トコジラミに対する殺虫剤の有効性の評価方法、ナンキンムシ、卵とファースト齢

この実験の全体的な目標は、トコジラミの卵と最初の幼虫を殺す殺虫剤の有効性を評価することです。この方法は、トコジラミの卵や小さな幼虫に対する毒物学的アッセイの影響など、昆虫学分野の重要な質問に答えるのに役立ちます。この技術の主な利点は、殺虫剤、特に卵の段階で困難な昆虫の生活段階を治療するために設計されていることです。

実験を開始するには、コロニーから5〜10匹の交配した十分に栄養のある成虫のメスのトコジラミを引っ張り出し、メスを濾紙でペトリ皿に入れます。殺虫剤アッセイに十分な卵が存在することを確認するために、10回の複製を準備します。雌が卵を産んだかどうかを確認するために、毎日皿をチェックしてください。

メスが卵を産んだら、メスをペトリ皿から取り出し、毎日新しい濾紙で新しいペトリ皿に入れます。古いシャーレと新しいシャーレにデータを記録します。アッセイを開始する前に、卵子を4〜5日熟成させます。

卵が適切に老化したら、ソフトチップ鉗子を使用してトコジラミの卵を濾紙からそっと取り除きます。濾紙に付着した卵の底を鉗子でそっとこすり、トコジラミの卵が投げられないように、力を入れすぎずに卵を優しくつかみます。取り除いたトコジラミの卵をプラスチック製のペトリ皿内のそれぞれのグループに入れます。

各ペトリ皿の外側を柔軟仕上げ剤シートでこすり、トコジラミの卵が飛び交う静電気を防ぎます。次に、殺虫剤の段階希釈液を調製して、5つの異なる濃度の範囲と、水道水のみを含む対照溶液をそれぞれ20mLの容量にします。mLラインで事前にカットされた50 mLの遠心分離チューブを取り、キャップに収まる大きさの正方形に細かいメッシュをカットします。

メッシュをしっかりとねじ込み、遠心分離チューブのキャップを使用して遠心分離チューブへの隆起を防ぎます。次に、絵筆を使用して、トコジラミの卵のグループを遠心分離管の内側のメッシュに置きます。カットした遠心分離管の内側にあるトコジラミの卵のグループを殺虫剤濃度に5秒間浸します。

遠心分離管を殺虫剤溶液から取り出します。遠心分離管をラボ組織に直接置き、卵が入ったメッシュを乾燥させます。乾燥後、小さな細い毛のペイントブラシを使用して遠心分離管から卵のグループを取り出し、きれいな濾紙できれいなシャーレに入れます。

卵の死亡率を14日間記録して、すべての卵が孵化するのに十分な時間があったことを確認します。アボットの式を使用したコントロール治療の死亡率を補正します。記録された死亡率と対応する濃度を分析ソフトウェアに挿入して、LC50値を計算します。

前日に餌をやった5匹の成体のオスと5匹の成虫のメスのトコジラミのグループを分け、濾紙でシャーレに入れます。成虫のトコジラミが交尾して卵を産むのを8日間待ちます。次に、成虫をペトリ皿から取り出し、卵がペトリ皿内の最初の星に孵化するのを待ちます。

絵筆を使用して同じ年齢の給餌されていない最初のインスターを収集し、殺虫剤アッセイまで新しいきれいなペトリ皿に入れます。対照群のために以前に調製した殺虫剤と水の5つの希釈液のそれぞれについて、150マイクロリットルのアリコートを個々の濾紙にピペットで移します。濾紙の端全体と中央に液滴を塗布することにより、殺虫剤を均等に分散させます。

処理した濾紙を個々のハードボードパネルの上に個別に置きます。殺虫剤で濡らされたまま、最初のインスターのグループを個々の濾紙に放出し、ペトリ皿の底を逆にして最初のインスターを覆い、ペトリ皿の上に重りを置いて、最初のインスタートコジラミが逃げるのを防ぎます。すべての殺虫剤濃度に24時間曝露した後の最初のインスタートコジラミの死亡率を記録します。

アボットの式を使用したコントロール治療の死亡率を補正します。記録された死亡率と濃度を分析ソフトウェアに挿入して、LC50値を計算します。メトクロプリドβ-シフルトリンの5つの異なる濃度に対するハーリン株トコジラミの卵の反応率または死亡率は、用量が増加するにつれて増加しました。

死亡率は、試験された最高濃度で100%に達しました。このビデオを見た後、トコジラミの卵と最初のインスターに対する殺虫剤の有効性を評価する方法についてより深く理解できるはずです。