Chironomidae (Diptera) kullanılması Yüzey Yüzer Su Organları bir Rapid Bioassessment Protokolü Pupa Exuviae

Bu prosedürün genel amacı, su kalitesi değerlendirmesi için chiro adayı, yüzeyde yüzen öğrenci ex numunelerinin toplanması ve işlenmesi için teknikleri tanımlamaktır. Bu, ilk olarak su ortamlarından Chiron pupil ex'in saha örneklerinin toplanmasıyla gerçekleştirilir. İkinci adımda, her bir saha örneğinden 300 örnekten oluşan bir alt örnek seçilir ve örnekler farklı morfolojik gruplara ayrılır.

Son adımda, her gruptan birden fazla temsilci cam mikroskop slaytlarına monte edilir. Sonuç olarak, su kalitesi koşullarını değerlendirmek için örnekler cins veya türlere göre tanımlanır. Bu tekniğin geleneksel bentik makro omurgasız örneklemesi gibi mevcut yöntemlere göre ana avantajı, örneklerin toplanması ve işlenmesinin verimli, ekonomik ve neredeyse tüm su ortamlarında uygulanabilir olmasıdır.

Bu tekniğin kullanılması, biyolojik izleme çalışmaları için değerli bilgiler sağlar ve rahatsızlıklar, kirlilik olayları veya iklim değişikliği nedeniyle sitelerin zaman içinde nasıl değiştiğine dair içgörüler sağlayabilir. Bu tekniğin bir akarsu habitatında nasıl kullanılabileceğine odaklanıyor olsak da, sahaya çıkmadan önce nehirler, göller, göletler, es, jüriler veya kaya havuzları gibi diğer su sistemlerine kolayca uygulanabilir. Toplanacak her numune için bir numune kavanozunun içine bir tarih ve yer etiketi ve dışına bir etiket yerleştirin.

Daha sonra, bir elinde larva tepsisi ve diğerinde elek bulunan her numune için, larva tepsisini, su göz bebeği ekzusu ve döküntüleri larva tepsisine veya elekten numuneye girdiğinde öğrenci eksüdasının biriktiği suya batırın. 10 dakika toplandıktan sonra, herhangi bir kalıntıyı elek eleğinin bir alanına konsantre etmek için numune erişiminden toplanan suyla dolu bir şişe kullanın. Daha sonra forseps ve bir etanol akışı kullanarak, göz bebeği ekzusunu dikkatlice önceden etiketlenmiş uygun numune kavanozuna aktarın ve kavanozu etanol ile doldurun.

Numune toplamaya başlamak için, uygun tarih ve yer etiketini her öğrenci eksüda numunesi için bir Dr Flakonuna yerleştirin ve şişenin dörtte üçünü etanol ile doldurun. Ardından, ilgili numune kavanozunun kapağını çıkarın ve kapakta takılı herhangi bir göz bebeği olup olmadığını kontrol edin. Bir fışkırtma şişesi etanol kullanarak, kapaktaki içeriği bir Petri kabına nazikçe durulayın.

Ardından numune kavanozunun içindeki etiketi çıkarın. Etiketin içindekileri de Petri kabına nazikçe durulayın ve etiketi bir kenara koyun. Daha sonra numune kavanozu içeriğini beyaz bir larva tepsisine aktarın ve kavanozda göz bebeği eksüdası kalmamasını sağlamak için kavanozu etanol ile durulayın.

Öğrenci eksüda kalıntısı ve etanolün bir kısmını larva tepsisinden Petri kabına aktarın. Numunenin etanol ile kaplandığından emin olun. Daha sonra Petri kabını stereo mikroskop altına yerleştirin ve çanağı organizmalar için sistematik olarak tarayın.

Daha sonra, öğrenci eksüdasını tabaktan uygun karşılık gelen şişeye aktarmak için forseps kullanın. Daha sonra tanımlama problemlerini önlemek için kırılmış veya kurumuş öğrenci eksüdasını toplamaktan kaçının. Görünür göz bebeği eksüdasının tamamı aktarıldığında, tabağın kenarlarına yapışmış olanlar da dahil olmak üzere herhangi bir ek örnek için tabağı üç kez daha döndürün ve tarayın.

300 öğrenci exe seçildiğinde, petri kabındaki kalıntıyı larva tepsisine geri koyun ve petri kabını etanol ile durulayın. Ardından kalıntıyı larva tepsisinden boş numune kavanozuna aktarın. Tarih ve yer etiketini kavanoza ekleyin ve numuneleri sıralamak için kapağı kavanozun üzerine koyun.

Etiketli şişeden öğrenci ekzusunu sadece numuneleri kaplayacak kadar etanol ile doldurulmuş bir Petri kabına dökün. Daha sonra, bir stereo mikroskop altında, numuneleri morf axa'ya ayırmak için Chiron Pub ex'in dış morfolojik özelliklerini kullanın ve farklı morph Axa'yı ayrı ayrı etiketlenmiş şişelere aktarın. Celi thax ile sınıflandırılırken etanol veya örnekle dolu dörtte üçü, örnekleri ayırt etmek için torasik boynuzun varlığı, boyutu, şekli ve rengindeki farklılıkları kullanır.

Karına göre sınıflandırıyorsanız, morfis ayrımı için karın segmentlerinin ve anal lobun dikenlerini, kıllarını ve mahmuzlarını kullanın. Sıralamadan sonra, her bir morf akson için çok kuyulu bir plakanın bir kuyusunu %95 etanol ile doldurun ve yeterli kurumaya izin vermek için her bir morfo taksonunun birden fazla temsilini en az 10 dakika boyunca plakanın ayrı oyuklarına yerleştirin. Daha sonra numuneler kururken, insan ekzusunu monte etmek için slaytları uygun saha toplama ve tanımlama bilgileriyle etiketleyin.

Slaytın bir şablonunu mikroskop aşamasına bantlayın ve bu şablonun üzerine bir slayt yerleştirin. Ardından, bir kapak kaymasının boyutuna yaklaşacak şekilde slaytın üzerine bir damla URL sürün ve fazla etanolü çıkarmak için ilk morf aksondan bir temsilciyi bir laboratuvar mendiline hafifçe vurmak için forseps kullanın. Şimdi numuneyi URL'ye gömün ve sepha thax'ı karından ayırmak için omurga uçlu forseps ve bir diseksiyon probu kullanın.

Bu prosedürün en zor yönü, kızak montajı sırasında sefalon thax'ı karından çıkarmak için gerekli el becerisini geliştirmektir. Diseksiyon başarısını sağlamak için, exe'yi sefalik thax ve ilk abdominal segment arasında ayırmak için ince uçlu forseps veya diseksiyon probları kullanın. Gösterildiği gibi, sefalik thax'ı esal sütür boyunca bölün.

Daha sonra sefalik tax'ı, dikiş kenarları zıt taraflarda olacak şekilde açın ve ventral taraf aralık kalacak şekilde yönlendirin. Karın sırt tarafını yukarı kaldırın ve sepha thax'ın hemen altına yerleştirin. Ardından, bir kapak kızağını bir inç ile belirli bir açıyla tutarak sürgüye dokunun, hava kabarcığı oluşumunu azaltmak için kapağı yavaşça indirin ve bırakın.

Son olarak, numuneyi düzleştirmek için kapak kızağına hafifçe bastırın ve slayta monte edilen numunenin cinsini belirlemek için bir bileşik mikroskop kullanın Bu grafiklerde, her bir göldeki genel tür sayısını belirlemek için Minnesota'daki 16 kentsel gölden toplanan öğrenci ex örnekleri için taksonomik birikim eğrileri gösterilmektedir. Her veri hattı göllerden birini temsil eder ve her veri noktası, Nisan-Ekim 2005 tarihleri arasında toplanan aylık bir örneği temsil eder, bu da göl başına dört örneğin elde edilmesinin Chiron topluluğunun çoğunluğunu geri kazandığını ve göllerdeki önemli mevsimsel değişiklikleri tespit ettiğini gösterir. Göl derinliği ve fosfor konsantrasyonu gibi çevresel değişkenlerdeki değişiklikler, göl kimyalarının bir gradyanı boyunca tespit edilen kümülatif türleri etkileyebileceğinden, kironların uzun vadeli izleme çalışmaları Minnesota'daki göllerdeki iklim değişikliğini değerlendirmek için kullanılabilir.

Gerçekten de, bu grafiğin gösterdiği gibi, ortalama fosfor konsantrasyonunun ortalama derinliğe oranı arttıkça karşılaşılan kümülatif tür sayısı artar. Başarılı bir öğrenci eksüda koleksiyonu için en kritik adım, çalışma alanı içinde yüksek eksüda birikimi olan alanları bulmaktır. Laboratuvarda numunelere başlarken, bazı numuneler hafif pigmentli olabileceğinden ve tabağın boyutuna yapışabileceğinden, Petri kabının içeriğini yavaşça taramak önemlidir.

Bu videoyu izledikten sonra, su kalitesini izlemeyi ve değerlendirmeyi amaçlayan projeler için omie yüzey yüzen öğrenci ex örneklerinin nasıl toplanacağını ve işleneceğini iyi anlamış olmalısınız.