理生理机制的联合治疗策略逐渐受到重视。

光疗长期以来一直是白癜风治疗的基石。在各种治疗方式中,308 nm 准分子激光(EL)已成为局限性白癜风最精准且最有效的治疗选择之一16,17。该疗法将波长为 308 nm 的单色中波紫外线(UVB)直接作用于脱色皮损区域,从而刺激黑素细胞从毛囊增殖和迁移,同时最大限度减少对周围健康组织的照射18。与传统的窄谱中波紫外线(UVB)相比,准分子激光具有复色起效快、累积照射时间短以及安全性更优等优势19,20。从作用机制上看,低剂量 308 nm 照射可通过降低表皮朗格汉斯细胞活性、增加调节性 T 细胞(Treg)浸润,并通过上调酪氨酸酶和小眼畸形相关转录因子(MITF)促进黑素生成,从而实现局部免疫调节21。然而,患者的治疗反应仍存在较大差异,许多患者无法实现完全复色。过量或长期照射反而可能诱发炎症性细胞因子(如 IL-1β、IL-6 和 TNF-α)的释放,进一步导致黑素细胞损伤22,23。因此,尽管准分子激光治疗能有效促进黑素细胞再生,但其疗效可能受到伴随发生的炎症激活的限制。这种双重效应凸显了在光疗过程中联合使用能够减轻炎症反应并增强免疫耐受的辅助治疗策略的必要性。

苦参碱是一种从Sophora flavescens(苦参)中提取的天然喹诺里西啶类生物碱,近年来因其低毒性以及免疫调节和抗炎作用而受到广泛关注24,25。实验研究表明,苦参碱可抑制NF-κB和JAK/STAT信号通路,下调促炎性细胞因子(包括IFN-γ、TNF-α和IL-6)的产生,并促进抗炎介质如IL-10的表达26。在免疫相关性疾病中,苦参碱已被证实能够调节Th1/Th17细胞分化,增强调节性T细胞功能,并使免疫球蛋白谱趋于正常27,28。此外,苦参碱还具有抗氧化和抗凋亡作用,可能保护黑素细胞免受氧化应激所致损伤29。尽管这些特性使苦参碱成为治疗自身免疫性皮肤病的理想候选药物,但目前针对其在白癜风中作用的研究仍较少。将苦参碱与光疗联合应用是一种新颖的治疗策略:苦参碱可能减轻炎症微环境,维持黑素细胞稳态,并增强激光诱导的黑素生成。此外,苦参碱的系统性免疫调节作用可能与准分子激光的局部效应相辅相成,从而产生协同的临床获益。据我们所知,尚无既往临床研究全面探讨308 nm准分子激光与苦参碱联合治疗白癜风的效果,也未通过血清生物标志物谱分析评估其免疫学相关机制。

基于这一理论依据,我们提出假设:308 nm 准分子激光联合苦参碱治疗在促进黑素细胞再生的同时抑制异常免疫活化,其疗效将优于单独使用准分子激光治疗。具体而言,我们推测辅助应用苦参碱可提高临床复色率,调节血清免疫球蛋白水平(IgG、IgA 和 IgM)趋于生理平衡,并降低 IFN-γ、TNF-α 和 IL-17 等促炎性细胞因子水平,同时升高抗炎性细胞因子水平。在本研究中,我们系统评估了接受该联合治疗的白癜风患者临床疗效、免疫学参数及其相互关联。本研究的创新之处在于其双重作用机制的聚焦——局部光生物学刺激与全身性免疫调节,并整合了定量生物标志物分析以阐明治疗机制。通过明确苦参碱联合靶向光疗的免疫调节作用,本研究旨在为白癜风治疗提供一种循证医学基础的新治疗范式。最终,这些发现可能推动该领域发展出更加精准、以免疫为导向的光疗策略,不仅实现皮肤复色,还能达到长期疾病稳定和预防复发的目标。

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方案

本研究遵循《赫尔辛基宣言》的伦理原则以及人类研究相关的机构规定。本研究遵循《赫尔辛基宣言》的伦理原则,并经邢台市人民医院皮肤科伦理委员会批准(批准文号:2021[029])。所有参与者在参加研究前均签署了书面知情同意书。

患者选择
在2021年1月至2023年12月为期3年的期间内,共纳入232名临床诊断为白癜风的患者。所有参与者均被诊断为非节段型白癜风(泛发性或局限性),并根据入组前3个月内是否有新发皮损分为稳定期或进展期。在基线时记录疾病持续时间和皮损分布情况。入组标准包括经皮肤科医生通过临床检查、伍德灯照射和皮肤镜检查确诊为稳定期或进展期白癜风、年龄在18至65岁之间的个体。排除标准包括妊娠、哺乳期、光过敏性疾病、系统性自身免疫性疾病、严重肝肾功能不全,以及在过去3个月内使用过全身性皮质类固醇、免疫抑制剂或光疗的患者。所有操作均在持续的伦理监督下进行,确保治疗过程中患者的舒适与安全。

研究概述与治疗流程
本研究的整体流程,包括患者入组、分组、随访评估及生物标志物分析,如图1所示。符合条件的受试者以1:1的比例随机分配至两个平行研究组之一:308 nm准分子激光单药治疗组(仅使用准分子激光;n = 116)和联合治疗组(308 nm准分子激光联合口服苦参碱;n = 116)。分组由未参与结局评估的独立研究人员使用计算机生成的随机序列完成;分组结果密封于按序编号的信封中,在患者入组后拆封以确定治疗分配。治疗流程包括三个主要阶段:(1)基线评估与记录,(2)根据分配方案进行为期12周的积极治疗,(3)治疗后评估,包括血清免疫球蛋白和炎症细胞因子的实验室检测。每位患者均接受标准化的治疗方案、相同的随访间隔以及统一的实验室分析程序。临床照片拍摄和VASI评分由对治疗分组不知情的皮肤科医生完成。所有操作均在中国邢台市人民医院皮肤科光疗室的受控环境条件下进行(室温22–24 °C,相对湿度40%–60%)。

治疗区域的准备
每次激光治疗前,使用无菌生理盐水轻柔清洁目标脱色区域,并用无绒医用纱布轻轻拍干。检查皮损皮肤,确认无感染、糜烂或结痂。若单次就诊需治疗多个皮损,则依次对每个皮损进行准备和治疗。对于超出单个照射区域的皮损,将其划分为相邻的多个照射区域,每个区域均使用不透光的紫外线阻断片遮盖周围正常皮肤,以尽量减少不必要的暴露。要求患者在治疗前24小时内避免使用外用制剂、光敏性化妆品或香水。在整个操作过程中,患者和操作人员均需佩戴防护眼镜。

308 nm 准分子激光照射操作流程
采用单色 308 nm 氙氯(XeCl)准分子激光系统。所有激光治疗均由两名经过培训的皮肤科医生按照标准化方案进行,以确保能量输出、照射距离和可重复性的一致性。每次治疗前,均使用经校准的紫外功率计验证设备输出,所有系统每周由认证技术人员校准一次,以保持误差范围低于 ±5%。首次照射前,通过在患者前臂内侧小面积测试区域施加递增剂量(100–400 mJ/cm2),并在 24 小时后评估红斑反应,确定每位患者的最小红斑剂量(MED);结果拍照并记录于患者病历中。补充表 1 提供了典型的 MED 记录及逐次剂量调整图表。MED 定义为在 24 小时时产生清晰可辨、均匀红斑的最低测试剂量。初始治疗剂量设定为个体 MED 的 80%–90%,后续剂量调整依据前次治疗后 24 小时的红斑反应,遵循预设算法(无红斑或轻度红斑时增加 10%–20%,中度红斑时维持原剂量,出现水疱或明显疼痛时减少 10%–20%)。初始治疗剂量设定为 150–250 mJ/cm2(约相当于个体 MED 的 80%–90%)。每次治疗开始时,患者舒适地坐在可调节高度的椅子上。激光手柄垂直(90°)于皮肤表面,距离为 10–15 cm,调整圆形或矩形照射区域,完全覆盖白斑区域,尽量减少重叠。每个照射区域的照射时间持续 1–3 秒,具体取决于能量密度。根据前次红斑反应,每次治疗后剂量递增 10%–20%;若出现中度红斑,则维持前次剂量;若出现水疱或疼痛,则减少 10%–20%。最大剂量不超过 2,000 mJ/cm2。每次治疗覆盖所有可见皮损,持续时间约为 10–20 分钟,视皮损范围而定。治疗每周进行 2 次,两次治疗之间至少间隔 72 小时,总疗程为 12 周(共 24 次)。照射后,局部涂抹一层无菌芦荟凝胶以缓解红斑。指导患者在治疗期间避免日晒 48 小时,并全程使用广谱防晒霜(SPF >30)。对于复色程度超过 >50% 的皮损,在相同参数下继续治疗,直至色素稳定。

口服苦参碱给药
在联合治疗组中,根据《中华人民共和国药典》(2020年版)30 制备了苦参(Sophora flavescens)根部的无菌水提物,并通过高效液相色谱法(HPLC)验证其纯度≥98%,标准化浓度为5 mg/mL。溶液置于棕色玻璃瓶中,4 °C保存以防止光降解。随机批次检测确认生物碱浓度为(5 ± 0.3)mg/mL,并符合微生物无菌要求。每位患者每日两次口服0.3 g(60 mL)的苦参碱溶液,持续12周,与激光治疗时间表同步进行。给药剂量的选择基于既往药理学数据,这些数据显示该剂量在慢性炎症性皮肤病中具有有效的免疫调节作用且安全性良好31,32。指导患者在餐后30分钟服用该溶液,以减少胃肠道不适;治疗期间应避免饮酒、浓茶及辛辣食物,以减轻肝脏负担。若出现轻度恶心或疲劳,可通过饮用少量温水缓解。每次随访时通过服药日记记录及药瓶回收情况评估治疗依从性。每次访视时通过结构化症状询问和不良事件记录评估安全性,包括胃肠道不适、疲劳以及任何提示肝功能不耐受的症状。观察期间禁止使用其他全身性药物、外用糖皮质激素或免疫抑制剂,以避免混杂效应。

临床疗效评估
由两名对治疗信息设盲的经验丰富的皮肤科医生在基线以及第4、8和12周评估色素变化。在相同的照明条件和相机设置下(距离60 cm,曝光时间1/60 s,ISO 200)拍摄标准化的数码照片。采用白癜风面积评分指数(Vitiligo Area Scoring Index, VASI)对复色程度进行量化。皮损 дополнительно分为四类:优(≥75%复色)、良(50%–74%)、中等(25%–49%)、差(<25%)。患者还需完成一个10分制的视觉模拟评分(VAS),用于评估满意度和症状缓解情况。每次随访时均记录不良事件,如红斑、灼热感、瘙痒、水疱和色素沉着过度。

血清样本采集
用于生物标志物分析时,采用血清分离管在基线及第12周结束时,从每位患者采集空腹外周血(5 mL)。样本在室温下静置凝固30分钟,随后在4 °C条件下以800 × g离心10分钟。将上清液血清分装至0.5 mL冻存管中,保存于−80 °C直至分析。所有样本均在采集后2小时内完成处理,以尽量减少细胞因子降解。

血清免疫球蛋白的定量
根据制造商说明书,采用自动免疫散射比浊法测定血清IgG、IgA和IgM浓度。使用参考标准品的系列稀释液绘制校准曲线。每次检测均包含高浓度和低浓度的质量控制血清。检测结果以g/L表示,并重复测定两次,以确保批内变异度<5%。每日使用可溯源的质控标准品验证仪器的精密度和校准状态。结果以电子方式记录,并由两名对患者信息设盲的独立技术人员进行审核。

炎症细胞因子的检测
细胞因子谱分析包括 IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17 和 IL-10,采用多重酶联免疫吸附测定(ELISA)平台进行定量。试剂配制按照制造商的标准操作流程进行。简言之,将 100 µL 稀释后的血清加入各抗体包被的孔中,在 37 °C 下孵育 2 小时。用含 0.05% Tween-20 的磷酸盐缓冲液(PBST)洗涤后,每孔加入 100 µL 生物素标记的检测抗体,孵育 1 小时。随后,孔中加入链霉亲和素-辣根过氧化物酶,孵育 30 分钟,再于避光条件下加入四甲基联苯胺(TMB)底物显色 10 分钟。反应通过加入 50 µL 2 mol/L 硫酸终止,并使用酶标仪在 450 nm 波长处测定吸光度。标准曲线由重组细胞因子的系列稀释液绘制,细胞因子浓度以 pg/mL 表示。所有样本均设复孔检测。为确保实验可重复性,批间变异系数(CV)控制在 10% 以下。空白孔仅含不含血清的检测缓冲液,阴性对照孔则使用无细胞因子的基质样本,处理方式与待测样本相同,相当于 0 pg/mL 标准品,用于确认检测的特异性。任何溶血或脂血样本均从最终分析中剔除。

统计分析
数据录入专用电子数据库,并由两名独立的数据管理员交叉核对准确性。样本量根据预期效应量(Cohen’s d = 0.5)、α = 0.05 和检验效能(1–β)= 0.8 进行估算,得出每组至少需要 100 名受试者。为控制细胞因子多重比较带来的假阳性风险,在适当时采用 Bonferroni 校正。在必要时采用多变量线性回归模型对潜在混杂因素(包括年龄、性别、病程和基线皮损面积)进行调整。连续变量的正态分布通过 Shapiro–Wilk 检验进行验证。描述性统计结果中,正态分布数据以均值 ± 标准差(SD)表示,偏态分布数据以中位数(四分位距,IQR)表示。治疗前后的变化采用配对 t 检验进行分析,组间比较则根据情况采用独立样本 t 检验或 Mann–Whitney U 检验。分类变量采用卡方检验或 Fisher 精确检验进行比较。细胞因子水平、免疫球蛋白与色素改善之间的相关性采用 Pearson 相关系数进行评估。所有统计分析均使用 SPSS v26.0(RRID: SCR_002865)完成,以双侧 p < 0.05 为差异具有统计学意义的标准。

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结果

基线临床特征显示两组之间的基线人口学和疾病特征具有可比性
共纳入232例非节段型白癜风患者,并将其均匀分配至准分子激光组(n = 116)或联合治疗组(激光联合口服苦参碱,n = 116)。基线人口学和临床参数,包括年龄(35.8 ± 6.0 vs. 35.4 ± 5.6 岁)、性别分布(男性/女性:59/57 vs. 59/57)、病程(4.8 ± 1.0 vs. 4.7 ± 0.8 年)、皮损类型(泛发型 vs. 局限型)以及基线VASI评分(9.72 ± 3.24 vs. 9.68 ± 3.37),差异均无统计学意义(所有 p > 0.05)。两组在疾病分期及既往光疗暴露方面亦无组间差异。这些结果表明,两组患者在基线时具有可比性,适合进行后续的疗效分析(表1)。

联合治疗在临床复色效果和VASI评分降低速度方面均优于308 nm准分子激光治疗组
在为期12周的治疗期...

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讨论

本研究介绍了一种联合治疗方案,将308 nm准分子激光与口服苦参碱相结合,用于治疗非节段型白癜风。其核心观点是,双重调节——即黑色素细胞的局部光生物学刺激与全身性免疫调节相结合——相较于单独使用准分子激光治疗,能够实现更显著且持久的复色效果。研究结果支持该假设:联合疗法相较于单独使用准分子激光,能够更早出现毛囊周围色素再生,显著降低白癜风面积评分指数(VASI),并获得更高的患者满意度。这些临床改善伴随着血清免疫标志物的广泛正常化,包括促炎性细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-17)水平下降,抗炎性细胞因子IL-10水平升高,以及免疫球蛋白平衡的恢复,表现为IgG降低和IgA轻度升高33,34,35。综上所述,这些结果表明,苦参碱通过重建全身免疫稳态并保护黑色素细胞免受炎症损伤,从而增强了准分子光疗的临床疗效。

白癜风正日益被视为一种系统性自身免疫性疾病,而不仅仅是一种单...

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披露

不存在需要披露的经济利益冲突。

致谢

作者谨向皮肤病学系全体团队致以诚挚感谢,感谢他们在整个项目过程中所付出的辛勤努力。

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
308-nm XeCl 准分子激光系统STRATA Skin Sciences (XTRAC)Velocity 400 (型号)针对白癜风皮损的靶向 308-nm UVB 激光;请在本地核实型号;或使用等效设备
–80 °C 超低温冰箱Thermo ScientificForma 900 系列 (型号 980)血清长期储存
96 孔 ELISA 板(高结合)Corning Costar9018若使用自备包被或单重检测流程
可调节医用椅Midmark641 治疗椅用于患者体位固定,确保一致的照射距离
芦荟基舒缓凝胶3M9236照射后薄层涂抹以缓解红斑;或等效医用凝胶
琥珀色玻璃瓶(500 mL)Fisherbrand02-897-2J避光保存苦参碱溶液,4 °C 储存
分析天平(0.1 mg)METTLER TOLEDOME104E重量法配制与质量控制
全自动免疫比浊仪Siemens HealthineersBN ProSpec 系统根据制造商’s IFU 定量 IgG/IgA/IgM
条形码标签(耐低温)Diversified BiotechCRY-1000样本追踪与链式记录
生物素化检测抗体套装MSD随试剂盒提供与捕获抗体匹配
广谱防晒霜 SPF ≥30Neutrogena070501017052 (Ultra Sheer SPF 50)治疗后光防护;门诊患者教育用品
免疫球蛋白校准品Siemens HealthineersN Protein Standard SL可溯源的比浊法校准
免疫球蛋白检测用质控血清(高/低值)Siemens HealthineersN/T Protein Controls每日比浊检测运行的质量控制
冻存管,0.5 mLThermo Scientific Nunc375418血清分装;外螺纹;无 DNase/RNase
皮肤镜DermLiteDL4手持式偏振皮肤镜,用于皮损检查
皮肤镜/摄影标尺卡3Gen标尺/颜色参考卡确保不同时间点间颜色一致性
用于标准化成像的数码相机CanonEOS 80D固定距离 60 cm;曝光时间 1/60 s;ISO 200;建议使用三脚架
定角冷冻离心机Eppendorf5810 R800 × g,10 分钟,4 °C 分离血清
HPLC 色谱柱(C18,4.6×250 mm,5 µm)AgilentZORBAX Eclipse Plus C18,959990-902常规生物碱分离;或等效色谱柱
HPLC 系统Agilent1260 Infinity II (G7111B)苦参碱纯度验证与批次标准化
图像分析/测量ImageJ (NIH)1.54 (RRID:SCR_003070)可选,用于从照片中定量皮损面积
无绒医用纱布(无菌)Johnson & Johnson546112清洁后干燥治疗区域
苦参碱(≥98%,HPLC)MedChemExpressHY-N0156口服溶液配制;请确认本地供应商及药典合规性
酶标仪(450 nm)BioTek (Agilent)Synergy H1450 nm 吸光度检测;光程校正
酶标洗板机BioTek (Agilent)ELx405自动化洗涤程序;减少变异
多重人细胞因子检测试剂盒(定制 6 重)Meso Scale Discovery (MSD)U-PLEX 平台 (K15067L)包含 IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17A、IL-10;或等效试剂盒
PBS 片剂Gibco18912-014用于洗涤液/缓冲液配制
板密封膜Bio-RadMSB1001防止孵育过程中蒸发
防护性紫外护目镜(操作者用)Uvex (Honeywell)S0360X Ultra-Spec 2000操作者眼部防护;使用专用护目镜
防护性紫外护目镜(患者用)Uvex (Honeywell)S0360X Ultra-Spec 2000照射期间保护患者眼睛,阻挡紫外线
血清分离管(SST II Advance)BD Vacutainer367955基线及第 12 周空腹采血
统计分析软件IBMSPSS Statistics v26.0 (RRID:SCR_002865)按方案进行主要数据分析
无菌生理盐水(0.9%)Baxter2B1324 (500 mL)每次激光治疗前清洁皮损
终止液(2 M H2SO4)Sigma-Aldrich258105终止 TMB 反应
链霉亲和素-HRPThermo ScientificN100检测试剂;与试剂盒兼容
TMB 底物(ELISA)Thermo Scientific34028显色反应;避光孵育 10 分钟
带距离标记的三脚架ManfrottoMKCOMPACTLT-BK保持相机与受试者之间距离恒定
Tween-20(用于 0.05% PBST)Sigma-AldrichP1379洗涤缓冲液用表面活性剂
紫外辐射计/功率计International Light TechnologiesILT2400用于每日输出验证及 MED 测试;配备 SED240/NS254 探测器或等效设备
防紫外线不透明遮布/罩单ThorlabsBK5 黑色遮光布覆盖周围正常皮肤,避免非目标区域暴露;或等效产品
VASI 评分表(打印版)自备NA-VASI-2025标准化临床评分表格;与受试者编号一同归档
伍德’s 灯(UV-A,365 nm)SpectrolineENF-260C临床诊断及皮损边缘评估
伍德’s 灯遮光罩DermLiteDL Hood提升 UV-A 检查下的对比度

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