Denne video beskriver en mikroinjection metode til brystkræft celle levering i perivitelline rummet af transgene zebrafisk embryoner. Efter inkubation visualiserer vi embryoet under et fluorescerende mikroskop for at observere kræftcelleinvasion, formidling og metastaser.
Protocol
1. Billede og analyser den metastatiske proces Saml flere bedøvede embryoner med en bred spids Pasteur pipette og overfør dem til glasbunden af en polystyren skål. Fjern overskydende vand og holde en begrænset mængde æg vand. Manipuler embryoet på plads med et hårsløjfeværktøj, og placer et dæksel oven på glasset. Brug et omvendt konfokalt mikroskop i kombination med vand-nedsænkning eller langdistance tørre mål. Placer embryoet således, at interesseregionen…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Materials
Wide-tip Pasteur pipette (0.5-20 µL)
Eppendorf
F276456I
Confocal microscope
Leica
SP5 STED
Stereo microscope
Leica
MZ16FA
Tg (fli:EGFP) zebrafish strain
Kindly provided by Dr. Ewa SnaarJagalska (Institute of Biology, Leiden University, Leiden, The Netherlands)
zPDX-Analysis of Invasiveness: Investigating Invasive Behavior of Metastatic Cancer Cells in Zebrafish Embryo Xenografts. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20219, doi: (2023).