zPDX-Análisis de invasividad: investigación del comportamiento invasivo de células de cáncer metastásico en xenoinjertos de embriones de pez cebra

Los xenoinjertos de embriones de pez cebra son útiles para estudiar la invasión de células cancerosas. Preparar modelos de xenoinjertos inyectando células cancerosas metastásicas y células no cancerosas marcadas con fluorescencia en el espacio perivitelino de dos embriones transgénicos. El espacio perivitelino es un espacio entre la peridermis del embrión y el saco vitelino. Deje que los embriones crezcan durante el período deseado.

Durante este período, las células cancerosas metastásicas se dividen agresivamente en el lugar de la inyección, mientras que las células no cancerosas permanecen estables. Después de la incubación, use una pipeta pasteur para transferir los embriones a un plato de suspensión con fondo de vidrio. Retire el exceso de agua de huevo y coloque los embriones en la posición deseada para la toma de imágenes. Mantenga un cubreobjetos en la parte superior del plato y colóquelo bajo un microscopio de campo brillante.

Captura imágenes y analiza el comportamiento invasivo de ambos tipos de células. Las células cancerosas metastásicas tienden a invadir los vasos sanguíneos desde el lugar de la inyección. Se mueven a lo largo de la circulación y luego invaden el tejido circundante para proliferar. Por el contrario, las células no cancerosas permanecen en el lugar de la inyección. En el protocolo de ejemplo, inyectaremos células de cáncer de mama en el espacio perivitelino y el conducto de Cuvier en modelos de xenoinjerto de pez cebra para estudiar la metástasis.

Para visualizar la metástasis, con una pipeta pasteur, transfiera el embrión de pez cebra inyectado a una placa de poliestireno con fondo de vidrio y elimine el exceso de agua de huevo. Obtener imágenes de todo el cuerpo del embrión con un microscopio confocal ajustado a bajo aumento para obtener un patrón general de diseminación de células tumorales.

Utilice un láser de 488 nanómetros para visualizar la vasculatura del embrión de pez cebra y un láser de 543 nanómetros para visualizar las células tumorales implantadas marcadas con un marcador fluorescente rojo. A continuación, escanee el embrión en ocho a diez pasos para obtener una imagen de alta calidad.

• Zebrafish Embryo Xenografts - A research tool used to study cancer cell invasion.
• Perivitelline Space - A niche between the zebrafish embryo periderm and the yolk sac.
• Metastatic Cancer Cells - Malignant cells that can spread aggressively and invade lots areas .
• Non-cancerous Cells - Stable cells that do not invade or proliferate like cancer cells.
• Invasiveness - The capacity of cancer cells to infiltrate healthy tissues.

• Define the concept of Zebrafish Embryo Xenografts - These are used for studying cancer invasion (e.g., invasiveness).
• Outline the Perivitelline Space - It serves as the injection site for xenografts (e.g., perivitelline space zebrafish).
• Describe Metastatic Cancer Cells and their aggressive division and invasion traits.
• Connect to Experiment - The injected metastatic and non-cancerous cells in embryos facilitate the investigation of cellular behaviors.

• What is Zebrafish Embryo Xenografts and how it aids in studying cell invasiveness?
• What is the role of Perivitelline Space in these xenograft models?
• What difference in behavior can be expected between Metastatic Cancer Cells and Non-cancerous Cells?

• Practical Applications - Xenografts help in understanding cancer cell behaviors (e.g., invasiveness).
• Industry Impact - Such studies can guide developments in healthcare and cancer research.
• Societal Importance - Findings may result in better cancer treatments (e.g., combating malignancy).
• Scientific Advances -The methodology aids in real-time tracking of cell actions.