1. scruffing
ratones están sujetos más a menudo posible usando la técnica de scruffing, pero ratas jóvenes también pueden ser restringidas con este método. Ratas adultas son más difíciles de refrenar con esta técnica debido a un cuello más musculoso, una cantidad reducida de piel suelta y una aversión a este método.
figura 1: método de sujeción con una mano y dos manos para ratones
2. guantes
hay una gran variedad de guantes disponibles para los controladores usar para protección contra mordeduras de rata. Son generalmente inadecuados para el trabajo con ratones debido a la pérdida de destreza. A menudo, las desventajas de muchos tipos de guante compensan las ventajas.
Guantes de trabajo3. Sujeción del cuerpo
figura 2: T-rex grip y miembro anterior atraviesan método para refrenar las ratas
4. Dispositivos de retención
figura 3: dispositivo de restricción de Broome-estilo
figura 4: limitador de roedor base plana
figura 5: dispositivo de sujeción del tubo
figura 6: limitador Flexible
5. Métodos de sujeción para los procedimientos técnicos específicos
Fuente: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Universidad de Notre Dame, en
se ha demostrado que incluso un mínimo manejo de ratones y ratas es estresante para los animales. Manejo de cambio de jaula y otros procedimientos no invasivos provoca un aumento en la frecuencia cardíaca, presión arterial y otros parámetros fisiológicos, tales como los niveles de corticosterona sérica. Las fluctuaciones pueden continuar para hasta varias horas. Los métodos de contención necesaria para las inyecciones y retiros de la sangre también causa cambios fisiológicos que pueden afectar los datos científicos. Capacitación en el manejo adecuado de los ratones y ratas es necesaria para reducir al mínimo los efectos de los animales. 1 ratones y ratas pueden ser sujetadas manualmente con dispositivos de retención, o con agentes químicos. Métodos manuales y el uso de dispositivos de retención están cubiertos en este manuscrito. Todos los métodos de retención incluyen el proceso de levantar los animales desde su jaula casa.
1. scruffing
ratones están sujetos más a menudo posible usando la técnica de scruffing, pero ratas jóvenes también pueden ser restringidas con este método. Ratas adultas son más difíciles de refrenar con esta técnica debido a un cuello más musculoso, una cantidad reducida de piel suelta y una aversión a este método.
figura 1: método de sujeción con una mano y dos manos para ratones
2. guantes
hay una gran variedad de guantes disponibles para los controladores usar para protección contra mordeduras de rata. Son generalmente inadecuados para el trabajo con ratones debido a la pérdida de destreza. A menudo, las desventajas de muchos tipos de guante compensan las ventajas.
Guantes de trabajo3. Sujeción del cuerpo
figura 2: T-rex grip y miembro anterior atraviesan método para refrenar las ratas
4. Dispositivos de retención
figura 3: dispositivo de restricción de Broome-estilo
figura 4: limitador de roedor base plana
figura 5: dispositivo de sujeción del tubo
figura 6: limitador Flexible
5. Métodos de sujeción para los procedimientos técnicos específicos
Los roedores son organismos modelo ampliamente utilizados para investigar diversas cuestiones científicas, y se ha demostrado que incluso una manipulación mínima es estresante para estos animales.
La manipulación de tareas simples como el cambio de jaula puede causar un aumento en la frecuencia cardíaca, la presión arterial y los niveles séricos de corticosterona, y estas fluctuaciones pueden continuar durante varias horas. Los métodos de sujeción necesarios para los procedimientos comunes de inyección y extracción de sangre también pueden causar cambios fisiológicos, que pueden afectar potencialmente a los datos científicos. Por lo tanto, se requiere entrenamiento para el manejo adecuado de ratones y ratas para minimizar estos efectos en los animales.
En este video, primero revisaremos las técnicas básicas para manejar roedores, y luego discutiremos los procedimientos de restricción de roedores, incluidas las técnicas manuales y los métodos que involucran el uso de dispositivos de restricción.
Comencemos discutiendo los conceptos básicos del manejo de roedores. Uno de los métodos más comunes para mover a un ratón o rata adulta es levantar al animal por la cola. Al hacer esto, es imperativo que la cola se agarre en la base cerca de la grupa. Si el animal se levanta por el extremo de la cola, la piel puede arrancarse debido al peso corporal y puede provocar una lesión que provoque la amputación de la cola. Es importante destacar que el traslado de un animal de un lugar a otro debe hacerse de forma rápida y constante. Suspender al animal en el aire durante cualquier período de tiempo no solo causará angustia, sino que también hará que el animal se tuerza o forcejee, lo que posiblemente cause daño a la cola. Además, el guía no debe colocar una mano debajo del animal, porque puede tratar de agarrarlo por seguridad, lo que resulta en una mordedura.
Otro método para manipular roedores adultos es usar fórceps. Los tipos de pinzas que se usan comúnmente son las pinzas de vendaje largo o las pinzas de lengua con tubos de goma, plástico o silicona colocados sobre los extremos para proporcionar una almohadilla. Las pinzas pueden agarrar al ratón por el pescuezo o por la base de la cola. El uso de pinzas minimiza la contaminación cruzada de un animal a otro, y es más rápido y menos costoso que cambiar los guantes entre cada jaula de animal. Los principiantes deberán recibir capacitación sobre la fuerza con la que deben agarrar a los ratones con fórceps, especialmente en el pescuezo, ya que podría interferir con la respiración. Al usar las pinzas en la cola, se debe tener cuidado de colocar las pinzas cerca de la base de la cola para evitar lesiones. Recuerde almacenarlos boca abajo en etanol al 70% entre manipulaciones de diferentes grupos de animales.
Además, se pueden utilizar tubos hechos de un material no poroso para transferir animales. Estos tubos se pueden agregar a una jaula como un lugar para que el animal se refugie o busque un refugio seguro. La mayoría de los ratones o ratas entrarían voluntariamente en los tubos cuando se les abre la jaula, o pueden ser guiados fácilmente hacia el tubo. Cuando el animal esté adentro, cubra los extremos abiertos con la palma de la mano y los dedos. A continuación, para animar al animal a irse, incline suavemente el tubo hacia arriba en la nueva jaula. Los animales se condicionan fácilmente a este método de cambio de jaula, lo que hace que este sea un proceso rápido y fácil para mover animales de un lugar a otro.
Algunas instituciones prefieren que los animales, especialmente las ratas, sean levantados por su cuerpo, incluso mientras se manipulan de rutina. Las ratas adultas se agarran suavemente alrededor del tórax, se levantan y se colocan rápidamente en otra jaula. Es importante que los animales se habitúen a este método de manejo desde una edad temprana. Cuando se trabaja con ratas jóvenes, colocar una mano sobre el lomo de la rata hará que salte a la palma de la mano del cuidador, lo que permitirá que la agarre. Es posible que se necesite una segunda mano para evitar que la rata se retuerza por el agarre.
Al cambiar de jaula con ratones o ratas recién nacidos, a menudo es necesario retirarlos manteniendo el nido intacto. Use las dos manos para sacar el nido y las crías del fondo de la jaula y colocarlas en una jaula nueva. Mantén los dedos juntos para evitar que se caigan los cachorros. Una vez que el nido se ha trasladado a una nueva jaula, es importante verificar que todos los cachorros estén presentes. Alternativamente, se puede usar una pala de plástico para mover a los roedores neonatos en sus nidos. Mientras hace esto, es importante que coloque su mano sobre la parte superior de la cuchara para evitar que los neonatos se muevan o salten. En comparación con el manejo individual de los cachorros, recoger todo el nido es menos angustioso tanto para los cachorros como para las madres.
Ahora que hemos discutido los conceptos básicos del manejo de roedores, profundicemos en los procedimientos detallados para la contención de roedores. Primero describiremos cómo sujetar a estos animales manualmente. Los ratones y las ratas jóvenes se pueden sujetar con la técnica de una mano o de las dos. Sin embargo, para las ratas adultas, las técnicas preferidas son la restricción de cuerpo completo con el agarre del T-rex o el método entrecruzado de las extremidades delanteras.
Comencemos por aprender el método de sujeción a dos manos. Primero, coloque al animal sobre una superficie que pueda agarrar, como la tapa de la barra de alambre. Con la mano dominante, sujeta la cola en la base y tira suavemente del ratón hacia atrás. Esto hace que el animal se aferre a la superficie y permita que su cuerpo se estire. A continuación, sujete suavemente al roedor con el dedo índice y el pulgar no dominantes colocados en la base del cráneo, y agarre la piel suelta del cuello para levantar al animal. Usa los dedos restantes para estabilizar al animal con la espalda contra la base del pulgar. Puedes asegurar los cuartos traseros sujetando la cola con el dedo anular contra la palma de la mano.
Para el método de sujeción con una sola mano, vuelva a colocar al animal sobre una superficie a la que pueda agarrarse. Sostenga la cola entre el tercer y el cuarto dedo de su mano no dominante y aplique una suave tracción hacia atrás. Con el dedo índice y el pulgar de la misma mano, sujeta al roedor sobre los hombros. Deslice suavemente el pulgar y el índice hacia adelante y agarre la piel suelta en el cuello y levante al animal. Use su dedo medio para estabilizar al animal a lo largo de la espalda sujetando la piel dorsal contra la base del pulgar.
El tercer método de restricción que discutiremos es el agarre del T-rex, un método de restricción con dos manos para ratas. Primero, coloca a la rata sobre una superficie sólida, como una estera, a la que pueda agarrarse. Mientras sostienes la base de la cola con una mano, coloca la otra mano sobre el hombro de la rata con los dedos índice y medio divididos a ambos lados. Esto es para restringir el movimiento de la cabeza de lado a lado. Una vez que la cabeza esté estabilizada, rodea el cuerpo detrás de las patas delanteras con los dedos medio y anular y el pulgar. Evite comprimir el pecho para que no comprometa la respiración del animal. Finalmente, estabilice la cola y los cuartos traseros agarrando la base de la cola SIN sujetar las patas traseras, si planea administrar un sonda nasogástrica oral; o CON agarre de las patas traseras, si la intención es inyectar al animal.
Por último, para sujetar a una rata usando el método de entrecruzamiento de las extremidades delanteras, coloque al animal sobre una superficie que pueda agarrar. Luego, con tu mano dominante, sujeta la cola en la base y aplica una suave tracción hacia atrás para que el cuerpo del animal se alargue. A continuación, con la otra mano, agarre al animal directamente detrás de los hombros, con los dedos de un lado y el pulgar del otro lado del pecho, y deslice la mano hacia adelante. Este movimiento obligará a las patas delanteras del animal a cruzar por debajo de su barbilla, creando una barrera física que impide que el animal mueva la cabeza hacia abajo. Tenga cuidado de evitar comprimir el pecho, lo que provocará dificultad para respirar.
Ahora que hemos revisado las técnicas de sujeción manual, aprendamos cómo sujetar a los roedores utilizando dispositivos especializados.
El primer dispositivo que aprenderemos es el dispositivo de restricción estilo Broome. Tiene una ranura que recorre toda la longitud del dispositivo y una pieza nasal de plástico, que se inserta para mantener al animal en su lugar. Comience aflojando el tornillo para quitar la pieza nasal. Luego, oriente el tubo de sujeción de manera que la ranura quede hacia arriba. Agarre al animal por la base de la cola y tire suavemente del animal hacia el dispositivo de sujeción, con los cuartos traseros primero. Una vez que el animal esté dentro, deslice la pieza nasal de plástico nuevamente en el tubo para evitar que se abra. Coloque la pieza nasal de tal manera que la nariz del animal quede centrada en la abertura. No lo coloque tan apretado que el animal no pueda respirar.
Otro ejemplo de dispositivo de sujeción es el retenedor de roedores de fondo plano, que es un medio cilindro con aberturas que permiten el acceso desde la parte superior e inferior del dispositivo. También tiene ranuras en las que se puede insertar una puerta de plástico rígido para mantener al animal en su lugar. Para usar este sujetador, agarre al roedor por la base de la cola con su mano dominante y colóquelo sobre una superficie lisa. Con la otra mano, sostenga el tubo de sujeción de fondo plano de modo que el extremo abierto quede en la cabeza del animal a una velocidad de 45? ángulo con respecto a la superficie. Coloque el tubo sobre la cabeza del animal e inmediatamente golpee la grupa para evitar que el animal retroceda. Una vez que esté en el dispositivo, deslice la puerta de plástico en la ranura adecuada para asegurar la posición del animal.
El tercer tipo de dispositivo del que hablaremos son las sujeciones de tubos. Estos son cilindros de plexiglás con un extremo cerrado que contiene orificios para la circulación del aire y una ranura en el extremo abierto. Para usar un tubo de sujeción, agarre al animal y colóquelo sobre una superficie lisa. A continuación, coloque el extremo abierto del tubo en la cabeza del animal a una velocidad de 45? ángulo. Tan pronto como el roedor entre en el tubo, golpee la grupa para evitar que retroceda. Finalmente, ocluya la abertura rellenando un guante de látex grande, que agarrará la superficie de plexiglás y evitará que el animal salga del tubo.
Por último, discutiremos cómo usar los restricdores flexibles, que son conos de plástico flexible desechables disponibles en diferentes tamaños. La selección de un cono depende del tamaño del animal. Idealmente, debe ser lo suficientemente largo como para extenderse de 2 a 3 pulgadas más allá de la grupa del animal. Al igual que los métodos anteriores, coloque al animal sobre una superficie lisa y coloque el cono de sujeción a una temperatura de 45? ángulo sobre la cabeza del animal. Tan pronto como el animal entre en el cono, agarre el extremo abierto y séllelo para forzar al animal hacia el extremo. Asegure la abertura doblando el plástico hacia un lado de la cola y aplicando un clip de carpeta al plástico doblado, teniendo cuidado de evitar sujetar la cola o la piel.
Después de discutir los conceptos básicos del manejo y las diferentes técnicas de restricción, revisemos por qué es necesario comprender estos procedimientos para cualquier científico in vivo.
El conocimiento y la lógica detrás de estos procedimientos básicos de manejo son fundamentales para mantener la salud del animal. Desde el momento en que los animales nacen, se les manipula para actividades sencillas del día a día, como el pesaje, la inspección y el cambio de jaulas, que deben realizarse independientemente del objetivo científico.
Los procedimientos de restricción también son útiles para fines de marcado. Por ejemplo, para realizar procedimientos como el puñetazo en las orejas, es necesario sujetar al animal con el desaliñado. Por otro lado, se debe utilizar un dispositivo de sujeción al insertar un microchip en ratas para que puedan ser marcadas permanentemente.
Por último, los métodos de restricción manual se utilizan para procedimientos de inyección comunes como la administración subcutánea e intraperitoneal. Y el conocimiento de los dispositivos de sujeción es útil cuando se realiza una administración intravenosa, que exige un movimiento mínimo del animal durante la inyección.
Acabas de ver la introducción de JoVE a las técnicas básicas de manejo y sujeción para roedores. Estos procedimientos requieren un tacto seguro y firme, pero suave. Los acercamientos tentativos pueden resultar en mordeduras del manipulador, mientras que el manejo agresivo puede causar lesiones al roedor. Por lo tanto, es importante aprender estas técnicas a fondo y encontrar un equilibrio entre un agarre asertivo pero suave. Como siempre, ¡gracias por mirar!
rutina de procedimientos cambiantes y técnicos de la jaula es una causa de estrés para los animales de experimentación. Aunque este tipo de estrés no es una amenaza para el bienestar general del animal, puede causar fluctuaciones en los parámetros fisiológicos que pueden tener un efecto adverso sobre los datos de la investigación. El uso de personal especializado, técnicas adecuadas y equipo puede mitigar algunos de lo estrés.
Chapters in this video
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Overview
1:13
Basics of Rodent Handling
5:09
Manual Restraining Methods
8:37
Rodent Restraint Devices
11:55
Applications
13:02
Summary
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