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Article de méthode

Un préclinique modèle murin de métastases hépatiques

30.3K vues

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DOI :

10.3791/51677

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27 septembre 2014

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Dans cet article

Résumé

Un modèle murin de métastases hépatiques préclinique réalisée par une technique d'injection de hemispleen.

Résumé

De nombreux modèles murins ont été développées pour étudier les cancers humains et de faire progresser la compréhension du traitement du cancer et le développement. Ici, un modèle préclinique murin pancréas tumeur des métastases hépatiques par une injection de cellules syngéniques de hemispleen tumorales pancréatiques de souris est décrit. Ce modèle imite un grand nombre de conditions cliniques chez les patients ayant une maladie métastatique au foie. Souris développent constamment des métastases dans le foie qui permet d'observer le processus métastatique, les essais de thérapie expérimentale, et la recherche en immunologie tumorale.

Introduction

Canalaire pancréatique adénocarcinome (PDA) est la quatrième cause de décès liés au cancer aux États-Unis 1. La survie à cinq ans pour les patients atteints de PDA métastatique est 2-12% 1. Bien que la chimiothérapie adjuvante et néoadjuvante pour cancer du pancréas est plus efficace que jamais, il reste encore un besoin désespéré de nouvelles thérapies.

Le développement de nouveaux produits thérapeutiques requiert des modèles animaux précliniques fiables. Bien que les modèles de tumeurs sous-cutanées sont simples à utiliser, les inconvénients comprennent l'incapacité de ces tumeurs et de métastases imiter la pro....

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Protocole

Toutes les expériences sur les animaux étaient conformes aux lignes directrices du soin et l'utilisation des animaux Comité de l'Université Johns Hopkins, et les animaux ont été maintenus en conformité avec les directives de l'Association pour l'évaluation et l'accréditation des soins de laboratoire (AAALAC). La procédure chirurgicale est effectuée dans des conditions stériles dans une salle d'opération qui est soumis à un minimum de quinze renouvellements d'air par heure. Tous les instruments sont stérilisés par autoclavage avant la procédure et à nouveau avec de l'éthanol à 70% entre chacune des souris au cours de la procédure. Toute....

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Résultats

Cellules tumorales Panc02 injectés dans le hemispleen (figure 1) des métastases hépatiques en forme 100% des souris, alors que pulmonaires et péritonéales métastases ne sont pas respectées, même si la technique est réalisée correctement. Cette technique a été effectuée sur plus d'une centaine de souris en utilisant des cellules Panc02 dans plusieurs expériences indépendantes, et reproductible, toutes les souris non traitées meurent de métastases hépatiques entre 30 et 60 jours après la procédure de .......

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Discussion

Ce modèle murin préclinique de la métastase du cancer du pancréas dans le foie via une technique d'injection de hemispleen est le premier modèle qui reflète décrit un grand nombre de conditions cliniques et immunologiques de patients ayant une maladie métastatique au foie. Ce modèle offre plusieurs avantages par rapport à d'autres modèles murins. Tout d'abord, à la différence des modèles transgéniques de cancer du pancréas, dans lequel seulement 30% des souris développent des métastases vers le foie et le mo.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n'ont aucun conflit d'intérêt pertinent de divulguer.

Remerciements

KF et KO sont co premiers auteurs avec KS

Ce travail a été financé en partie par le AHPBA Fellowship (KS), NIH K23 CA148964-01 (LZ), Johns Hopkins School of Medicine Bourse de recherche clinique scientifique (LZ), Fondation Viragh et Cancer Center Passer Viragh pancréas à l'Université Johns Hopkins (EMJ et LZ), le pancréas Fondation nationale (LZ), la Fondation de la famille Lefkofsky (LZ), la SPORE NCI dans Gastrointestinal Cancers CA062924 P50 (EMJ, LZ), la Fondation Lustgarten (LZ), et les subventions Sol Goldman pancréas Cancer Center (KS , BHE, LZ).

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Les milieux de culture cellulaire et les composantsvarient en fonction de la lignée cellulaire
Phosphate Buffered SalineGibco by Life Technologies10010-023
Tubes à centrifuger de 15 mlincurvés Corning
Surgical Store Roboz Surgical StoreRS-6835
Micro Dissection Graefe ForcepsRoboz Surgical StoreRS-5130
Porte-aiguille (régulier)World Precision Instruments, Inc
Sutureavec l’aimable autorisation du département de chirurgie, Johns Hopkins
Weck Horizon Open Ligating Clip Applier, petit, coudéTeleflex137085
Weck Horizon Open Ligating Clip Applier, moyen, coudéTeleflex 237115
Weck Horizon medium clips ligaturantsTeleflex002200
Weck Horizon petits clips ligaturantsTeleflex001200
Seringue, 1 cc, seringue tb, embout coulissant 3/8 »Becton Dickinson309625
seringue, 1 cc, seringue tb, embout coulissant 5/8 »Becton Dickinson309597
9 mm Applicateur autoclipMikron427630
9 mm AutoclipBecton Dickinson427631
Coussin chauffantSunbeamCAT93
70 % Ethanolvendu par de nombreux vendeurs Chlorhydrate
de kétamine  ;Hospira22395DD
Chlorhydrate de xylazineSigmaX1251
Ciseaux opératoires 430052 3-0 ou 4-0

Références

  1. American Cancer Society. Cancer Facts & Figures. , American Cancer Society. Atlanta. (2013).
  2. Clark, C. E., Beatty, G. L., Vonderheide, R. H. Immunosurveillance of pancreatic adenocarcinoma: insights from genetically engineered mouse models of cancer. Cancer letters. 279, 1-7 (2009).
  3. Rhim, A. ....

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Réimpressions et autorisations

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