La tinción inmunohistoquímica de B7-H1 (PD-L1) en Parafina embebido en diapositivas de tejido pancreático Adenocarcinoma

Elaine Bigelow; Katherine M. Bever; Haiying Xu; Allison Yager; Annie Wu; Janis Taube; Lieping Chen; Elizabeth M. Jaffee; Robert A. Anders; Lei Zheng

doi:10.3791/4059

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La tinción inmunohistoquímica de B7-H1 (PD-L1) en Parafina embebido en diapositivas de tejido pancreático Adenocarcinoma

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DOI:

10.3791/4059

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3 de enero de 2013

Elaine Bigelow¹^,² , Katherine M. Bever¹^,² , Haiying Xu¹^,²^,³ , Allison Yager¹ , Annie Wu¹^,²^,⁴ , Janis Taube³^,⁵ , Lieping Chen⁶ , Elizabeth M. Jaffee¹^,²^,⁵^,⁷^,⁸ , Robert A. Anders¹^,²^,⁵^,⁸ , Lei Zheng¹^,²^,⁴^,⁵^,⁷

¹The Sidney Kimmel Comprehensive Cancer Center, The Johns Hopkins University School of Medicine, ²Department of Oncology, The Johns Hopkins University School of Medicine, ³Department of Dermatology, The Johns Hopkins University School of Medicine, ⁴Department of Surgery, Johns Hopkins University School of Medicine, ⁵The Sol Goldman Pancreatic Cancer Center, The Johns Hopkins University School of Medicine, ⁶Yale Cancer Center, Yale School of Medicine, ⁷The Skip Viragh Center for Pancreatic Cancer, The Johns Hopkins University School of Medicine, ⁸Department of Pathology, The Johns Hopkins University School of Medicine

En este artículo

Resumen

B7-H1 (PD-L1) y su unión a PD-1 proporcionan una importante inducida por tumor señal inmunosupresora en el microentorno del tumor. Una técnica de tinción inmunohistoquímica para caracterizar la expresión y localización de B7-H1 en el adenocarcinoma pancreático se describe aquí.

Resumen

B7-H1/PD-L1, un miembro de la familia B7 de inmuno-reguladoras proteínas de la superficie celular, juega un papel importante en la regulación negativa de respuestas mediadas por células inmunes a través de su interacción con su receptor, muerte programada-1 (PD -1) ^1,2. La sobreexpresión de B7-H1 por células tumorales se ha observado en un número de cánceres humanos, incluyendo melanoma, glioblastoma, y los carcinomas de pulmón, mama, colon, ovario y células renales, y se ha demostrado que es perjudicial anti-tumorales T- inmunidad de células ^3-8.

Recientemente, B7-H1 expresión por los tejidos de adenocarcinoma pancreático se ha identificado como un marcador pronóstico potencial ^9,10. Además, el bloqueo de B7-H1 en un modelo de ratón de cáncer de páncreas se ha demostrado que producen una respuesta anti-tumoral ^11. Estos datos sugieren la importancia de B7-H1 como una diana terapéutica potencial. Anti-B7-H1 anticuerpos de bloqueo, por lo tanto están probando en ensayos clínicos para mulples tumores humanos sólidos, incluyendo el melanoma y los cánceres de pulmón, colon, riñón, estómago y páncreas ^12.

Con el fin de ser finalmente capaz de identificar a los pacientes que se beneficiarán de B7-H1 focalización terapias, es crítico para investigar la correlación entre la expresión y localización de B7-H1 y la respuesta del paciente al tratamiento con anticuerpos de bloqueo B7-H1. Examinar la expresión de B7-H1 en tejidos pancreáticos humanos adenocarcinoma mediante inmunohistoquímica dará una mejor comprensión de cómo esta molécula de señalización co-inhibidora contribuye a la supresión de la inmunidad antitumoral en el microentorno del tumor. El anticuerpo anti-B7-H1 monoclonal (clon 5H1) desarrollado por Chen y colaboradores se ha demostrado que produce resultados fiables de tinción en secciones criogénicas de múltiples tipos de tejidos neoplásicos humanos ^4,8, pero la tinción de portaobjetos incluidos en parafina había sido un reto hasta recientemente ^13-18. Tenemos devse fugó el B7-H1 tinción protocolo para las diapositivas incrustadas en parafina de los tejidos adenocarcinoma de páncreas. El protocolo de tinción B7-H1 descrito aquí produce tinción consistente membranosa y citoplásmica de B7-H1 con antecedentes.