Microscopía estática de fuerza atómica para visualizar y caracterizar nucleosomas ensamblados
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 5:09 min. • July 8th, 2025
Los nucleosomas, la unidad básica de repetición de la cromatina eucariota, comprenden giros de ADN envueltos alrededor de un núcleo de proteínas histonas.
Para visualizar nucleosomas ensamblados mediante microscopía de fuerza atómica estática, AFM, comience con una tira delgada de mica, funcionalizada para hacer que la superficie esté cargada positivamente. Corta la tira en cuadrados pequeños. Pipetear una suspensión de nucleosomas ensamblada.
El ADN cargado negativamente en el nucleosoma se une al grupo cargado positivamente de la tira de mica funcionalizada a través de interacciones electrostáticas. Lavar con tampón para evitar el hacinamiento de nucleosomas.
Asegure la tira de mica en un disco de soporte de muestras. Móntelo en la platina del instrumento AFM.
Fije el soporte de la sonda al cabezal óptico del instrumento. El soporte contiene un voladizo AFM premontado con una punta en su vértice.
Alinee el rayo láser en la parte posterior del voladizo para una medición precisa de la deflexión. Coloque la punta en contacto directo con la superficie que contiene nucleosomas.
Durante las imágenes en modo de contacto, a medida que la punta en voladizo escanea la superficie del nucleo
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