Summary
Her beskriver vi metoden til generering af en kunstig decidualiseringsmodel ved hjælp af ovariectomized mus, et klassisk endometriedecidualiseringseksperiment inden for forskningsområdet endometriedecidualisering.
Abstract
Endometriedecidualisering er en unik differentieringsproces af endometrium, tæt forbundet med menstruation og graviditet. Forringelse af decidualisering fører til forskellige endometrieforstyrrelser, såsom infertilitet, tilbagevendende abort og for tidlig fødsel. Udviklingen og anvendelsen af endometriedecidualiseringsmodellen i reproduktive studier har været et højdepunkt for reproduktive forskere i lang tid. Musen er blevet flittigt brugt til at studere reproduktion og decidualisering. Der er tre veletablerede musemodeller vedrørende decidualisering, nemlig naturlig graviditetsdecidualisering (NPD), kunstig decidualisering (AD) og in vitro decidualisering (IVD). Blandt dem betragtes AD som en pålidelig model til musedecidualisering, som er let at implementere og tæt på NPD. Dette papir fokuserer på en modificeret metode til generering og anvendelse af musens kunstige decidualiseringsmodel med ovariektomi for at undgå ovarieeffekter, som kan opnå meget reproducerbare resultater med små inden for gruppevarianser. Denne metode giver en god og pålidelig dyremodel til undersøgelse af endometriedecidualisering.
Introduction
Med udviklingen af human-assisteret reproduktionsteknologi har den nuværende kliniske graviditetsrate for in vitro fertilisering-embryo overførsel (IVF-ET) nået eller endda overskredet den naturlige graviditet. På trods af dette gennemgår mange patienter i assisteret reproduktionspraksis stadig flere embryooplægninger, men opnår ikke graviditet som ønsket. Imidlertid er dens specifikke molekylære mekanisme stadig uklar, så klinisk intervention er ineffektiv, hvilket er en af de betydelige udfordringer, som reproduktiv medicin står over for 1,2.
Endometriefaktorer tegner sig for omkring to tredjedele af årsagerne til IVF-svigt3. Implantation af menneskeligt embryo er opdelt i tre faser: positionering, vedhæftning og invasion 4,5,6. Moderens endometrium gennemgår en række ændringer for at imødekomme embryoets ankomst. Dannelse af en implantation "vinduesperiode" giver gunstige betingelser for embryoimplantation 7,8.
I de fleste pattedyr, efter at blastocysten klæber til livmoderens luminale epitel, begynder stromale celler omkring blastocysten hurtigt at sprede sig og differentiere, og den hurtige ombygning af mesenchymet ændrer sin form og funktion, hvilket fører til embryoimplantation 5,9,10. Den hurtige stigning i stedets volumen og vægt gør det muligt for blastocysten at blive indlejret i livmoderstroma, en proces kendt som decidualisering11. Endometriestromaet differentierer og ombygger som forberedelse til graviditet, mens overgangen af stromale celler giver plads og nye signalforbindelser til, at decidualceller kan udføre deres funktioner12,13. Stromaceller omdannes til decidualceller og udskiller mange ikoniske faktorer såsom prolaktin (PRL), insulinlignende vækstfaktorbindende protein 1 (Igfbp1) og så videre. Undersøgelser har vist, at unormal decidualisering er en af hovedårsagerne til embryoimplantationssvigt, men årsagen til unormal decidualisering er stadig uklar og skal belyses yderligere 1,14.
Musens kunstige decidualiseringsmodel er afgørende for at studere den fysiologiske proces og molekylære mekanismer, der ligger til grund for decidualisering. Kunstig decidualisering (AD) refererer hovedsageligt til processen med endometriedecidualisering etableret ved kunstige metoder til simulering af graviditet eller menstruationscyklus. Med hensyn til morfologi er der ringe samlet forskel mellem graviditetsdecidualisering og kunstig decidualisering15,16. Livmoderkirtlerne findes i endometrium, før decidua dannes og forsvinder efter decidualisering. Med hensyn til genekspression identificeres kun en lille forskel mellem naturlig graviditetsdecidualisering (NPD) og AD15. Derfor kan den kunstige decidualiseringsmodel i mus simulere graviditetsdecidualisering for at udforske den ukendte patogenese og ny behandling af humane reproduktive sygdomme.
NPD, AD og in vitro decidualization (IVD) er tre metoder til at opnå musedecidualisering. NPD-modellen afhænger af naturlig graviditet og er tættest på moderens fysiologiske tilstand, herunder virkningerne fra embryoner. Sammenligning af forskellene mellem implantations- og ikke-implantationssteder er en mere fysiologisk og bekvem tilgang til at studere decidualisering. AD-modellen blev udviklet ved anvendelse af en intrauterin injektion af sesamolie som et stimulerende middel til at fremkalde decidualisering i en pseudogravid hunmus parret med vasektomiserede hanner for at undgå påvirkning fra embryoner. Både NPD- og AD-modeller spiller væsentlige roller i forskellige forskningsformål, men de kan ikke undgå parringssvigt og forskelle inden for gruppen forårsaget af de forskellige aktiviteter i moderens hormonmetabolisme. IVD er en metode, der afhænger af behandlingen af kombineret østrogen og progesteron på cellulært niveau, hvilket kræver strengere eksperimentelle betingelser og driftsevne. In vitro-modellen kan imidlertid ikke fuldt ud simulere det deciduale respons under fysiologiske forhold15. Derfor foreslår vi en enkel og forbedret induktionsmetode modificeret fra traditionel AD for at reducere effekten af endogene hormoner på decidualisering. Baseret på at sikre succesen med decidualiseringsinduktion er den tættere på den fysiologiske tilstand og mere egnet til forsøg, der skal udelukke embryofaktorer.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle de beskrevne dyreforsøg blev godkendt af Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School's Committee on the Use and Care of Animals (nr. 20171202). Alle operationer følger passende retningslinjer for dyrepleje og brug, agentur og nationale retningslinjer.
BEMÆRK: Mus blev opdrættet i et specifikt patogenfrit miljø (SPF) med en temperatur på 22 ° C ± 1 ° C, relativ luftfugtighed på 50% ± 1%, en lys / mørk cyklus på 12 timer / 12 timer og fri adgang til mad og vand.
1. Mus ovariektomi
- Steriliser de kirurgiske instrumenter med en højtemperatur- og højtrykssterilisator 1 dag før operationen.
- Væg 8 uger gamle C57BL/6 mus og injicer intraperitonealt (i.p) 1% natriumpentobarbital i overensstemmelse hermed for at bedøve musene. Den anvendte dosis er 40 mg/kg17. Denne dosis giver 40-60 minutters sedation, som opfylder kravene til en ovariektomi. Ved præoperativ analgesi injiceres mus med 5 mg/kg meloxicam (s.c).
BEMÆRK: Vellykket anæstesi hos mus kan indikeres ved forsvinden af dybe muskelreflekser og stabil vejrtrækning. Tegn på vellykket anæstesi inkluderer ingen blinkende, når du rører ved den indre canthus, ingen synke, når du trækker tungen, ingen benbøjning, når du klemmer huden mellem tæerne, og ingen hoppende, når du nåler halen. - Påfør den beskyttende øjensalve på øjenkuglerne for at forhindre tørhed under anæstesi.
- Start operationen, når mus er fuldstændig bedøvet. Placer og fastgør musene i den udsatte position på betjeningsfladen, og barber hårene på bagsiden efter at have fugtet dem med sæbevand. Desinficer huden med 70% ethanol efter barbering.
- Find operationssnitstedet 0,5 cm (eller 1,0 cm under ribben) på overkanten af lårroden på begge bagben parallelt med rygsøjlen (figur 1A).
BEMÆRK: En korrekt snitplacering er afgørende for hurtigt at lokalisere æggestokken. - Tag snitstedet som centrum og desinficer snitområdet med iodophor 3x, og placer derefter en kirurgisk drapering omkring snitområdet.
- Lav et langsgående snit på ca. 0,5-1,0 cm ved hjælp af en saks. Skær fascia og passivt adskille musklerne med pincet.
- Find et stykke af den hvide fedtpude i snitfeltet tæt på nyrens nedre pol gennem det tynde muskellag (figur 1B).
BEMÆRK: Den hvide fedtpude er den mest oplagte indikator for placeringen af æggestokken. - Klem fedtmassen med hæmostatiske klip, og træk æggestokken indpakket af fedtpuden ud af snittet.
- Klem krydset mellem æggestokken og æggelederen med buet pincet, og fjern æggestokken langs æggestokkens pedikel med en saks. Stop blødningen med en elektrokoagulationspen eller en nål i en 1 ml sprøjte opvarmet på alkohollampen.
BEMÆRK: Sørg for at bevare æggelederen, som er det anatomiske vartegn for den efterfølgende injektion af sesamolie i livmoderhornene. - Skyl det kirurgiske snit med normalt saltvand for at forhindre vævsadhæsion, brug en 4-0 sutur til at sy henholdsvis muskel og hud, og desinficer det kirurgiske snit med iodophor igen.
- Musene anbringes i buret, og de genoplives i en kuvøse på 25 °C udstyret med en lyskilde og et ventilationssystem i ca. 2 timer.
- Vær opmærksom på musene efter operationen, læg dem tilbage på det oprindelige fodringssted alene, indtil de kommer sig helt, og giv dem nok vand og mad.
2. Postoperativ hvile og østrogen- og progesteronformulering
- Sørg for, at musene hviler i 2 uger efter ovariektomi.
- I et ultrarent skab tilsættes østrogen (2 ng / μL) og progesteron (0,2 ng / μL) i sesamolie i RNA-enzymfrie centrifugerør.
- Centrifugeglassene anbringes i et termostatisk vandbad ved 37 °C, og glassene rystes kontinuerligt for at fremskynde opløsningen.
- Efter fuldstændig opløsning opdeles sesamolieopløsningen i 100 μL aliqouts til praktisk brug. De tilberedte østrogen- og progesteronopløsninger opbevares i køleskab ved 4 °C.
3. Induceret kunstig decidualiseringsmodel
- Subkutant (s.c) injicere 100 ng østrogen i 50 μL sesamolie i hver mus i 3 dage, efterfulgt af 2 dages hvile15.
BEMÆRK: Sørg for, at østrogen og progesteron er formuleret og placeret forskellige steder. Enhver forurening af østrogen med progesteron kan føre til svigt. - Injicer (s.c.) 1 mg progesteron og 10 ng østrogen i 50 μL sesamolie i hver mus i yderligere 3 dage15.
- Betjen musene for at inducere den kunstige decidualiseringsmodel15 6 timer efter den tredje østrogen-progesteron kombinerede injektion.
- Find livmoderhornet i den nedre ende af æggelederne og injicer 20 μL sesamolie langsomt sammen med livmoderhornet, skub vævet tilbage, sutur snittet og lad musen komme sig. Tilgangen til operation er den samme som musens ovariektomi15.
BEMÆRK: Fortsæt kun med den anden operation i tilfælde af en vellykket ovariektomi (hudsnit er godt helet, æggestokken er helt udskåret, og den resterende ende af æggelederen klæbes ikke til det omgivende væv).
BEMÆRK: Til inducering af AD-modellen er 20 μL sesamolie passende; mere end 20 μL sesamolie trænger let ind i den anden side. - Injicer (s.c.) 50 μL sesamolie indeholdende 1 mg progesteron og 10 ng østrogen (H.) i yderligere 4 dage. Se nærmere oplysninger i figur 215,18.
4. Indsamling af prøver
- Aflive musene (n = 6) ved kuldioxidkvælning og opsaml livmoderen. Overhold formen på den bilaterale livmoder, tag billeder og vej livmoderhornene (figur 3A, B).
- Fastgør 3-5 mm af livmodervævet med 10% formalin, indlejr i paraffin, og snit dem. Plet sektionerne med hæmatoxylin og eosin for at observere de morfologiske ændringer19 (figur 4A).
- Integrer yderligere 3-5 mm af livmodervævet i optimal skæretemperaturblanding (OCT), frys i flydende nitrogen og opbevar i et køleskab på -80 °C. Vævet gennemskæres til 10 μm og alkalisk fosfataseaktivitet påvises i livmodervævet ved azokoblingsmetode20 (figur 4B).
BEMÆRK: Tilfredsstillende resultater kan opnås ved hjælp af frosne sektioner til at detektere ALP-indhold, ikke paraffinsektioner. - Uddrag de samlede RNA'er i livmoderen med Trizol-reagens og udfør kvantitativ realtids-PCR (qPCR) på et PCR-system i realtid (materialetabel) med qPCR-masterblanding (materialetabel) for at detektere den relative mRNA-ekspression af prolaktinfamilie 8-underfamiliemedlem 2 (Prl8a2), alkalisk fosfataselever / knogle / nyre (Alpl) og insulinlignende vækstfaktorbindende protein 1 (Igfbp1)15 ved normalisering til 18S mRNA-niveauer (figur 4C-E ). Følg PCR-betingelserne: Trin 1, 95 ° C i 30 s; trin 2: 95 °C i 10 s og 60 °C i 30 s Gentag cyklussen 40x. En komplet liste over primersekvenser findes i tabel 1.
- Analyser qPCR-data ved hjælp af 2-ΔΔCT-metoden og en t-testmetode til statistisk analyse i den relevante software. I denne undersøgelse blev p < 0,05 betragtet som statistisk signifikant.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Musens decidualiseringsmodelindekser inkluderer livmoderens generelle morfologi, masseforholdet mellem den decidualiserede og ikke-decidualiserede livmoder, endometriumets histologiske morfologi og ekspressionsniveauet for decidualiseringsmarkørmolekyler. Den generelle morfologi af den kunstige decidualiserede livmoder hos mus induceret af olie er tættere på livmoderen under graviditeten. Livmoderlegemet bliver tykt, og livmoderhulen bliver mindre end den ikke-inducerede side. Volumen og vægt af det inducerede livmoderhorn er signifikant højere end den ikke-inducerede side (figur 3A, B). HE-farvning af livmodervæv viste, at kirtlerne forsvinder, og de endometriestromale celler på det inducerede horn differentieres i store, runde, cytoplasmatiske og multinucleated decidual celler med uklare cellegrænser. De ikke-inducerede sidesektioner viser endometrievævets morfologi under en normal fysiologisk tilstand (figur 4A). Resultatet af azokoblingsmetoden viste, at indholdet af alkalisk fosfatase i den olieinducerede side var signifikant højere end den ikke-inducerede side (figur 4B). qPCR-resultaterne viste, at mRNA-ekspressionen af Prl8a2, Alpl og Igfbp1 i det inducerede horn var signifikant højere end i det ikke-inducerede, hvilket tyder på, at olie kan inducere kunstig decidualisering hos mus (figur 4C-E).
Figur 1: Det operative snit i musens ovariektomi . (A) Musens ovariektomiposition. (B) Placeringen af musens æggestok under ovariektomi. (C) Stedet for æggestokken under ovariektomi. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 2: Proceduren for operationen. Hele proceduren omfatter ovariektomi, postoperativ hvile, induktion af den kunstige decidualiseringsmodel og fænotypisk validering. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 3: Frembringelse af modellen for kunstig decidualisering med mus. (A) Repræsentativt billede af kunstig decidualisering fremkaldt af olie. Højre livmoder blev ikke injiceret med olie, kaldet olie (-). Den venstre livmoder blev injiceret med olie, kaldet olie (+). (B) Vægten af livmoderen injiceret med eller uden olie. p < 0,001. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 4: Validering af modellen for kunstig decidualisering med mus. (A) Repræsentativt HE-billede af kunstig decidualisering fremkaldt af olie. Skalastang = 1 mm og 100 μm. (B) Azokoblingsmetoden detekterede den alkaliske fosfataseaktivitet af kunstig decidua. Skalastænger = 200 μm og 50 μm. (C) Ekspressionsniveauet for Prl8a2 mRNA blev detekteret ved qPCR. * p < 0,05. (D) Ekspressionsniveauet for Alpl mRNA. ** p < 0,01. (E) Ekspressionsniveauet for Igfbp1 mRNA. ** p < 0,01. Klik her for at se en større version af denne figur.
| Igfbp1 mus qPCR-F | GCCCAACAGAAAGCAGGAGATG |
| Igfbp2 mus qPCR-R | GTAGACACACCAGCAGAGTCCA |
| Prl8a2 mus qPCR-F | ACCACAACCCATTCTCAGCTGG |
| Prl8a2 mus qPCR-R | TGTTCAGGTCCATGAGCTGGTG |
| Alpl Mus qPCR-F | CCAGAAAGACACCTTGACTGTGG |
| Alpl Mus qPCR-R | TCTTGTCCGTGTCGCTCACCAT |
| 18s mus qPCR-F | ATGGCCGTTCTTAGTTGGTG |
| 18s mus qPCR-R | CGGACATCTAAGGGCATCAC |
Tabel 1: Liste over primersekvenser.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Decidualisering hos mus er en spontan proces afhængigt af tilstedeværelsen af embryoner, som er forskellig fra mennesker. Det har imidlertid vist sig, at kunstig stimulering såsom livmoderinjektion af glasperler og livmoderlaceration kan fremkalde decidualisering af endometrium i stedet for embryoner. Derudover fandt forskerne, at mange faktorer kunne fremkalde decidual eller deltage i decidualisering, såsom injektion af steroidhormoner, prostaglandiner og væksthæmmende faktorer i livmoderhulen21. Sammenlignet med modelleringsmetoderne ovenfor kan musemodellen, der er beskrevet her med ovariektomi, ved hjælp af sesamolie som et stimulerende middel, udelukke virkningerne af østrogen og progesteron, der produceres endogent. Derfor er det økonomisk og let at betjene.
Æggestokkene skal fjernes rent for at forhindre resterende ovarievæv, hvilket vil påvirke den efterfølgende induktion af decidualisering. Dette trin sigter mod at reducere virkningerne af endogent østrogen og progesteron produceret af æggestokkene. Skader på æggelederen bør undgås, fordi det kan bruges som et tegn til at kigge efter livmoderen, når du injicerer sesamolien i livmoderhulen. Hvis abdominal adhæsion eller æggeleder fjernelse opstår, skal operatøren være opmærksom på at skelne livmoderen fra tarmen.
Olielækage forekommer let i processen med subkutan injektion. Man bør vælge mavehuden som et subkutant injektionssted og undgå brystvorterne. Det er nødvendigt at injicere olien og trække nålen langsomt ud. Hvis nålen ikke kan trækkes ud, når musen er aktiv, resulterer det let i lækage. Man bør trykke på nålestedet med en vatrondel et øjeblik for at forhindre lækage. Eksogene østrogen- og progesteroninjektioner blev anvendt i denne operation for at holde musenes hormonniveauer stabile før den inducerende decidualiseringsoperation. Denne injektionsmetode simulerede hormonændringer i musenes periimplantationsperiode. Heri inducerede vi decidualisering efter den anden østrogentop.
Nøglen til succesen med denne operation er mængden af sesamolie, der injiceres. For meget sesamolie vil trænge ind i hulrummet i livmoderens andet horn. Utilstrækkelig sesamolie vil føre til nedsat decidualiseringsrespons eller ujævn decidualisering langs livmoderen, hvilket resulterer i uventede eksperimentelle forskelle. Under operationen skal man indsætte sprøjtenålen i livmoderhulen, når man injicerer sesamolie og forsigtigt trække frem og tilbage for at sikre, at nålen er i livmoderhulen. En del af livmoderhulen kan ses som gennemsigtig, hvis den injiceres med succes. Man skal forsigtigt klemme nålepikken med pincet i ca. 10 s for at sikre, at den er lukket, hvilket kan forhindre lækage af sesamolie efter at have trukket nålen ud. På samme tid skal du forsigtigt skubbe livmoderkroppen nedad med nålen for at få sesamolien til at sprede sig jævnt i livmoderhulen.
Behandling og genoplivning efter operationen er andre nøgler til denne models succes. For det første er det vigtigt at holde et sterilt miljø til snittet under operationen. Før musene genoplives, desinficeres operationssnittet med iodophor og dækker det med et stykke medicinsk gasbind for at reducere forekomsten af infektion. Efter operationen skal musene metabolisere anæstetika i 2-3 timer for at komme sig. I denne periode skal musene placeres i en 25 °C inkubator for at komme sig hurtigere og undgå hypotermi forårsaget af desinfektion med 70% alkohol og iodofor. Man bør være opmærksom på helingen inden for få dage efter operationen og håndtere former for operative komplikationer i tide, såsom snitrevner, hævelse, sårdannelse og så videre.
Prl8a2 og Alpl er de mest klassiske decidualiseringsmarkører. Igfbp1 er også det vigtigste protein i decidualiserede celler hos mus og betragtes som den specifikke markør for decidualisering hos mus. Ekspressionsniveauerne af Prl8a2, Alpl og Igfbp1 mRNA i det olieinducerede livmoderhorn øges signifikant sammenlignet med kontrolsiden uden olieinjektion. Desuden er alkalisk fosfataseaktivitet på den olieinducerede side signifikant højere end på kontrolsiden. Disse resultater indikerer alle succesen med den kunstige decidualiseringsmodel15.
Musens kunstige decidualiseringsmodel kan bruges til at validere patogene infertilitetsmolekyler og give en god valideringsmodel til diagnosticering og behandling af infertilitet forbundet med unormal endometriedecidualisering. Denne model er nyttig til at studere reproduktive sygdomme, såsom gentagen abort og gentagen implantationsfejl. Det bruges til at studere moderens faktorers rolle i embryoimplantation og invasion. Denne AD-model har god sikkerhed, en høj succesrate og løser indflydelsen fra endogene hormoner. Det er dog en tidskrævende og meget krævende proces. Vi vil yderligere optimere vores eksperimentelle metoder for at lette forskningen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har intet at afsløre.
Acknowledgments
Forfatterne ønsker at anerkende støtte fra National Nature Science Foundation of China (82001629, XQS), Youth Program of Natural Science Foundation of Jiangsu Province (BK20200116, XQS) og Jiangsu Province Postdoc Research Funding (2021K277B, XQS).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Estrogen | Sigma | E2758 | Hormone supplement |
| Progesterone | Sigma | P0130 | Hormone supplement |
| Sesame oil | Sigma | S3547 | Hormone supplement |
| Sodium pentobarbital | Dainippon Sumitomo Pharma Co.,Ltd. | Anaesthesia | |
| Meloxicam injection | Qilu Animal Health Products Co., Ltd | Analgesia | |
| Alkaline phophatase stain kit(kaplow's/azo coupling method) | Solarbio | G1480 | Alkaline phophatase stain |
| Eosin | Servicebio | G1005-2 | HE stain |
| Hematoxylin | Servicebio | G1005-1 | HE stain |
| ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix | Vazyme | Q711-02 | qPCR |
| 70% ethanol | Lircon | ZH1120090 | Disinfect |
| Iodophor | Runzekang | RZK-DF | Disinfect |
| Erythromycin Eye Ointment | Guangzhou Baiyunshan | Mice eyeball protect | |
| 4-0 suture | Ethicon | W329 | Incision suture |
| 10% formalin | Yulu | L25010118 | Tissue fix |
| Optimal cutting temperature compound | Sakura | 4583 | Ssection |
| Trizol reagent | Ambion | 15596018 | qPCR |
References
- Carson, S. A., Kallen, A. N. Diagnosis and management of infertility: A review. JAMA. 326 (1), 65-76 (2021).
- Yatsenko, S. A., Rajkovic, A. Genetics of human female infertility dagger. Biology of Reproduction. 101 (3), 549-566 (2019).
- Sang, Y., Li, Y., Xu, L., Li, D., Du, M. Regulatory mechanisms of endometrial decidualization and pregnancy-related diseases. Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 52 (2), 105-115 (2020).
- Ng, S. W., et al. Endometrial decidualization: The primary driver of pregnancy health. International Journal of Molecular Sciences. 21 (11), 4092 (2020).
- Birgit, G., Brosens, J. J. Cyclic decidualization of the human endometrium in reproductive health and failure. Endocrine Reviews. 35 (6), 851-905 (2014).
- Owusu-Akyaw, A., Krishnamoorthy, K., Goldsmith, L. T., Morelli, S. S. The role of mesenchymal-epithelial transition in endometrial function. Human Reproduction Update. 25 (1), 114-133 (2019).
- Paulson, E. E., Comizzoli, P. Endometrial receptivity and embryo implantation in carnivores-commonalities and differences with other mammalian species. Biology of Reproduction. 104 (4), 771-783 (2021).
- Kelleher, A. M., Milano-Foster, J., Behura, S. K., Spencer, T. E. Uterine glands coordinate on-time embryo implantation and impact endometrial decidualization for pregnancy success. Nature Communications. 9 (1), 2435 (2018).
- Tian, J., et al. Attenuated monoamine oxidase a impairs endometrial receptivity in women with adenomyosis via downregulation of FOXO1dagger. Biology of Reproduction. 105 (6), 1443-1457 (2021).
- Large, M. J., DeMayo, F. J. The regulation of embryo implantation and endometrial decidualization by progesterone receptor signaling. Molecular and Cellular Endocrinology. 358 (2), 155-165 (2012).
- Dunn, C. L., Kelly, R. W., Critchley, H. O. Decidualization of the human endometrial stromal cell: an enigmatic transformation. Reproductive BioMedicine Online. 7 (2), 151-161 (2003).
- Zhu, H., Hou, C. C., Luo, L. F., Hu, Y. J., Yang, W. X. Endometrial stromal cells and decidualized stromal cells: Origins, transformation and functions. Gene. 551 (1), 1-14 (2014).
- Jose, R. M., et al. Endometrial and decidual stromal precursors show a different decidualization capacity. Reproduction. 160 (1), 83-91 (2020).
- Pan-Castillo, B., et al. Morphophysical dynamics of human endometrial cells during decidualization. Nanomedicine. 14 (7), 2235-2245 (2018).
- Wang, C., et al. Comparative analysis of mouse decidualization models at the molecular level. Genes. 11 (8), 935 (2020).
- De Clercq, K., Hennes, A., Vriens, J. Isolation of mouse endometrial epithelial and stromal cells for in vitro decidualization. Journal of Visualized Experiments. (121), e55168 (2017).
- Kerger, H., et al. Microvascular oxygen delivery and interstitial oxygenation during sodium pentobarbital anesthesia. Anesthesiology. 86 (2), 372-386 (1997).
- Filant, J., Spencer, T. E. Endometrial glands are essential for blastocyst implantation and decidualization in the mouse uterus. Biology of Reproduction. 88 (4), 93 (2013).
- Sheng, X., et al. The mitochondrial protease LONP1 maintains oocyte development and survival by suppressing nuclear translocation of AIFM1 in mammals. EBioMedicine. 75, 103790 (2022).
- Grogg, E., Pearse, A. G. Coupling azo dye methods for histochemical demonstration of alkaline phosphatase. Nature. 170 (4327), 578-579 (1952).
- Labarta, E., et al. Analysis of serum and endometrial progesterone in determining endometrial receptivity. Human Reproduction. 36 (11), 2861-2870 (2021).
