Stress verstärkt Angst lernen, ein stabiles Nagetier Modell der posttraumatischen Belastungsstörung

Diese Methode kann helfen, wichtige Fragen im Bereich der Verhaltensneurowissenschaften zu beantworten, wie zum Beispiel, wie man die zugrunde liegenden biologischen Mechanismen der PTSD besser verstehen kann. Der Hauptvorteil dieser Technik ist, dass sie robust, zuverlässig, quantitativ ist und bei mehreren Arten durchgeführt werden kann. Beginnen Sie mit der Einrichtung eines Satzes von Angstkonditionierungskammern, um als Kontext A zu dienen, und einem zweiten Satz von Angstkonditionierungskammern, um als Kontext B.Place jede Angst Konditionierungskammer in eine Schalldämpfungskabine zu dienen, um das Eindringen von Außengeräuschen zu verhindern.

Platzieren Sie dann Gitterböden in jeder Angstkonditionierungskammer für die Fußschocklieferung, wobei ein anderes Rastermuster für jeden Kontext verwendet wird, um die Bodenstruktur zwischen Kontexten zu unterscheiden. Platzieren Sie als Nächstes schwarze Plexiglas-Dreieckseinsätze in Kontext B, um das interne Layout der beiden Kontexte zu unterscheiden. Wischen Sie die Kammerwände und Türen ab und sprühen Sie die Pfannen unter den Gitterböden mit einer verdünnten Reinigungslösung.

Nachdem der Gitterboden gereinigt wurde, schließen Sie einen Stoßgenerator und einen Scrambler an, der in der Lage ist, einen Stoßstoß von 1 Milliampere oder einer niedrigeren Amplitude an jeden Gitterboden für die Fußstoßlieferung zu liefern. Verwenden Sie schließlich ein Multimeter, um den vom Schockgenerator gelieferten Strom zu testen, indem Sie jede Sonde auf einen anderen Balken des Gitterbodens legen und bestätigen, dass die gewünschte Stoßamplitude erzeugt wird. Richten Sie am ersten Tag Kontext A mit Gitterböden und sichtbarem Licht ein.

Stellen Sie sicher, dass das Multimeter an verschiedenen Balken befestigt ist, um die gewünschte Stoßamplitude zu bestätigen. Transportieren Sie Tiere vom Vivarium in den Versuchsraum in ihren heimischen Käfigen, die auf einen Wagen gelegt werden, und legen Sie sie einzeln in die vier Angstkonditionierungskammern. Für Mausexperimente verwenden Sie den Schockgenerator und Scrambler, um 10 eine Sekunde, einen Milliamp-Fuß-Schocks zufällig über 60 Minuten durch die Gitterböden der Kammern mit traumatisierten Probanden präsentiert zu liefern.

Für Rattenexperimente verwenden Sie den Stoßgenerator und Scrambler, um 15 eine Sekunde, einen Milliamp-Fuß-Schocks zufällig über 90 Minuten durch die Gitterstäbe der Kammern mit traumabedingten Probanden präsentiert zu liefern. Nach 90 Minuten für die Ratte, oder 60 Minuten für die Maus-Experimente, alle Tiere in ihre heimischen Käfige zurückbringen und sofort ins Vivarium zurückkehren. Richten Sie am zweiten Tag kontext A ein und transportieren Sie Tiere wie am ersten Tag in den Versuchsraum.

Platzieren Sie Tiere acht Minuten lang ohne Schocklieferung in Kontext A, und zeichnen Sie das Verhalten während der gesamten Sitzung auf Video auf. Nach acht Minuten alle Tiere in ihre heimischen Käfige zurückbringen und prompt ins Vivarium zurückkehren. Richten Sie am dritten Tag Kontext B mit einem anderen Satz von Gitterböden ein als die in Kontext A verwendeten und schwarzen dreieckigen oder weiß gebogenen Plexiglaseinsätzen.

Verwenden Sie bei Bedarf Infrarot- oder Nahinfrarotlicht, um die Kammern zu beleuchten, und überprüfen Sie die Stoßamplitude mit dem Multimeter. Wischen Sie die Kammern herunter und sprühen Sie die Pfannen unter den Gitterböden mit der Lösung, die nicht im Kontext A verwendet wird. Weiter transportieren Sie Tiere aus dem Vivarium in den Versuchsraum in einer schwarzen Plastikwanne und legen Sie sie einzeln in Angstkonditionierungskammern. Nach einer Baseline-Periode von 180 Sekunden liefern Sie entweder einen einzigen sekundenlangen, einen Milliampere-Fußschock für Ratten oder einen einzigen zwei Sekunden langen, einen Milliampere-Fuß-Schock für Mäuse an alle Tiere.

Dann entfernen Sie alle Tiere 30 Sekunden nach der Schocklieferung und kehren Sie umgehend ins Vivarium zurück. Richten Sie am vierten Tag des Verfahrens den Kontext B wie am dritten Tag ein. Transportieren Sie Tiere vom Vivarium in den Versuchsraum im selben Transport wie am dritten Tag.

Platzieren Sie Tiere acht Minuten lang in Kontext B ohne Schocklieferung und während der gesamten Sitzung das Einfrieren von Videoaufzeichnungen. Schließlich alle Tiere nach acht Minuten entfernen und sofort ins Vivarium zurückkehren. Die Ergebnisse deuten darauf hin, dass Tiere im Traumazustand im Vergleich zu den Nicht-Traumakontrollen deutlich höhere Gefrierraten zeigten, was auf den Erwerb von Angst in den Traumakontext hindeutet.

Sowohl die Trauma- als auch die Unfallopfer zeigten minimale Gefrierwerte, die sich nicht voneinander unterschieden. Darüber hinaus zeigten die Traumatiere eine geringere Stoßreaktion im Vergleich zu den nicht-trauma-Kontrollen, und Traumatiere zeigten ein größeres Einfrieren im Vergleich zu den no trauma controls, was darauf hindeutet, dass die Exposition gegenüber dem traumatischen Stressor unmittelbar nach dem leichten Stressor die Angst erhöhte. Nach diesem Verfahren können andere Methoden wie das erhöhte Plus-Labyrinth, das offene Feld und die helldunkle Box durchgeführt werden, um zusätzliche Fragen wie die Auswirkungen von Traumata auf Angst-ähnliche Phänotypen zu beantworten.