El objetivo de este protocolo es aplicar imágenes de resonancia magnética mejorada con contraste dinámico (DCE-MRI) para xenoinjertos ortotópicos de tumores pancreáticos en ratones. La DCE-MRI es un método no invasivo para analizar la microvasculatura en un tejido diana, y útil para evaluar la respuesta vascular en un tumor después de una terapia novedosa.
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Artículo de método
Dynamic Contrast mejorada de imagen de resonancia magnética de un modelo ortotópico de cáncer pancreático del ratón
En este artículo
Resumen
Resumen
La resonancia magnética mejorada con contraste dinámico (DCE-MRI) se ha utilizado de manera limitada para xenoinjertos de tumores pancreáticos ortotópicos debido a un artefacto de movimiento respiratorio severo en el área abdominal. Los modelos tumorales ortotópicos ofrecen ventajas sobre los subcutáneos, ya que pueden reflejar el microambiente del tumor primario que afecta el suministro de sangre, la neovascularización y la invasión de células tumorales. Recientemente hemos establecido un protocolo de DCE-MRI de xenoinjertos ortotópicos de tumores pancreáticos en modelos de ratón mediante la fijación de tumores con una placa de plástico doblada ortogonalmente para evitar la transferencia de movimiento desde la región torácica durante la toma de imágenes. La presión ejercida por esta tabla se localizó en la zona abdominal, y no ha resultado en dificultad respiratoria de los animales. Este artículo demuestra el procedimiento detallado del modelado ortotópico de tumores pancreáticos utilizando animales pequeños y DCE-MRI de los xenoinjertos tumorales. También se introduce el método de cuantificación de parámetros farmacocinéticos en DCE-MRI. El procedimiento descrito en este artículo ayudará a los investigadores a aplicar DCE-MRI para modelos de ratones de cáncer gastrointestinal ortotópico.
Introducción
El objetivo general de este método consiste en aplicar un mayor contraste de imagen dinámica de resonancia magnética (RM-RT) para xenoinjertos de tumores pancreáticos ortotópico en ratones. DCE-MRI es un método no invasivo para evaluar la microvasculatura en un tejido diana mediante la supervisión del cambio de contraste MR durante un cierto período de tiempo después de la inyección. DCE-MRI se ha utilizado para diagnosticar los tumores malignos y para evaluar la respuesta del tumor a diversas terapias 1-4. Cuantitativa DCE-MRI ha presentado una alta reproducibilidad 5. Para cuantificar los parámetros farmacocinéticos de un agente de contraste M....
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Protocolo
Todos los procedimientos fueron aprobados por el Comité de Cuidado y Uso de Animales Institucional de la Universidad de Alabama en Birmingham.
Modelado 1. ortotópico tumor pancreático Ratón
- Cultura líneas estándar de células de páncreas-cáncer humano en medio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) suplementado con suero bovino fetal al 10%. Mantener todas las culturas a 37 ° C en atmósfera húmeda con 5% de CO 2.
- Utilice 8-10 ratones graves femeninos semanas de edad combinados inmunodeficientes. Coloque jaulas de los animales a las 12 hr luz y oscuridad ciclo de 12 horas a RT (21 ± 2 ° C) y 60% de humedad. ....
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Resultados
Células tumorales pancreáticas humanas crecen con éxito en páncreas de ratón creando un tumor sólido. La figura 1 muestra fotografías de (A) un páncreas normal donde se inyecta solución de células de tumor, y (B) un ratón representativo que lleva un xenoinjerto de tumor de páncreas ortotópico (MIA PaCa-2 ). Tumor está localizado en el cuadrante superior izquierdo del abdomen, al lado del bazo. Por lo general toma 2-4 semanas para que los tumores crezcan hasta 5-7 mm de diámetro después de la implantació.......
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Discusión
Hemos introducido los métodos detallados de modelado tumor pancreático ortotópico utilizando ratones inmunodeficientes, DCE-MRI de los tumores abdominales en ratones, y la cuantificación de sus parámetros cinéticos. En el modelado tumor pancreático ortotópico, se debe tener cuidado cuando se inserta una aguja en la cola del páncreas. Si tiene éxito, las células se transfieren a la cabeza de páncreas creando una pequeña ampolla. Cuando se aplica una tabla de plástico ortogonalmente doblada, es fundamental para confirmar .......
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Divulgaciones
Los autores no tienen ningún conflicto de intereses que declarar.
Agradecimientos
Los autores agradecen a Jeffrey Sellers por ayudar en el modelado ortotópico de cáncer de páncreas en ratones. Este trabajo ha contado con el apoyo de las Becas Piloto de Iniciativa de Investigación del Departamento de Radiología de la UAB y las subvenciones 2P30CA013148 y P50CA101955 de los NIH.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| DMEM | Invitrogen | 11965-118 | |
| Suero fetal bovino | Harlan Laboratories | BT-9501 | |
| Betadine | Productos de Purdue | 67618-153-01 | |
| 5-0 Suturas de Prolene | Ethicon | 8720H | |
| 9.4T Escáner de resonancia magnética | Bruker Biospin Corporation | BioSpec 94/20 USR | |
| Gadoteridol | Bracco Diagnostics Inc | NDC 0270-1111-03 | |
| Tubo de micropolietileno | Strategic Applications, Inc | #PE-10-25 | |
| Aguja de punta roma de 30 G | Strategic Applications, Inc | 89134-194 | |
| Sistema de monitoreo y compuerta | SA instruments, Inc | Modelo 1030 | Este es un sistema compatible con RM para medir la clasificación de resitorio y la temperatura corporal de animales pequeños al mismo tiempo. |
| Bomba de jeringa | New Era Pump Systems, Inc. | NE-1600 |
Referencias
- Ergul, N., et al. Assessment of multifocality and axillary nodal involvement in early-stage breast cancer patients using 18F-FDG PET/CT compared to contrast-enhanced and diffusion-weighted magnetic resonance imaging and sentinel node biopsy. Acta Radiol. , (2014).
- Park, J. J., et al.
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Reimpresiones y permisos
