Trace Angstkonditionierung bei Mäusen

Das übergeordnete Ziel des folgenden Experiments ist es, das hippocampusabhängige Lernen und Gedächtnis bei Mäusen durch den Einsatz von Spurensphärenkonditionierung zu bewerten. Dies wird erreicht, indem das Tier zunächst darauf trainiert wird, einen auditiven Ton mit einem aversiven Reiz zu assoziieren. Am nächsten Tag wird das Tier in einen neuen Kontext gestellt und das Erstarrungsverhalten als Reaktion auf den Ton aufgezeichnet.

Am dritten Tag wird das Tier in den ursprünglichen Kontext zurückversetzt und das Frostverhalten aufgezeichnet. Die Ergebnisse zeigen, dass Mäuse, die mit der Schocktonpaarung trainiert wurden, ein stärkeres Einfrierverhalten zeigen als diejenigen, die den Schock nicht erhalten. Diese Methode kann verwendet werden, um Einblicke in das hippocampusabhängige Lernen und Gedächtnis und Mäuse zu erhalten, und ist besonders nützlich bei der Untersuchung von transgenen und Knockout-Tieren.

Das folgende Verfahren wird in einer Angstkonditionierungskammer durchgeführt, die in einer größeren Schalldämpfungskammer untergebracht ist. Bei geschlossener Tür zur Kammer sollten die Leuchten so eingestellt sein, dass sie die gewünschte Beleuchtungsstärke erreichen, wenn sie richtig platziert ist, sollte die Leuchtstärkeanzeige aus sein. Verwenden Sie einen Schallmesser, um einen gleichmäßigen Pegel von Hintergrundgeräuschen in jeder Kammer zu bestätigen.

Kalibrieren Sie als Nächstes den Ton, der während des Trainings verwendet wird. Verwenden Sie ein externes Kalibriergerät, um den Schockpegel zu kalibrieren. Lege eine Leine auf eine Stange und eine weitere drei oder vier Stangen darüber.

Verwenden Sie den Schockgenerator, um den Schock zu verabreichen, und kalibrieren Sie, bis der richtige Pegel erreicht ist. Wiederholen Sie diesen Schritt für jede Angstkonditionierungskammer. Sobald das Gerät vorbereitet ist, bringen Sie die Probanden in einen vom Testraum getrennten Warteraum, um übermäßige Handhabung zu vermeiden.

Beschriften Sie die Schwänze vor dem Test mindestens 30 Minuten vor dem Test oder am Tag davor. Wenn Sie bereit sind, zu beginnen, bringen Sie die Testmaus in einen sauber beschrifteten Käfig für den Transport in die Angstkonditionierungskammer. Platzieren Sie die Maus in der Kammer, schließen Sie die Tür und starten Sie das Softwareprogramm.

Am ersten Tag des Trainings dürfen die Mäuse die Kammer drei Minuten lang erkunden. Die Software zeigt dann einen 22. Ton an, gefolgt von einem 22. Trace-Intervall, das mit einem leichten Fußschock endet. Beobachte das Subjekt, um zu bestätigen, dass es die aversiven Reize erhalten hat.

Ein 202. Intervall zwischen den Versuchen trennt fünf Konditionierungsversuche. Lassen Sie das Tier nach den Versuchen eine Minute lang in der Prüfkammer verbleiben, bevor Sie es entfernen, setzen Sie das Tier wieder in den Transferkäfig und kehren Sie in den Haltungsraum zurück. Wenn es weitere Mäuse gibt, die in ihrem Heimkäfig einzeln getestet werden sollen, halten Sie die Maus unter, bis alle Mäuse den Test abgeschlossen haben.

Reinigen Sie die Testkammer mit 30 % Isopropanol, um sich auf das nächste Tier vorzubereiten. Wiederholen Sie diese Schritte, bis alle Mäuse trainiert wurden. Bringen Sie alle Mäuse in ihren Kolonieraum zurück.

Nachdem am nächsten Tag die letzte Maus der Kohorte getestet wurde, werden die Tiere getestet. Für Spuren, Angst, Erinnerung. Ersetzen Sie an diesem Tag die Einstreu der Transferkäfige durch geschreddertes Papier, um ihren Kontext zu ändern.

Auch der Kontext der Kammer ändert sich. Lege eine Schaumstoffplatte unter eine durchsichtige Acryleinlage auf dem Boden, um ihre Textur und ihr Aussehen zu verändern. Platzieren Sie eine Trennwand aus Acryl im Testbereich.

Verändern Sie den Geruch, indem Sie Vanilleextrakt in ein Molkeschiffchen unter den Boden geben. Einsetzen an diesem Tag, reinigen Sie die Kammer mit 70% Ethanol anstelle von 30% Isopropanol zwischen jeder Maus. Wenn Sie fertig sind, legen Sie die Maus in die Testkammer und starten Sie das Programm.

Die Sitzung beginnt mit einer zweiminütigen Grundphase, gefolgt von drei Präsentationen im 22. Ton. Zwischen den einzelnen Tonvorträgen liegt ein 222. Intervall. Nachdem die Sitzung beendet ist, bringen Sie die Mäuse in ihren Heimkäfig zurück und fahren Sie fort, bis alle Tiere getestet wurden, um sie auf die Tests am nächsten Tag vorzubereiten.

Stellen Sie den gleichen Kontext wieder her, den Sie am ersten Tag verwendet haben. Reinigen Sie die Kammer mit 30% Isopropanol. Die kontextuelle Konditionierung wird am dritten Tag durchgeführt.

Verwenden Sie die gleichen Transferkäfige wie am ersten Tag, um die Testmaus aus dem Warteraum zu holen. Platzieren Sie die Maus in der Prüfkammer und starten Sie dann das Programm zum Testen des Kontextspeichers. Führen Sie ein Programm aus, um das Einfrierverhalten acht Minuten lang aufzuzeichnen.

Nach dieser Zeit bringen Sie die Maus in ihren Heimkäfig zurück und setzen Sie den Test fort Wie zuvor gezeigt. Repräsentative Ergebnisse zeigen eine Zunahme des Frostverhaltens bei Tieren, die im Laufe der Trainingseinheit die Schocktonpaarung erhalten. In einem neuen Kontext froren Mäuse, die den aversiven Schockstimulus erhielten, stärker ein als die Mäuse, die den Schock während der Tonusspur zu Studienbeginn und zwischen den Versuchen nicht erhielten. Bei der Rückkehr in den ursprünglichen Kontext zeigten die Tiere, die den aversiven Schockreiz erhielten, über den Zeitraum von acht Minuten ein durchweg höheres Einfrierverhalten.

Nachdem Sie dieses Video gesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie Sie die Konditionierung von Spurenangst verwenden, um hippocampusabhängiges Lernen und Gedächtnis und Mäuse zu verstehen.