Drosophila Cuantificación de la unión neuromuscular (NMJ): un método para evaluar la morfología y la función sináptica

- En primer lugar, inmunotinción de larvas de Drosophila con marcadores que resaltan diferentes aspectos de las NMJs o uniones neuromusculares. Esta es la región donde la terminación del axón de una neurona motora entra en contacto con un músculo, y su morfología se utiliza como lectura de la función sináptica.

El axón termina en varias ramas que forman protuberancias llamadas botones. Los neurotransmisores se liberan de los botones y causan la contracción muscular. Las áreas de liberación de neurotransmisores se denominan zonas activas. En este caso, un marcador es específico para una proteína sináptica que delinea la NMJ, y el otro marcador es para una proteína presente en zonas activas.

A continuación, adquiera imágenes de NMJ mediante microscopía y evalúe cuantitativamente su morfología con un software de análisis de imágenes semiautomatizado. Aplique una serie preestablecida de comandos de software a las imágenes. Los archivos de salida contienen imágenes NMJ analizadas y resultados de morfología. Las características que se pueden medir incluyen el número y el área de superficie de los botones, la longitud y el número de ramificaciones de NMJ, el número de compartimentos NMJ n