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テールクリップからのDNA抽出

 
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テールクリップからのDNA抽出:ゼブラフィッシュジェノタイピングに用いられる方法

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- 水性積み重ね麻酔をかけた成体くことで手順開始します。今、無菌カミソリブレード使用してひれを切断し、回復のために新鮮な含むタンク素早くします。シスバッファー含むきれいなチューブテールクリップ移す;溶解バッファーには、細胞原形質膜可溶化する非イオン性洗剤含まれています。消化。

今、連続的な回転摂氏55組織完全に分解するために、一晩インキュベーターにテールクリップ付きのチューブ残します。 次に、チューブ摂氏9515分間加熱プロテイナーゼK.遠心分離酵素を消化してペレット未消化に移し、DNA含む上清チューブします

- DNA調製、1ミリリットル当たり1ミリグラム濃度リシスバッファー新鮮なプロテイナーゼKえる。

まず、トリカイン溶液中の麻酔します。ギル動き遅くなるまで待って組織スタック置き滅菌カミソリの刃長さ約2〜3ミリメートルひれの小片切り落します。

無菌ピペットチップフィンクリップ、100マイクロリットルDNAリシスバッファーで満たされたチューブしてください。動物のタンクチューブの両方にラベルをてください

インキュベーション、チューブ摂氏9515分間加熱してプロテナーゼK不活性化する。

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