February 23rd, 2012
מדידת לחץ חדר שמאל (LV) בעכברים עובריים בילוד מתואר. הלחץ נמדד על ידי החדרת מחט מחוברת מתמר מלא נוזלים לתוך LV בהנחיית אולטרסאונד. יש להקפיד לשמור על תפקוד הלב תקין במהלך פרוטוקול הניסוי.
המטרה הכוללת של הליך זה היא למדוד לחץ חדר שמאל או LV בעכברים עובריים מאוחרים ויילודים. ראשית, הציוד מוכן. מחט המחוברת למתמר לחץ חייבת להיות מיושרת עם בדיקת אולטרסאונד.
לאחר מכן מכינים עכבר ו-LV שלו מצולם על ידי אולטרסאונד. לאחר מכן המחט מתקדמת לתוך לומן ה-LV ונרשמות מדידות לחץ פועם. בסופו של דבר, התוצאות מראות לחצים סיסטוליים בעכברים עובריים מאוחרים ויילודים מוקדמים באמצעות צנתור מלא נוזל מונחה אולטרסאונד.
היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות כמו סרוו, ללא מדידות לחץ או צנתרים במצב מוצק, הוא שניתן למדוד לחץ בעכברים עובריים מאוחרים ויילודים בצורה חזקה וניתנת לחזרה. בדרך כלל, אנשים חדשים בטכניקה זו יתקשו מכיוון שזה מאתגר לשמור על כיוון העובר בשק העוברי כאשר העובר יסתובב. עם יישום בדיקת האולטרסאונד, בהתאם לשלב העכבר שיש ללמוד, בחר ומלא בדיקה במים מזוקקים.
הנח את הגשושית במעמד המתכוונן של מערכת האולטרסאונד. כוונן את המעמד כך שיספק תצוגת ציר ארוך LV של עכבר המותקן על הפלטפורמה כאשר קודקוד ה-LV מופנה לכיוון זרוע ההזרקה. מערכת הלחץ מורכבת ממגבר גשר מתמר לחץ מלא בנוזל, מערכת רכישת נתונים ותרשים מעבדה.
חבילת תוכנה, מזרק של 20 מיליליטר מלא במי מלח 10% הפריניזציה משמשת לשטיפת הצינור. ודא כי בועות לא נלכדות בצינור או מעל המתמר. הצינור למתמר מחובר באמצעות פקקי עצירה תלת-כיווניים, מנעולי פיתוי ודוקרני צינור.
כייל את מערכת מתמר הלחץ עם מד לחץ התקן את צינור המחט והמעטפת בזרוע ההזרקה. החלף את המונומטר במעטפת כדי להחזיק את הצינור לזרוע ההזרקה. המעטפת היא פשוט גוף מזרק שונה של שלושה מיליליטר.
מהדקים את מתמר הלחץ בטבעת. עמדו בגובה המשוער של פלטפורמת ההדמיה כדי למנוע סתימה. חבר את גודל המחט הגדול ביותר האפשרי לצינור המחט והזריק יותר מי מלח עד לכמה טיפות.
צא שוב מהמחט. ודא שלא נלכדו בועות בצינור או מעל המתמר. כעת, הניחו תלולית של ג'ל אולטרסאונד על פלטפורמת ההדמיה.
סובב את המחט מגוף המזרק של שלושה מיליליטר כך שהקצה המשופע של המחט פונה כלפי מעלה. לאחר מכן באמצעות המעמד המתכוונן, יישר בזהירות את הגשושית כך שניתן יהיה לקדם את המחט ישירות לתוך הג'ל. מתחת למרכז בדיקת ההדמיה, המחט חייבת להיות מספיק רחוקה מתחת לבדיקה כדי לא לנקב את מכסה הבדיקה, אלא קרובה מספיק כדי להיות בעומק המוקד של הבדיקה.
במידת הצורך, ניתן לכופף את המחט ביד כך שתישאר במישור הנכון לאורך כל נסיעתה. שמירה על יישור, משוך את המחט והרם את בדיקת ההדמיה כדי להניח עכבר על פלטפורמת ההדמיה. החלף את המחט לפני שתמשיך בהרדמת העכבר.
ניתן להחדיר אם בהריון או עכבר יילוד בשאיפה מתמשכת של 1.5% צינור פלואור איזוף לתוך חרוט אף סטנדרטי כדי להכיל את הראש הקטן של עכבר יילוד מוקדם. עבור עכברים שזה עתה נולדו, אבטח את העכבר לפלטפורמת ההדמיה של מערכת האולטרסאונד במצב דקוביטוס גבי כאשר קודקוד ה-LV מצביע לכיוון זרוע ההזרקה. עבור עכברים שזה עתה נולדו, שמרו על טמפרטורת גופם באמצעות מנורת חום חיצונית.
עכברים בהריון דורשים הכנה רבה יותר. מרחו ג'ל אולטרסאונד על הגפיים כדי לספק צימוד לגלאי האק"ג המצורף ולנטר את קצב הלב. הכנס את מדחום פי הטבעת לקבלת משוב.
שליטה בטמפרטורת הגוף. הסר את השיער מהבטן בעזרת קרם האפילציה ושטוף במים. חותכים את הבטן בעזרת מספריים מנתחים ומלקחיים מעוקלים.
החצינו קרן רחם אחת והניחו אותה על כרית גזה לחה במי מלח חמים. לאורך כל הליך זה, שמור על לחות כל העוברים ובטן אמם. עם תוספות תקופתיות של מי מלח חמים, תפעל בזהירות את העובר למיקום הנכון כדי לקבל מבט על ציר ארוך parasternal של ה-LV באמצעות בדיקת האולטרסאונד, ניתן להשתמש בגליל גזה כדי לסייע בשמירה על כיוון העובר.
המשך במדידת הלחץ בכל העוברים בקרן רחם אחת לפני שתחזור על התהליך עם קרן הרחם השנייה. התחל בהנחת ג'ל אולטרסאונד דגה שהוזהר מראש על עכבר עוברי או יילוד. הורד את בדיקת ההדמיה והתאם את זווית פלטפורמת ההדמיה כדי לקבל תצוגת ציר ארוך LV פראסטרנלית אופטימלית.
אל תתאים את זווית הגשושית מכיוון שיישור המחט יאבד. תוך כדי ניטור תמונת ה-LV במסך האולטרסאונד, קדם לאט את המחט עד שהיא קרובה לתחתית הבדיקה. כוונן את מיקום המחט והבדיקה במידת הצורך כדי לתקן שינויי יישור.
התמונה מהעכבר היילוד מראה כיוון אידיאלי עבור ה-lv, שקשה להשיג עם עובר. התחל לתעד נתוני לחץ. שטפו בעדינות את המחט במי מלח וסגרו את זין העצירה למזרק 20 מיליליטר ולאטמוספירה.
שימו לב ללחץ. הגדלת התוכנית כדי להבטיח לחץ מינימלי על המחט. התקדם לאט לאט את המחט עד שניתן לראות אותה בקצה תמונת האולטרסאונד, אך עדיין לא ב-lv.
במידת הצורך, כוונן את מיקום המחט כדי להיכנס ל-LV בקודקוד. כוונן את מיקום הבדיקה במידת הצורך כדי לשמור על תמונה ברורה של המחט. קדם את המחט ללומן LV תוך הקלטת נתוני לחץ, וניטור מיקום המחט בתמונת האולטרסאונד.
תחילתן של הקלטות פועמות ממתמר הלחץ מאשרת את המיקום בתוך לומן ה-LV. אם נראה שהמחט נמצאת בלומן LV, אך רישומי הלחץ אינם פועמים, שטוף את המחט עם ברז קל על בוכנת המזרק רק עד שתתגלה עליית לחץ. שטיפת הנוזל חייבת להיות מינימלית כדי למנוע שינוי התנהגות הלב במהלך מדידות לחץ.
אם קריאות הלחץ עדיין אינן פועמות, ייתכן שהמחט תהיה מעל או מתחת למישור הנכון ולא מוכנסת ללומן ה-LV. משוך את המחט, שטוף אותה במי מלח וקדם אותה. שוב.
אם עדיין לא מתקבלות קריאות פועמות, עבור לעכבר הבא והשתמש תמיד במחט חדשה עבור כל עכבר חדש. יש לבצע את ההליך כולו במהירות האפשרית כדי למזער את המצוקה לעוברים ולילודים לאורך הניסוי. הלחץ החדרי של C 57 Black 6 עכברי J נמדד בעכבר E 18.
כצפוי הלחץ היה קרוב לאפס כאשר המחט הייתה מחוץ ל-LV והלחץ הראה קריאה פועמת כאשר בתוך ה-LV עבור עכבר P 14 ישן יותר. קריאת הלחץ פחתה מכיוון שעוצמת הלחץ הייתה גדולה יותר וקצב הלב היה גבוה יותר. קצב הלב נקבע על פי תדירות קריאות הלחץ הפועם בגילאים שונים בין E 18 ל-P 14.
קצב הלב נמדד וחושבו לחצים של LV סיסטולי. בעת ביצוע הליך זה, חשוב לזכור להרטיב את העוברים מעת לעת ולבדוק את מצב האם. טכניקה זו סוללת את הדרך לחוקרים בפיזיולוגיה של הלב וכלי הדם לחקור שינויים בלחץ הדם בעכברים מתפתחים.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
מאמר זה מתאר נוהל למדידת לחץ חדר שמאלי (LV) בשלבים מאוחרים של עוברים ועכברים ניאו-נטליים באמצעות הדמיית אולטרה-סאונד. השיטה כוללת החדרת מחט המחוברת למתמר לחץ לתוך ה-LV תוך הקפדה על תפקוד לב תקין.