从含有预冷人肝癌细胞单层的多孔板开始。
用携带荧光素酶基因的转基因丙型肝炎病毒和目标化合物的混合物处理测试孔;单独用病毒处理对照孔。
在测试孔中,靶分子与病毒糖蛋白和细胞表面受体相互作用,防止病毒附着。
然而,在对照孔中,病毒糖蛋白与细胞表面受体相互作用,使其能够附着。低温抑制病毒进入。
去除上清液,引入培养基,并在最佳温度下重新孵育,以促进病毒进入。
进入后,病毒释放遗传物质,开始合成病毒蛋白和荧光素酶,这些蛋白和荧光素酶被分泌到培养基中。
转移含荧光素酶的上清液,并引入底物。
酶-底物相互作用产生与荧光素酶水平成比例的光。
与对照孔相比,测试孔中的光强度较低,表明目标化合物的抗病毒特性。
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用于筛选抗病毒化合物的病毒附着测定
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