Esta técnica permite la preparación rápida y sencilla de la sección de resina de tamaño de semilla entera para la observación y análisis de células, gránulos de almidón y cuerpos proteicos en diferentes regiones de la semilla.
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Artículo de método
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Esta técnica permite la preparación rápida y sencilla de la sección de resina de tamaño de semilla entera para la observación y análisis de células, gránulos de almidón y cuerpos proteicos en diferentes regiones de la semilla.
La morfología, el tamaño y la cantidad de células, gránulos de almidón y cuerpos proteicos en semillas determinan el peso y la calidad de las semillas. Son significativamente diferentes entre las diferentes regiones de semillas. Con el fin de ver claramente las morfologías de las células, gránulos de almidón y cuerpos proteicos, y analizar cuantitativamente sus parámetros morfológicos con precisión, se necesita la sección de tamaño de semilla completa. Aunque la sección de parafina de tamaño de semilla entera puede investigar la acumulación de materiales de almacenamiento en semillas, es muy difícil analizar cuantitativamente los parámetros morfológicos de las células y materiales de almacenamiento debido a la baja resolución de la sección gruesa. La sección de resina delgada tiene alta resolución, pero el método de seccionamiento rutinario de resina no es adecuado para preparar la sección de tamaño de semilla entera de semillas maduras con un gran volumen y alto contenido de almidón. En este estudio, presentamos un método de seccionamiento seco simple para preparar la sección de resina de tamaño de semilla completa. La técnica puede preparar las secciones transversales y longitudinales de tamaño integral de semillas en desarrollo, maduras, germinadas y cocidas incrustadas en resina LR White, incluso para semillas grandes con alto contenido de almidón. La sección de tamaño de semilla entera se puede teñir con brillo fluorescente 28, yodo y Coomassie azul brillante R250 para exhibir específicamente la morfología de células, gránulos de almidón y cuerpos proteicos claramente, respectivamente. La imagen obtenida también se puede analizar cuantitativamente para mostrar los parámetros morfológicos de las células, gránulos de almidón y cuerpos proteicos en diferentes regiones de semillas.
Las semillas vegetales contienen materiales de almacenamiento como almidón y proteínas y proporcionan energía y nutrición a las personas. La forma, el tamaño y la cantidad de los materiales celulares y de almacenamiento determinan el peso y la calidad de las semillas. Las células y materiales de almacenamiento en diferentes regiones de semillas tienen morfologías significativamente diferentes, especialmente para algunos cultivos de cereales de alta amilasa con inhibición de la enzima ramificada de almidón IIb1,2,3. Por lo tanto, es muy importante investigar las morfologías de....
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1. Preparación de semillas incrustadas en resina (Figura 1)
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Método de seccionamiento en seco simple para obtener una sección de tamaño de semilla completa
Establecemos un método de seccionamiento seco simple para preparar una sección de semillas de tamaño de semilla entera incrustada en resina LR-blanca (Figura 1). El método puede preparar secciones transversales y longitudinales de tamaño de semilla entera con espesor de 2 m(Figura 2-5, Figura Complementaria 1-4<.......
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Las semillas son el recurso renovable más importante para alimentos, forraje y materia prima industrial, y son ricas en materiales de almacenamiento como el almidón y las proteínas. La morfología y cantidad de células y el contenido y configuración de los materiales de almacenamiento afectan al peso y la calidad de las semillas7,12. Aunque la estareología y la tecnología de análisis de imágenes pueden medir el tamaño y la cantidad de células en una región de teji.......
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Los autores no tienen nada que revelar.
La financiación fue proporcionada por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (32071927), el Proyecto de Talento de la Universidad de Yangzhou y el Desarrollo del Programa Académico Prioritario de las Instituciones de Educación Superior de Jiangsu.
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| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Ácido acético | Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd. | ||
| Tarro de vidrio compacto (5 plazas) | Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd. | ||
| Coomassie azul brillante R-250 | Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd. | ||
| Cubreobjetos | Sangon Biotech (Shanghái) Co., Ltd. | ||
| Cuchilla de doble cara | Gillette Shanghai Co., Ltd. | 74-S | |
| Absoluto de etanol | Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd. | ||
| Mesa de aplanamiento | Leica | HI1220 | |
| Microscopio de fluorescencia | Olympus | BX60 | |
| Abrillantador fluorescente 28 | Sigma-Aldrich | 910090 | |
| Tiras de vidrio | Leica | 840031 | |
| Solución de glutaraldehído al 50% en agua | Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd. | ||
| Glycerol | Sangon Biotech (Shanghái) Co., Ltd. | ||
| Yodo | Sangon Biotech (Shanghái) Co., Ltd. | ||
| Isopropanol | Sangon Biotech (Shanghái) Co., Ltd. | ||
| Microscopio | Olympus | BX53 | |
| LR Resina blanca | Agar Scientific | AGR1281A | |
| Oven | Shanghai Jing Hong Laboratory Instrument Co., Ltd. | 9023A | |
| Yoduro de potasio | Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd. | ||
| Slide | Sangon Biotech (Shanghái) Co., Ltd. | ||
| Pinzas | F518101 Sangon Biotech (Shanghái) Co., Ltd. | ||
| Fosfato de sodio dibásico dodecahidrato | Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd. | ||
| Fosfato de sodio monobásico dihidratado | Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd. | ||
| Ultramicrótomo | Leica | EM UC7 |
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