Artículo de método
El íleo postoperatorio (POI) es una complicación de la cirugía abdominal que lleva a una mayor morbilidad y una estancia hospitalaria prolongada. Como las estrategias profilácticas o terapéuticas faltan intensificación de la investigación es necesaria. Por lo tanto, se estableció un modelo de ratón estandarizado y factible para investigar la fisiopatología de la PDI y estudiar posibles opciones terapéuticas.
Inflamación del tracto gastrointestinal es una razón común para una variedad de enfermedades humanas. Los modelos animales de investigación son fundamentales en la investigación del complejo celular y molecular de la patología intestinal. Aunque la túnica mucosa es a menudo el órgano de interés en muchas enfermedades inflamatorias, las obras recientes demostraron que la muscular externa (ME) es también un órgano altamente inmunocompetente que alberga una densa red de inmunocitos residentes. 1,2 Estos trabajos se realizaron dentro de la estandarizado modelo de manipulación intestinal (MI) que conduce a la inflamación de la pared del intestino, principalmente limitada a la ME. Clínicamente esta inflamación conduce a la alteración de la motilidad intestinal prolongado, conocido como el íleo postoperatorio (POI), que es una complicación frecuente e inevitable después de la cirugía abdominal. 3 La inflamación se caracteriza por la liberación de mediadores proinflamatorios tales como IL-6 4 o neurotransmisores IL-1β o inhibidora como Nitric óxido (NO). 5 Posteriormente, un tremendo número de inmunocitos extravasarse en el ME, dominado por los neutrófilos polimorfonucleares (PMN) y monocitos y finalmente mantener POI. Lasting para 2 días, esta parálisis intestinal conduce a un aumento del riesgo de aspiración, la translocación bacteriana y complicaciones infecciosas hasta sepsis y fallo de órganos múltiples y causa una alta carga económica. 6
En este manuscrito se demuestra el modelo normalizado de mensajería instantánea y evaluación in vivo de tránsito gastrointestinal (GIT) y el tránsito colónico. Además se demuestra un método para la separación de la EM a partir de la túnica mucosa seguido de análisis inmunológico, que es crucial para distinguir entre las respuestas inflamatorias en estos compartimentos de pared ambos altamente inmunoactivos intestinales. Todos los análisis son fácilmente transferibles a los otros modelos de investigación, que afecta la función gastrointestinal.
1. Animales
Hombre C57BL6 / J ratones con un peso medio de 25 g se obtuvieron de Harlan Winkelmann (Borchen, Alemania). Todos los experimentos se realizaron de acuerdo con la ley federal acerca de la protección de los animales. Los principios del cuidado de los animales de laboratorio fueron seguidos. Los animales se mantuvieron en una luz de 12-hr / oscuridad ciclo y provisto de roedor comercialmente disponible chow y agua del grifo ad libitum. Animales deben ser alojados por lo menos 7 días después de la llegada en su instalación de animales antes de los experimentos. Tenga en cuenta que todos los experimentos se puede adapta....
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Un estudio comparativo de análisis de los diferentes niveles de IM (eventración intestino delgado durante 10 min versus suavemente inspección del intestino delgado usando dos aplicadores de algodón versus IM con la evacuación del contenido del intestino delgado en el ciego) reveló una correlación entre la magnitud de la manipulación quirúrgica y PDI. En comparación con los otros grupos IM mostraron la mayor cantidad de leucocitos en el ME (PNMS, macrófagos y mastocitos) que resulta en POI prolongada y severa. 8.
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
No hay conflictos de interés declarado.
Este trabajo fue apoyado por becas de la Deutsche Forschungsgemeinschaft (KA1270/3-1/2) y BONFOR (O-112.0040).
....Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Nombre del reactivo / Equipo | Empresa | Número de catálogo | |
| Ethilon 5/0 | Ethicon | 1666H | |
| Aplicadores de algodón | MaiMed | 71010 | |
| catéter arterial | Vygon | 115-798 | |
| Placa de 96 pocillos (negro) | Greiner Bio One | 655096 | |
| bola de cristal (2 mm de diámetro) | Worf | disponible a petición | |
| Los alfileres entomológicos | Herramientas Artes Ciencias | 26000-25 | |
| Hanker Yates Reactivo | Polyscience | 560694 | |
| Aquatek | Merck | HC109850 | |
| DMEM | Lonza | BE12-604 F | |
| FITC-dextrano (PM 70000) | Sigma Aldrich | 46945-500MG-F |
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Solicitar permiso para reutilizar el texto o las figuras de este artículo de JoVE
Solicitar permiso