Article de méthode
L'objectif de ce protocole est de présenter une méthode standard pour effectuer des tests de tolérance au glucose par voie intraveineuse (IVGTTs) pour évaluer le contrôle glycémique chez les primates non humains et d'évaluer leur état métabolique de santé à dysmétabolique.
Le test de tolérance au glucose par voie intraveineuse (IVGTT) joue un rôle clé dans la caractérisation de l'homéostasie du glucose. Lorsque combiné avec des profils sériques biochimiques, état compris les niveaux de glucose dans le sang à la fois alimenté et à jeun, HbA1c, les niveaux d'insuline, l'histoire clinique de régime alimentaire, la composition corporelle, et l'état de poids corporel, une évaluation du contrôle glycémique normal et anormal peut être faite . Interprétation d'un IVGTT se fait par la mesure des changements dans les niveaux de glucose et d'insuline dans le temps par rapport au défi dextrose. Les composants critiques à prendre en compte sont: des pics de glucose et d' insuline atteint par rapport à T0 (fin de la perfusion de glucose), le taux de clairance de glucose K dérivée de la pente de la clairance rapide du glucose dans les 20 premières minutes (T1 à T20), le temps pour revenir à la ligne de base de glucose, et l'aire sous la courbe (AUC). Ces mesures de IVGTT montrera des changements caractéristiques que se déplace l' homéostasie du glucose à partir d' un t sainoa état métabolique malade 5. Ici, nous allons décrire la caractérisation des primates non humains (rhésus et cynomolgus macaques), qui sont le modèle le plus pertinent des animaux du diabète de type II (DT2) chez l'homme et l'IVGTT et les profils cliniques de ces animaux d'un sain maigre, à dysmétabolique obèses, et de l' état 8, 10, 11 DT2.
L'IVGTT est un essai fonctionnel pratique qui est couramment utilisé pour déterminer la fonction β-cellulaire chez l' homme , à différents états métaboliques 5, 7. Dans les modèles animaux de diabète de type 2, il est bien reconnu comme un outil pour caractériser les animaux qui montrent métabolique progression de la maladie de une saine à un état de dysmétabolique hyperglycémique 8, 9. Le modèle animal le plus proche de DT2 est démontrée chez les primates non humains (PSN), dont rhésus et cynomolgus macaques sont des exemples notables. Ces animaux développent naturellement DT2 avec les mêmes facteurs de risque de l' âge et de l'....
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Toutes les procédures animales ont été approuvées par l'Institut David H. Murdock recherche IACUC situé sur le campus de North Carolina Research (NCRC), sous protocole 14-017, la caractérisation d'un modèle primate non humain du diabète et du prédiabète / résistance à l'insuline et de l'efficacité de la thérapeutique pour améliorer sensibilité à l'insuline et la fonction métabolique.
1. Sélection animale et préparation d'études
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Les résultats représentés sur la figure 1 sont démonstratives des courbes typiques de glucose et d' insuline à partir matures, saines et diabétiques macaques cynomolgus au cours d'une 30 min IVGTT. Les données provenant des singes diabétiques sains et avancés sont présentés dans le but de comparer les différences évidentes entre les animaux des deux extrémités de la gamme de la caractérisation métabolique. Ce protocole de IVGTT a été utilisé avec succès par les a.......
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Le IVGTT évalue la capacité de libération d'insuline stimulée par le glucose par une seule perfusion de dextrose en fonction du poids du corps 5, 12, 13. De l'essai, le taux de glucose sanguin à jeun et le taux d'insuline est atteint, et il permet une évaluation de la capacité de l'animal à la libération d'insuline et de retourner le niveau de glucose élevé vers la ligne de base. Ceci permet à l'utilisateur des informations pour caractériser l'animal comme le glucose normal et sain.......
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Les auteurs sont affiliés à une organisation de recherche sous contrat (Crown Bioscience) active dans le domaine des maladies métaboliques.
Les auteurs tiennent à remercier le fort soutien du personnel de soins aux animaux DHMRI CLAS, Facility Manager M. Daniel Peralta et vétérinaire traitant, le Dr Glicerio Ignacio, DVM MRCVS.
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| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Allegra X-15R Centrifugeuse | plasma : 4 ° ; C à 3 000 tr/min pendant 10 min | ||
| Sérum de centrifugeuse | : 22 ° ; C à 3 000 tr/min pendant 10 min | ||
| Thermo Scientific -86 ° ; C Congélateur, Forma 88000 Series | Modèle : 88500A | ||
| Dextrose 50 % (D50) | Webster | 07-8008986 | I.V. perfusion de glucose |
| 3 ml Luer Lock Seringue | Midwest Veterinary Suppy | Prélèvements sanguins en série | |
| 5 ml Luer Lock Seringue | Midwest Veterinary Suppy | sérum héparinisé | |
| 10 ml Luer Lock Suppy | Midwest Veterinary Suppy | livraison d’éponges de gaze I.V. D50 | |
| 2 x 2 | Midwest Veterinary Suppy | 366.23000.4 | Utilisé sec, avec 70 % d’alcool et 2 % de solution Chlorohex |
| 4 ml de tubes séparateurs de sérum ; | Midwest Veterinary Supply | 366.45000.4 | tube de prélèvement sanguin pour panel superchem |
| K2EDTA, 2 ml | VWR | 95057-239 | tubes de prélèvement sanguin |
| Aprotinin, 100 mg | Sigma | A1153-100MG | tube de prélèvement sanguin additif protéase |
| 22 G x 1" Cathéters | Midwest Veterinary Suppy | 193.75250.2 | Cathéter I.V. |
| Bouchon d’injection avec capuchon | Midwest Veterinary Suppy | 001.11500.2 | %50 dextrose port de perfusion |
| Porus Tape, 1/2" x 10 yd | Midwest Veterinary Suppy | 001.85000.2 | maintenir l’adhérence des cathéters et de l’hep. Locks |
| Chlorhexidine Solution 2 % | Midwest Veterinary Suppy | 193.08855.3 | site de cathéter de préparation |
| 70 % d’éthanol | VWR | 71001-654 | site de cathéter de préparation |
| Webster | 07-8003432 | ||
| robinet d’arrêt à 3 voies | Midwest Veterinary Supply | 366.28510.4 | serrure hep. |
| 37" kit d’extension | Webster | 07-8454200 | serrure hexagonale |
| Exel 50-60cc LL Seringues | Midwest Veterinary Suppy | 001.12250.2 | Sérum physiologique hépariné |
| 250 ml sac 0,9 % sérum physiologique | Webster | 07-8365593 | chasse d’eau |
| 1 000 U Héparine, 10 ml | Webster | 07-883-4916 | |
| Kétamine (Ketaset) 100 ; mg/ml | Fort Dodge | (AV commandé) | |
| Precision Xtra glucose-test strips 50/bx | Abbott (American Diabetes Wholesale) | 9381599728K7 | test baseline/T3 glycémie |
| Masimo Rad 57 | DRE | 6052057V | pulse-oximeter |
| Pavia Thermomètre rectal | Patterson | 07-8391335 | |
| Precision Xtra Glucometer | Abbott | 9381599728K7 | Glucomètre à main |
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