Name: Evaluación del deterioro de la memoria espacial en un modelo de ratón de lesión cerebral traumática utilizando un laberinto radial (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-07-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 9 s
Description: Aprende a evaluar la memoria espacial en ratones con lesión cerebral traumática utilizando un laberinto radial sin natación. Este método es ideal para modelos con déficits motores o baja motivación.

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Esta investigación fue apoyada por el Instituto para la Traducción de Ciencias de la Salud proyecto piloto oportunidad de la subvención (UL1TR000423), la Universidad de Washington Centro de Desarrollo Humano y Discapacidad, y la Universidad de Washington Animal Behavior Core and Brain Imaging Core. Quisiéramos agradecer al Dr. Warren Ladiges por su papel en el desarrollo y diseminación del diseño original del laberinto de la banda de rodadura radial y el protocolo presentado aquí. También agradecemos a Toby Cole por su ayuda con este proyecto.

Todos los procedimientos y manipulación de animales se llevaron a cabo de acuerdo con las directrices de cuidado de animales emitidas por los Institutos Nacionales de Salud y por el Comité de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Washington. 1. Cirugía <ol><li> Anestesiar el ratón con isoflurano al 5% en una caja de inducción hasta que quede inconsciente. Confirme la anestesia mediante una reducción de la frecuencia respiratoria y la ausencia de un reflejo de retirada después de la pinzamiento. </li><li> Mantenga la anestesia a través del cono de la nariz en el 2-2.5% durante la cirugía. Controle la frecuencia respiratoria durante la cirugía para asegurarse de que el ratón permanezca inconsciente. </li><li> Coloque el ratón propenso a una almohadilla de calefacción y coloque el ratón en el dispositivo estereotáctico con barras de oído, asegurando que la cabeza es segura y plana. </li><li> Quitar el cabello del cuero cabelludo con crema depilatoria. Enjuague el cuero cabelludo a fondo con solución salina. </li><li> Limpie el sitio quirúrgico con un yodo alterno y un lavado con etanol al 70%. </li><li> AdministradorRa inyección subcutánea de Lidocaína y Bupivacaína (1 mg / kg) en el cuero cabelludo. </li><li> Con tijeras quirúrgicas, realice una incisión longitudinal longitudinal y retraiga la piel para revelar el cráneo. </li><li> Utilizando una sierra trífida de 5 mm, se realiza una craneotomía sobre la corteza frontoparietal izquierda con el punto central a 2,5 mm detrás del bregma y 2,5 mm a la izquierda de la línea media. Retire cuidadosamente el círculo del hueso para exponer el cerebro. </li><li> Ajuste el dispositivo del impactador a una velocidad de 6 m / sy 200 ms de tiempo de permanencia. </li><li> Coloque el dispositivo de impacto hasta que la punta de impacto convexa de 3 mm toque ligeramente la superficie del cerebro a 2,5 mm detrás del bregma ya 2,55 mm a la izquierda de la línea media. Retirar la punta de impacto y bajar 1 mm (profundidad de impacto). Cuando esté listo, dispare el dispositivo, generando el impacto deseado. </li><li> Cubrir la craneotomía con un disco de polipropileno estéril cementado al derma con adhesivo tisular, y suturar la incisión cerrada. </li><li> Quitar el ratón de la anestesia, y dar IP inyección de BuprEnorfina (0,5 mg / kg). </li><li> Permita que el ratón se recupere en una jaula limpia, calentada por una almohadilla de calefacción. El ratón debe ser monitorizado para detectar signos de dolor o angustia durante las siguientes 24 h. NOTA: Los controles Sham deben recibir el mismo tratamiento que el anterior, con los pasos 1.8-1.9 omitidos. </li></ol> 2. Construcción radial del laberinto de la pisada del agua <ol><li> Los orificios de salida de la perforación 9 son lo suficientemente grandes como para acomodar adaptadores de trampa ABS DWV SPG x SJ de 1-1 / 2 pulgadas, a intervalos iguales alrededor de la circunferencia de una cuba de acero galvanizado de 32 pulgadas de diámetro. Centrar estos orificios de salida aproximadamente 2-1 / 4 pulgadas por encima del piso de la bañera. </li><li> Coloque un adaptador de ABS DWV SPG x SJ de 1-1 / 2 pulgada en cada uno de los orificios de salida y asegúrelo con las tuercas de anillo incluidas. </li><li> Con tapones de goma, la tapa ocho de las nueve salidas del exterior del aparato. La salida final sin tapar servirá como vía de escape. No importa qué salida se designe como la ruta de escape. </li><li> Conecte un 90 ° ABSCodo hasta el extremo exterior de la salida restante. La curva de 90 ° sirve para evitar que los sujetos de prueba determinen visualmente la ruta de escape correcta desde el interior del laberinto. </li><li> Construir la caja de escape de cualquier caja opaca capaz de ser desinfectado y aproximadamente 30 cm x 15 cm x 15 cm de tamaño. Corte un agujero en el lado de la caja, directamente sobre el piso, lo suficientemente grande como para acomodar el codo de 90 ° ABS. </li><li> Coloque la caja de escape en el extremo terminal del codo de 90 ° ABS. </li><li> Levante ligeramente la caja de escape (menos de una pulgada) por encima de la superficie del piso. Esto permite un amplio espacio para que una almohadilla de calefacción eléctrica, u otra fuente de calor, se coloque debajo de la caja de escape. </li><li> Imprima y plasme al menos 5 señales visuales únicas. Utilice imágenes simples y de alto contraste que puedan distinguirse fácilmente desde el interior del aparato. Se recomiendan las formas de imágenes prediseñadas en blanco y negro (triángulo, cuadrado, círculo). </li><li> Usando imanes, adhiera las señales visuales a las paredes internas delaparato. Las señales deben estar aproximadamente a igual distancia entre sí, alrededor de la circunferencia del aparato. </li></ol> 3. Protocolo radial del laberinto del paso del agua NOTA: La prueba de laberinto de agua debe comenzar sólo después de que el sitio quirúrgico haya cicatrizado (aproximadamente una semana después de la cirugía). <ol><li> Preparación para las pruebas. <ol><li> Permitir que los ratones se aclimaten a la sala de ensayo durante al menos 30 min antes de comenzar la prueba. </li><li> Desinfecte el aparato usando un aerosol de etanol al 70%. </li><li> Llene el aparato con aproximadamente 1 pulgada de agua fría (12-14 ° C). </li><li> Coloque una almohadilla de calefacción eléctrica, u otra fuente de calor, directamente debajo de la caja de escape. Mantenga la caja de escape oscura y caliente durante toda la duración de la prueba. </li><li> Coloque una fuente de luz brillante sobre el aparato. NOTA: Si usa una lámpara que pueda ser visible para los animales de investigación del propio aparato, asegúrese de que la lámpara esté colocada en el mismo poCada día. La propia lámpara podría representar otra señal visual para que los ratones lo usen para localizar la caja de escape, y moverla drásticamente de un día a otro podría complicar los resultados. </li></ol></li><li> Protocolo de prueba <ol><li> Retire el ratón de su jaula suavemente por la cola y colóquelo en el centro del aparato. </li><li> Tan pronto como el animal está en el aparato, comience el tiempo. </li><li> Una vez que el animal ha encontrado la salida correcta y ha localizado / entrado en la caja de escape, detenga la temporización y registre el número de segundos necesarios para encontrar la ruta correcta. </li><li> Si el animal intenta subir a un agujero de terminación y no entra espontáneamente en el laberinto después de 10 s, guíe al animal de regreso al centro del laberinto a mano. </li><li> Si el animal no encuentra el camino correcto a la caja de escape dentro de 3 min (180 s), marque el ensayo como un fracaso y registre como 180 s. Guíe cuidadosamente al animal hacia el camino correcto a mano. </li><li> Permitir queRatón para permanecer en la caja de escape durante un descanso de 1 min, inter-ensayo. </li><li> Una vez que haya pasado el descanso de 1 minuto, retire el animal de la caja de escape y regrese a su jaula de origen. </li><li> Desinfecte completamente la caja de escape y salga con un aerosol de etanol al 70% para evitar que el ratón use señales olfativas para localizar la ruta de escape correcta. Este paso no debe tomar más de unos segundos. </li><li> Devuelva el ratón al laberinto para la próxima prueba. </li><li> Repita los pasos 3.2.1-3.2.9 hasta que el ratón haya completado un total de tres ensayos y se haya localizado o llevado a la caja de escape tres veces. </li><li> Después del último descanso de 1 minuto, devuelva el ratón a su jaula de casa. </li><li> Escurrir y reemplazar el agua en el aparato entre los animales para asegurar una temperatura uniforme durante las pruebas. </li><li> Repita los pasos 3.2.1-3.2.12 para cada ratón que se va a probar. </li><li> Al día siguiente, repetir los pasos de preparación 3.2.1-3.2.5. Tenga especial cuidado en asegurar que las señales visuales permanezcanEn posiciones consistentes entre los días de prueba. </li><li> Pruebe los animales usando el protocolo de pruebas diarias anterior para tres ensayos al día durante cuatro días (período de entrenamiento), con una prueba final de tres ensayos para retención de memoria en el quinto día. Una sexta prueba de tres ensayos (retención de memoria a largo plazo) se puede dar el día doce. </li><li> No realice ninguna prueba entre los días de prueba cinco y doce. </li></ol></li><li> Análisis <ol><li> Si un ratón no logra completar el laberinto en menos de 180 s durante cualquier período de dos días ( es decir, un total de 6 ensayos consecutivos, todos puntuaron a 180 s), considere que el ratón no está suficientemente motivado por las condiciones de la prueba y retire del análisis. </li><li> Calcular la latencia media para completar el laberinto de cada sujeto mediante la fecha de prueba haciendo un promedio de sus tres ensayos diarios para ese día. </li><li> Obtener diferencias de grupo en la retención de memoria mediante pruebas t estándar para comparar los grupos en la prueba de quinto día y la fecha de prueba de memoria a largo plazo. Si mEn comparación con dos grupos, se debe emplear un ANOVA unidireccional seguido de un análisis post-hoc apropiado (como el test de Tukey) para hacer un seguimiento de cualquier significado obtenido. </li><li> Obtener diferencias de grupo en el período de adquisición (días 1-4) a través de análisis de medida repetida de la varianza. </li></ol></li></ol>

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<li>Wiley, J., Pettan-Brewer, C., Ladiges, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenylbutyric+acid+reduces+amyloid+plaques+and+rescues+cognitive+behavior+in+AD+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Phenylbutyric acid reduces amyloid plaques and rescues cognitive behavior in AD transgenic mice.</a> Aging Cell. 10 (3), 418-428 (2011).</li>
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<li>Shultz, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Granulocyte-macrophage+colony-stimulating+factor+is+neuroprotective+in+experimental+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor is neuroprotective in experimental traumatic brain injury.</a> J Neurotrauma. 31 (10), 976-983 (2014).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

El protocolo del laberinto de RWT presentado aquí distingue con éxito entre los ratones TBI inducidos por CCI y los controles simulados, y representa una alternativa factible, centrada en el ratón, al laberinto circular MWM y Barnes. Mientras que los resultados presentados aquí se refieren únicamente a la utilización del laberinto RWT en un modelo de ratón TBI, este aparato ha sido utilizado con éxito en modelos de edad y transgénicas donde el estrés inducido por el incumplimiento resultante de las pruebas basadas en na...

Los impedimentos de la memoria están entre los síntomas más comunes reportados por los pacientes después de una lesión cerebral traumática (TBI) 1 , 2 . La identificación precisa y la evaluación de los déficit de memoria análogos en los modelos animales de TBI, por lo tanto, son esenciales para nuestra comprensión de esta condición y su gestión. Aquí, presentamos un protocolo para probar la memoria espacial en un modelo de ratón de TBI utilizando un laberinto de rodamiento radial de agua (RWT). Este aparato se mostró previamente para evaluar los déficits cognitivos en modelos de ratón de TBI 3 inducido por impacto cortical controlado (CCI), y representa una alternativa potencial a las pruebas de cognición basadas en la natación validadas por ratas. La creciente diversidad y disponibilidad de los modelos de ratón transgénico ha llevado a un reciente aumento en el uso de ratones sobre ratas en la investigación científica [ 4] . A pesar de este cambio, los investigadores continúan dependiendo deY tareas cognitivas que fueron originalmente diseñadas y validadas para el uso de ratas. Las pruebas más comunes actualmente utilizadas para evaluar la cognición en ratones, el laberinto de agua Morris (MWM) y el laberinto circular de Barnes, fueron diseñados específicamente para capitalizar los comportamientos instintivos encontrados en ratas 5 , 6 . Teniendo en cuenta las diferencias genéticas, neuroetológicas y cognitivas que existen entre estas dos especies [ 4] , no sorprende que los ratones consistentemente bajo rendimiento en estas tareas [ 7 , 8] . Las diferencias dependientes de la especie en la capacidad de prueba son particularmente preocupantes en las pruebas cognitivas basadas en la natación, como el MWM. Aunque tanto las ratas como los ratones son nadadores proficientes, los investigadores han identificado varias cepas de ratón que se desempeñan notablemente mal en las tareas cognitivas basadas en la natación 9 , 10 , </Sup&gt; 11 , 12 , 13 . Incluso en animales de tipo salvaje, las ratas generalmente superan a los ratones 7 , 8 . Si bien esto podría interpretarse como una especie específica de la diferencia en la memoria espacial, análogo de seguimiento de pruebas utilizando un laberinto de tierra seca no reveló ninguna especie dependiente de las diferencias en el rendimiento cognitivo [ 8] . Una serie de factores no relacionados con la cognición podría explicar este hallazgo, incluyendo las diferencias dependientes de la especie en la capacidad de natación o estrategia de búsqueda. De hecho, el análisis de factor de mouse-específicas estrategias de búsqueda en el MWM muestran que los factores no cognitivos (en particular, thigomotaxis y pasividad [ es decir , flotante]) puede desempeñar un papel más significativo en MWM rendimiento de aprendizaje espacial [ 14] . Aquí, demostrar el uso de una prueba cognitiva diseñada para capitalizar en elStinctual comportamiento de los ratones, y que no requiere la natación, para medir el deterioro de la memoria espacial en un modelo de ratón de CCI inducida por TBI. Mientras que el laberinto RWT ( Figura 1 A-B ) fue concebido como un híbrido novedoso del MWM y Barnes laberinto circular, que fue diseñado específicamente para aprovechar el comportamiento tigmotactic instintivo a los ratones [ 15 , 16] . El aparato consiste en una cuba de acero galvanizado de 32 pulgadas de diámetro en la cual se han agujereado nueve agujeros de salida uniformemente espaciados. Los agujeros están centrados 2-1 / 4 pulgadas por encima del piso de la bañera y están dimensionados para adaptarse a los adaptadores de trampa ABS DWV SPG x SJ de 1-1 / 2 pulgadas. Ocho de las salidas están tapadas desde el exterior y cegadas a una profundidad de 1 pulgada con tapones de goma. La novena está conectada por un codo de 90 ° de acrilonitrilo butadieno estireno (ABS) a una caja de plástico opaco de la que el ratón puede ser fácilmente retirado después de la prueba. En el curso de unPeríodo breve de adquisición, el ratón es entrenado para usar las señales visuales únicas que recubren el laberinto para localizar esta caja de escape. Durante las pruebas, el laberinto se llena con una pulgada de agua fría (12-14 ° C), suficientemente lo suficientemente aversiva para promover el escape, pero no lo suficientemente profundo como para que el ratón tenga que nadar. El laberinto de RWT representa una alternativa de bajo costo y de bajo mantenimiento para el MWM, y se ha utilizado con éxito en ratones envejecidos y transgénicos 15 , 17 , 18 , 19 y modelos de ratón inducidos por CCI de TBI 3 . El protocolo descrito aquí representa un método simple y eficaz para medir el deterioro de la memoria espacial que no requiere entrenamiento previo a la lesión, y podría ser fácilmente modificado para adaptarse a las necesidades particulares de un laboratorio de investigación.

<table><tbody><tr><td>Bañera redonda de acero sumergido en caliente de 35 galones</td><td>Home Depot</td><td>Internet #206638142</td><td>Necesario: 1</td></tr><tr><td>1-1/2 pulg. Adaptador de trampa ABS DWV SPG x SJ</td><td>Home Depot</td><td>Internet #100344703, SKU de la tienda #188956</td><td>Necesario: 9</td></tr><tr><td>1-3/4 pulgadas x 1-7/16 pulgadas Tapón de goma negra</td><td>Home Depot</td><td>Internet #100114974 SKU de la tienda #755844</td><td>necesario: 8</td></tr><tr><td>1-1/2 pulg. ABS DWV 90 Degree Hub x Hub Elbow</td> Home <td>Depot</td><td>Internet #100346663 SKU de la tienda #188603</td><td>Necesario: 1</td></tr><tr><td>bolsa de almacenamiento HDX de 10 galones</td> Home <td>Depot</td><td>Internet #202523587 SKU de la tienda #258804 Tienda SO SKU #258804</td><td>Necesario: 1</td></tr><tr><td>Impacto Un impactador estereotáxico para CCI</td><td>Leica Biosystems</td><td>39463920</td><td>necesario: 1</td></tr><tr><td>Vernier Stereotaxic con instrumento estereotáxico manual de accionamiento fino para animales pequeños</td><td>39463001 necesarios para Leica Biosystems</td><td></td><td>: 1</td></tr></tbody></table>

evaluación del deterioro de la memoria espacial en un modelo de ratón de lesión cerebral traumática utilizando un laberinto radial

Assessing Spatial Memory Impairment in a Mouse Model of Traumatic Brain Injury Using a Radial Water Tread Maze

A pesar del reciente aumento en el uso de modelos de ratón en la investigación científica, los investigadores siguen utilizando las tareas cognitivas que fueron originalmente diseñados y validados para el uso de ratas. Se ha demostrado previamente que la prueba de laberinto de la memoria espacial (diseñada específicamente para ratones y que no requiere natación) del laberinto radial de agua (RWT) ha permitido distinguir exitosamente entre ratones TBI inducidos por impacto cortical controlado y controles simulados. Aquí se presenta un protocolo detallado para esta tarea. El laberinto RWT capitaliza la tendencia natural de los ratones a evitar las áreas abiertas en favor de abrazar los lados de un aparato (thigmotaxis). Las paredes del laberinto están forradas con nueve orificios de escape colocados por encima del piso del aparato, y los ratones son entrenados para usar señales visuales para localizar el hueco de escape que sale del laberinto. El laberinto está lleno de una pulgada de agua fría, suficiente para motivar la fuga pero no lo suficientemente profunda como para requerir que el ratón nade. El período de adquisición toma sólo cuatroCon una prueba de retención de la memoria en el día cinco y una prueba de memoria a largo plazo en el día 12. Los resultados reportados aquí sugieren que el laberinto de RWT es una alternativa factible a validación de ratas, pruebas cognitivas de natación en la evaluación de espacial Déficit de memoria en los modelos de ratón de TBI.

El laberinto de RWT ( Figura 1 ) se utilizó para investigar los déficit de memoria espacial dependiente de lesiones en ratones asignados al azar para recibir tanto la TBI cortical controlada como la cirugía simulada. La lesión se generó mediante un impacto cortical impulsado por solenoides con una punta convexa de 3 mm y los siguientes parámetros de lesión: velocidad de huelga de 6 m / s, profundidad de penetración de 1 mm y tiempo de contacto de 200 ms. Los...

Aquí presentamos un protocolo para una prueba específica de ratón de la cognición que no requiere nadar. Esta prueba puede utilizarse para distinguir con éxito los ratones de lesión cerebral traumática inducida por impacto cortical controlado de los controles simulados.

Evaluación del deterioro de la memoria espacial en un modelo de ratón de lesión cerebral traumática utilizando un laberinto radial

Despite the recent increase in use of mouse models in scientific research, researchers continue to use cognitive tasks that were originally designed and ...

El objetivo general de este protocolo de laberinto radial de nado en agua es evaluar la memoria espacial en un modelo murino de lesión cerebral traumática mediante una tarea cognitiva centrada en el ratón que no requiere natación. Este método puede ser especialmente útil para evaluar la cognición en modelos murinos en los que déficits motores o una falta de motivación hacen inviables los protocolos de pruebas cognitivas basadas en natación, como el laberinto acuático de Morris. Aunque este método podría proporcionar información sobre diferencias entre grupos y la cognición en un modelo de impacto cortical controlado de lesión cerebral traumática en ratones, también puede ser útil para medir la cognición en modelos murinos envejecidos y transgénicos que se sabe que tienen un desempeño deficiente en pruebas basadas en natación.En todos los días de prueba, realice los siguientes pasos preparatorios. Primero, permita que los ratones se aclimaten a la sala de pruebas, permaneciendo en sus jaulas de origen durante al menos 30 minutos. El laberinto circular presenta señales visuales a lo largo de las paredes internas.La caja de escape móvil colocada en uno de los nueve orificios de salida diferentes. Mientras los ratones se aclimatan, desinfecte las salidas y la caja utilizando un spray de etanol al 70 %. A continuación, llene el laberinto con aproximadamente una pulgada de agua fría.Mantener la temperatura del agua constante entre los ensayos es muy importante. Por lo tanto, mida con precisión y ajústela según sea necesario. Ahora, coloque la caja de escape en uno de los nueve orificios de salida.Utilice una fuente de calor para mantener la caja caliente, idealmente con una almohadilla calefactora. Además, proteja la caja de la luz. La caja de escape siempre debe estar oscura, cálida y relativamente libre de olores.La fuente de luz también probablemente actúa como una señal, por lo que no debe cambiar su posición entre los ensayos. Retire suavemente al ratón de prueba de su jaula por la cola y colóquelo en el centro del aparato. Luego, inmediatamente comience a cronometrar el tiempo que tarda el ratón en encontrar la salida.Si un ratón entra en un agujero terminal y no vuelve espontáneamente al laberinto después de 20 segundos, no detenga el ensayo. En cambio, guíe manualmente al ratón de regreso al centro del laberinto y permita que complete el ensayo. Si después de tres minutos el ratón no ha salido del laberinto, califique el ensayo como un fracaso y registre el tiempo como tres minutos.Luego, manualmente, guíe cuidadosamente al animal a lo largo del camino más recto hacia la salida. Una vez dentro de la caja de escape, permita que el ratón permanezca allí durante un minuto. A continuación, transfiéralo de vuelta a su jaula de alojamiento mientras se restablece el laberinto.Entre ensayos, desinfecte minuciosamente la caja de escape y las salidas con un spray de etanol al 70 % para evitar que el ratón utilice señales olfativas antiguas para localizar la ruta de escape correcta. Esto puede hacerse bastante rápidamente. Ahora, repita el ensayo con el mismo ratón otras dos veces, para un total de tres ensayos consecutivos.Cada día de prueba consiste en tres ensayos por ratón. Ni más ni menos. Además de desinfectar, drene el laberinto y renueve el agua entre las pruebas con diferentes ratones.Asegúrese de mantener la temperatura del agua entre 12 y 14 grados Celsius. Utilice recipientes con hielo o agua caliente más fría para ajustar la temperatura del agua del grifo a este rango. Entre los días de prueba, es importante asegurarse de que las señales visuales en el laberinto y en el espacio que rodea el laberinto permanezcan consistentes.Un régimen completo de pruebas incluye cinco días consecutivos de pruebas realizados todos de la misma manera. El quinto día se considera la medida de la retención de la memoria. Siempre que no se realicen pruebas entre el día seis y el 11, una prueba el día 12 puede utilizarse para medir la memoria a largo plazo.Se utilizó el laberinto acuático radial para investigar los déficits de memoria espacial dependientes de la lesión en ratones que recibieron ya sea una lesión cerebral traumática inducida por impacto cortical controlado o una lesión simulada. La cirugía de LCT se describe en detalle en el protocolo escrito y en un artículo de JoVE por Romin, Gao y Chen de 2014. En resumen, la lesión se generó mediante un impacto cortical impulsado por solenoide con una punta convexa de tres milímetros.Los falsos operados fueron intervenidos quirúrgicamente pero no afectados por el dispositivo. 35 días después de la cirugía, se realizó el régimen de pruebas descrito. Todos los ratones cumplieron con el criterio de prueba para demostrar deseo de escapar del laberinto.Por lo tanto, todos fueron incluidos en el análisis. Los resultados muestran una diferencia clara entre los ratones con TCE y los controles simulados. La latencia para escapar fue significativamente mayor en los ratones lesionados el primer día de entrenamiento, y en ambos días de prueba de memoria.Por lo tanto, el TBI descrito afectó la capacidad del animal para aprender. Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo realizar adecuadamente pruebas de cognición utilizando una prueba específica en ratones de cognición espacial. Una vez dominada, esta técnica puede realizarse en menos de 15 minutos por animal si se lleva a cabo correctamente.Al intentar este procedimiento, es importante recordar que la posición de las señales visuales y la temperatura del agua deben mantenerse constantes en todos los ensayos.

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Research

Investigación

JoVE Journal

Behavior

Comportamiento

El laberinto acuático de Morris es una tarea para poner a prueba el comportamiento dependiente del hipocampo aprendizaje y la memoria. Ha sido ampliamente utilizada en el estudio de la neurobiología, la neurofarmacología y trastornos neurocognitivos en modelos de roedores.

Agua Morris laberinto de prueba para los déficits de aprendizaje y memoria en ratones de Alzheimer modelo de enfermedad

En este video, describimos la prueba del laberinto acuático de Morris con reubicación de plataforma, una tarea de navegación utilizada para estudiar la memoria de trabajo en roedores.

El laberinto acuático con reubicación de plataformas: un método para evaluar la memoria de trabajo

El laberinto de agua radial de ocho brazos está diseñado para evaluar el rendimiento de la memoria de referencia y de trabajo simultáneamente al requerir que los sujetos usen señales extra-laberinto para localizar plataformas de escape y remedia las limitaciones observadas en los diseños de laberintos de brazos radiales terrestres.

Uso de un laberinto acuático radial de ocho brazos para evaluar la memoria de trabajo y de referencia después de una lesión cerebral neonatal

Para investigar la co-mórbida enfermedad de Alzheimer (EA) y la condición de accidente cerebrovascular en un nuevo modelo, se describen tres tareas de comportamiento que evaluar tanto el control motor y comportamientos cognitivos. Estas tareas incluyen la tarea haz de pie, tarea cilindro y laberinto acuático de Morris.

Motor y del hipocampo aprendizaje espacial dependiente y Evaluación de referencia a memoria en un modelo de rata transgénica de la enfermedad de Alzheimer con accidente cerebrovascular

Este protocolo describe el uso de un T-laberinto modificado para evaluar memoria aprendizaje funcional en isquemia cerebral paro cardíaco inducido por asfixia.

Utilizando el T-laberinto modificado para evaluar los resultados funcionales de la memoria después de un paro cardíaco

Aquí, se describe un protocolo para llevar a cabo las pruebas de laberinto de agua Morris para evaluar la capacidad de aprendizaje y memoria de los ratones modelo de la enfermedad de Alzheimer y para evaluar el efecto de la acupuntura manual para tratarlos.

Análisis de la capacidad de aprendizaje y memoria en un modelo de ratón de la enfermedad de Alzheimer usando el laberinto de agua Morris

La lesión cerebral traumática (LCT) se asocia comúnmente con el deterioro de la memoria. Aquí, presentamos un protocolo para evaluar la memoria de trabajo espacial después de una LCT a través de una tarea métrica. Una prueba métrica es una herramienta útil para estudiar el deterioro de la memoria de trabajo espacial después de una LCT.

Una prueba métrica para evaluar la memoria de trabajo espacial en ratas adultas después de una lesión cerebral traumática

Aquí, presentamos un modelo de lesión cerebral traumática leve (mTBI) de cabeza cerrada y su validación que muestra una notable similitud con la mTBI humana en lo que respecta a las manifestaciones conductuales durante las etapas aguda y subaguda.

Modelo de Rata de Lesión Traumática Leve de Cabeza Cerrada y su Validación

Este protocolo presenta un modelo murino modificado de lesión cerebral traumática leve repetitiva (rmTBI) inducida a través de un método de lesión craneal cerrada (CHI). El enfoque presenta una ventana de cráneo adelgazada y percusión de fluidos para reducir la inflamación comúnmente causada por la exposición a las meninges, junto con una mejor reproducibilidad y precisión en el modelado de rmTBI en roedores.

Modelo de ratón modificado de lesión cerebral traumática leve repetitiva que incorpora ventana de cráneo adelgazada y percusión de fluidos

La mayoría de los experimentos de comportamiento para roedores se diseñaron originalmente para ratas. Debido a las diferencias de comportamiento entre ratas y ratones, a veces se requieren modificaciones para los ratones. Presentamos un método para probar la memoria de trabajo espacial en ratones, minimizando el estrés durante la tarea de memoria de trabajo.

Una tarea de memoria de trabajo espacial apetitiva para ratones en un laberinto radial semiautomatizado de 8 brazos, que reduce la asociación de memoria temerosa en el laberinto

Aprende a evaluar la memoria espacial en ratones con lesión cerebral traumática utilizando un laberinto radial sin natación. Este método es ideal para modelos con déficits motores o baja motivación.

Evaluación del deterioro de la memoria espacial en un modelo de ratón de lesión cerebral traumática utilizando un laberinto radial (Video) | JoVE Journal

Evaluación del deterioro de la memoria espacial en un modelo de ratón de lesión cerebral traumática utilizando un laberinto radial

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