Encyclopedia of Experiments: Biology
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-在含有M9缓冲器的管子里,在所需的发育阶段收集多达150种草本虫。用M9缓冲器清洗并离心样品,去除蠕虫中的细菌。
取出超细微镜时,在解剖显微镜下查看管子,以防止样品丢失。将蠕虫转移到M9缓冲器最小体积的玻璃盘中。在麻醉蠕虫时加入利瓦米索尔。
定位蠕虫和咽部的头部,或前体,其中包含两个灯泡形状的结构。用两根针穿过咽部后面的蠕虫。确保快速完成解剖,避免影响组织。
一旦基质层被打乱,由于蠕虫的内部压力,两个性腺手臂被挤压或推出身体。
在此示例中,我们将从成人蠕虫中解剖性腺,以进行免疫荧光分析。
- 在所需的发育阶段挑选100至150只蠕虫,并在含有100微升M9缓冲液的1.5毫升微中流管中收集它们。然后,在室温下再加900微升M9缓冲液,以1,000倍g的离心机将其取出1分钟。
在解剖显微镜下,轻轻取出900微升的M9缓冲器,然后再重复洗两次,去除大部分附着的细菌。
接下来,使用带加宽孔的 200 微滑微皮尖,将M9缓冲器中的蠕虫转移到平底玻璃表盘上。然后,在盘子中加入1至3微升的0.1摩尔利瓦米索尔,轻轻旋转。现在,将两根25口径的针头连接到两个注射器上,为每只手制作一个解剖工具。
在解剖显微镜下,将每根针放在每只蠕虫下面和上面,并用剪刀等动作对第二根咽泡附近的每只蠕虫进行细切。
-在五分钟内完成对菜中动物的解剖是非常重要的。
-万一挤出的性腺看不见,就跳过那只动物。这里可以看到适当的挤压性腺。