Denne protokol præsenterer en detaljeret procedure til fremstilling af biologiske kryoprøveudler til synkrotronbaserede røntgenabsorptionsspektroskopieksperimenter. Vi beskriver alle de trin, der kræves for at optimere prøveforberedelse og kryopræservering med eksempler på protokollen med kræft- og fytoplanktonceller. Denne metode tilvejebringer en universel standard for prøve kryo-forberedelse.