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Methodenartikel

Menschliche Arteria mammaria interna (IMA) Transplantation und Stenting: A Human Model um die Entwicklung von In-Stent Restenose Studie

10.9K Aufrufe

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DOI:

10.3791/3663

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9. Mai 2012

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In diesem Artikel

Zusammenfassung

Dieses Video zeigt ein Modell zur Entwicklung von Intimahyperplasie nach der Entfaltung des Stents unter Verwendung einer menschlichen Gefäß (IMA) in einem immundefizienten Rattenmodell zu untersuchen.

Zusammenfassung

Präklinische Forschung in vivo Modelle zu pathobiologischen und pathophysiologischen Prozessen in der Entwicklung der Intimahyperplasie nach Gefäß-Stents zu untersuchen sind entscheidend für translationale Ansätze 1,2.

Die am häufigsten verwendeten Tiermodelle gehören Mäuse, Ratten, Kaninchen, Schweine und 3-5. Allerdings bleibt die Übersetzung dieser Modelle in den klinischen Alltag schwierig, da diese biologischen Prozesse bereits in der Tier-Gefäße untersucht werden, aber nie in der menschlichen Forschung Modelle 6,7 durchgeführt. In diesem Video zeigen wir einen neuen humanisierten Modell, um diese Lücke zu überwinden translationale. Das gezeigte Verfahren ist reproduzierbar, einfach und schnell durchzuführen und geeignet ist, die Entwicklung von Intimahyperplasie und die Anwendbarkeit von verschiedenen Stents zu studieren.

Dieses Video zeigt, wie die Stent-Technik in der menschlichen Gefäße durch Transplantation in immundefizienten Ratten folgten durchzuführen, undbezeichnet die Herkunft von proliferierenden Zellen als Menschen.

Protokoll

1. Arteria mammaria interna (IMA) Vorbereitung

  1. Die arterielle Endothel wird durch die Passage eines 2-Französisch Fogarty arteriellen Embolektomie Katheter (Baxter Healthcare, Deerfield, IL, USA) entblößt. Der Katheter wird durch das ganze Schiff Länge gezogen zweimal zu Endothelschädigung zu gewährleisten.
  2. Verwenden Sie eine beliebige menschliche Stent 8mm Länge und 2,5 mm-3 mm Durchmesser (zB Translumina, Yukon Stent). ACHTUNG: Der Durchmesser des Stents sollte nicht mehr als die Gefäßdurchmesser um mehr als 10% auf Pre-und Post-Stent-Stenose zu vermeiden. ACHTUNG: Schalten Sie nicht die Länge des Stents innerhalb der gleichen Studie.
  3. ....

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Diskussion

Obwohl verschiedene In-vivo-Forschung werden bestehende Modelle, die Entwicklung der Intimahyperplasie nach Stentimplantation zu untersuchen, diese Modelle noch immer vor translationale Hürden zu überwinden. Darüber hinaus sind Großtiermodellen teure und spezielle Haltungsbedingungen sowie chirurgische Geräte ist nicht für alle Laboratorien zur Verfügung.

Mit Hilfe eines menschlichen IMA, um die Entwicklung der menschlichen Intimaproliferation und In-Stent Restenose zu studieren wur.......

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Offenlegungen

Keine Interessenskonflikte erklärt.

Danksagungen

Die Autoren danken Christiane Pahrmann für ihren Beitrag. Besonderer Dank geht an Ethicon, Norderstedt, Hamburg (Deutschland) für die Bereitstellung des Nahtmaterial.

Finanzierung

Sonja Schrepfer hat ein Forschungsstipendium der Deutschen Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992 / 3 1 und SCHR992/4-1) erhalten haben.] Die Arbeit wurde von der ISHLT Shumway Career Development Grant 2010 und der Falk-Forschungsförderung (Stanford University) unterstützt.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Name des Reagenzes Firma Katalog-Nummer Kommentare
2 Französisch Fogarty-Katheter Baxter Healthcare, Deerfield, IL, USA 120602F
Yukon-Stent Translumina GmbH, Hechingen, Deutschland Verwenden Sie den Stent Ihrer Wahl nach Ihren Studienprotokoll
RPMI-Medium Biochrom Nr.F1275
Heparin Baxter 2B0953
Isofluran Abt B506
Provo-Jod Betadine Puredue Pharma EAN: 5995327165830
80% Ethanol Geyer ETV 80/0500
Micro Klemme Harvard Apparatus PY2-61 bis 0186
Nahtmaterial 8-0 Johnson & Johnson, 2808G
Nahtmaterial 6-0 Johnson & Johnson, 1698 H
Carprofen Feizer Vet PZN: 0110208
Metamizol Ratiopharm
Target Retrieval Solution, pH 9 Dako S2368
Bild-iT FX Signal Enhancer Invitrogen I36933
monoklonalen Maus-Anti-GFP-Antikörper BD Living Colors 632381
Primärantikörper Verdünnungsmittel Dako S3022
Ziege-anti-Maus-IgG, Alexa Fluor 488 Invitrogen A11017
sekundären Antikörper Verdünnungsmittel Dako S0809
Kaninchen polyklonale anti-smooth muscle α-Aktin Abcam, ab5694
Ziege-Anti-Kaninchen-IgG, Alexa 555 Invitrogen A21430
Verlängern Sie Gold-Reagenz antifade Invitrogen P36930

Referenzen

  1. Deuse, T., Ikeno, F., Robbins, R. C., Schrepfer, S. Imaging In-Stent Restenosis: An Inexpensive, Reliable, and Rapid Preclinical Model. J. Vis. Exp. (31), e1346(2009).
  2. Oyamada, S. Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput....

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Nachdrucke und Genehmigungen

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