Análisis cuantitativo de la expresión de la proteína para el Estudio de la especificación del linaje de ratón de preimplantación de embriones

El objetivo general de este protocolo es cuantificar los niveles de proteínas in situ en embriones preimplantacionales de ratón. Por lo tanto, este método nos permite realizar análisis de alto rendimiento de imágenes de microscopía confocal con resolución de una sola célula de forma semiautomática. Este método se puede utilizar para cuantificar las concentraciones de proteínas en imágenes confocales donde hay una alta densidad nuclear y cuando se desea estudiar heterogeneidades dentro de las poblaciones celulares.

Para empezar, utilice una llama abierta en una pipeta pasteur de vidrio para dibujar un extremo capilar en la punta. Frote suavemente el extremo más alejado de la pipeta contra el capilar para romperlo y crear un extremo romo. Después de sacrificar una rata hembra preñada en el día embrionario deseado de desarrollo, exponga las vísceras abdominales de acuerdo con el protocolo de texto y localice el útero.