Summary
כאן, אנו מציגים פרוטוקול כדי לבנות מודל תפליט פלאורלי בחולדות על ידי החדרה intratracheal של polyacrylate/nanosilica.
Abstract
תפליט פלאורלי הוא ממצא קליני שכיחה של מחלות רבות. יש מודל שימושי תפליט פלאורלי בעלי חיים חשוב מאוד ללמוד אלה מחלות ריאות. דגמים קודמים של תפליט פלאורלי יותר לשים לב הגורמים הביולוגיים, ולא חלקיקים בסביבה כאן, אנחנו מציגים מודל תפליט פלאורלי בחולדות על ידי החדרה intratracheal של polyacrylate/nanosilica, ואם שיטה של ננו-חלקיק בידוד ב תפליט פלאורלי. על ידי intratracheal החדרה של polyacrylate/nanosilica עם ריכוזים של 3.125, 6.25 ו- 12.5 מ ג/kg∙mL, תפליט פלאורלי בחולדות הציג ביום 3, הגיעה לשיאה ב- 7-10 ימים 6.25 ו- 12.5 מ ג/kg∙mL קבוצות, ואז לאט לאט ירד ונעלם ביום 14 כאשר הריכוז של polyacrylate/nanosilica גדל, תפליט פלאורלי הוא מיוצר יותר ויותר מהר. נוזל פלאורלי זה זוהה על-ידי בדיקת אולטראסאונד או CT חזה סריקה של אושר על ידי ניתוח של חולדות. חלקיקי סיליקה נצפו ב תפליט פלאורלי של החולדות באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים הילוכים. התוצאות הראו כי החשיפה polyacrylate/nanosilica מוביל אינדוקציה של תפליט פלאורלי, אשר היה עקבי עם הדו ח. הקודמים שלנו בבני אדם. בנוסף, המודל הזה הוא מועיל עבור מחקר נוסף של ננו טוקסיקולוגיה והמחלות תפליט פלאורלי.
Introduction
תפליט פלאורלי הוא ביטוי קליני נפוצה מאוד של מחלות ריאות עם מגוון של סיבות. יש מודל שימושי תפליט פלאורלי בעלי חיים חשוב מאוד ללמוד אלה מחלות ריאות, התפקידים של שתי השכבות ממברנה פלאורלי במנגנונים של תפליט פלאורלי, הטיפול בה. עם זאת, חלק דיווח תפליט פלאורלי מודלים מתמקדים בעיקר על תפליט פלאורלי ממאיר או הגורמים הביולוגיים במקום על חלקיקים הסביבה1,2. כאן, אנחנו מציגים מודל חדש של תפליט פלאורלי, זה פשוט, בטוח ויעיל.
עם ההתפתחות של ננו-טכנולוגיה, שימוש נרחב nanoproducts, יש דאגה לגבי הסיכונים הפוטנציאליים של ננו כדי על הסביבה ועל בריאות האדם3,4. ננו להציג את גורמי הסיכון, שעשויה להוביל מפגעים הרומן בתוך מקום העבודה או דרך זיהום סביבתי. מחקרים במבחנה, ויוו מראים כי ננו יכול לגרום נזק רב איבר ל הריאות, הלב, הכבד, הכליות, מערכת העצבים, וכן את הרבייה ומערכת החיסוןs5,6. בנוסף, מחקרים דיווחו כי רעילות ספציפיים של ננו-חומרים עקב שלהם מאפיינים ייחודיים physicochemical3,4,7.
אנחנו דיווחו כי קבוצה של עובדים עם חשיפה תעסוקתית ננו הציג קלינית עם תפליט פלאורלי, סביב הלב, פיברוזיס של הריאה, גרנולומה8,9. חלקיקי סיליקה היו מבודדים אותם חולים תפליט פלאורלי9. על מנת לשחזר ולאמת את תפליט פלאורלי המושרה על ידי חלקיקים בשאיפה של האדם, אנחנו ערכו את הניסוי על-ידי החדרת polyacrylate/nanosilica (הרשות/NPSi) דרך מערכת הנשימה אצל חולדות, אשר חיקה נשימה אנושיים אמיתיים הסביבה, מצא את intratracheal החדרה של הרשות/NPSi יכול לגרום תפליט פלאורלי בחולדות. כאן, אנו מציגים כיצד להפוך תפליט פלאורלי בחולדות מאת intratracheal החדרה של הרשות/NPSi, ואיך לבודד חלקיקים ב תפליט פלאורלי. מודל זה עשוי להיות שימושי עבור מחקר נוסף של ננו טוקסיקולוגיה ומחלות תפליט פלאורלי.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
המחקר עקב אחר ההנחיות של האוניברסיטה לרפואה הון (בייג'ינג, סין p. R) עבור טיפול והשתמש של חיות ניסוי. כל ההליכים אושרו על-ידי חיה אתי הוועדה של הבירה רפואי האוניברסיטה בסין.
1. ההכנות ניסיוני
הערה: להתאקלם הנשי ספציפי פתוגן ללא Wistar העכברושים (משקל: 200 ± 10 גרם) את סביבות ניסיוני במשך שבוע לפני המינהל (תנאים סביבתיים: אור / כהה: 12h / 12h, הטמפרטורה 22 ± 2 ° C, לחות 50 ± 10%).
- השתמש טריים 10 מ"ל של המתלים הרשות/NPSi (nanosilica Ø:20 ± 5 ננומטר על ידי אמולסיה באתרו הפילמור) מעורבבת עם תמיסת מלח בריכוזים של 3.125, 6.25 12.5 מ"ג/מ"ל, בהתאמה10. בעבר מינהל, sonicate את המתלים למשך 20-30 דקות, מערבולת 10 דקות כדי למנוע צבירת חלקיקים.
- במידה שווה לחלק את סכום כולל של 20 חולדות ארבע קבוצות: קבוצה אחת עבור כל ריכוז של הרשות/NPSi (0, 3.125, 6.25 ו 12.5 מ"ג/מ"ל).
- כדי עזים ומתנגד אותם, להציב את החולדות במיכל סגור עם 1.5 מ של האתר (99.5%) או כל IACUC אושרו פרוטוקולים אחרים. לאחר 60-90 s של הרדמה, בדוק חוסר תגובה לדווש רפלקס. ודא כי החולדות נושמים.
- העכברוש anesthetized ותצברו ולתקן את השיניים הקדמיות שלה עם חוטי ניילון על הלוח סטיריליים מדי.
- פותח את פיו ולחשוף שלה פיסורה של glottis בעזרת מלקחיים כירורגיים ולעדשה חזיתית.
- להקנות העכברושים 0.5 מ של הרשות/NPSi השעיה לריאה של חולדה כל עבור סכום כולל של 1 מ"ל באמצעות צינור בסדר עם מחט בוטה סטיריליים לתוך סמפון הדו-צדדיים.
- מניחים את החולדות על לוח פלסטיק מיקום פרקדן ולתת שהחולדות לשחזר לאט בעוד 5-10 דקות.
2. אולטרסאונד הבדיקה עבור תפליט פלאורלי
- השתמש מערכת סאונד עם מתמר מערך ליניארי (תדר: 8 מגה-הרץ) לבחון חולדות בימים 1, 3, 7 ו- 1410.
- לתת הרדמה (10% קלוראל-הידרייט, 0.35 גרם/100 גרם, i.p.) לעכברושים ולבדוק העדר רפלקסים פדלים.
- להסיר את השיער החזה הבטן של חולדות העליונה באמצעות מכונת גילוח חשמלית. ואז מניחים את החולדה על צלחת הרכבה במצב פרקדן.
- לכסות את העור עם הג'ל מצופה ולאחר מכן הצב את המתמר לחלל הבין-צלעי ואזור subcostal כדי לזהות נוזל פלאורלי.
הערה: על מנת לזהות שהאולטרסאונד במדויק, השמאל ואת העמדות הימנית נבחרו כדי לבצע בדיקת אולטרסאונד. - לשים את החולדה על לוח פלסטיק במצב פרקדן לאחר בדיקת אולטרסאונד ולתת שהחולדות להתאושש באיטיות תוך עשר דקות.
3. החזה סריקת CT של תפליט פלאורלי
- על ניהול שלאחר ימים 7 ו-14, עזים ומתנגד החולדות עם 10% כלורין (מקומות). שקול זה מספיק עומק ההרדמה כאשר העכברוש אינו מגיב לדווש רפלקסים.
הערה: המינהל שלאחר יום 7 הוא הזמן המתאים ביותר להתבונן תפליט פלאורלי על-ידי סריקת CT. - במקום העכבר על משטח מפלסטיק במצב של שכיבה ולאחר מכן סרוק את החזה שלה כדי לחקור תפליט פלאורלי באמצעות שימוש טי 64 ערוצים בהגדרות הבאות: תצורת גלאי 64 מ"מ x 0.625 מ"מ, 120 kV (פיק), ו- 350 mAs.
4. אוסף של תפליט פלאורלי ובידוד של חלקיקים ב תפליט פלאורלי
- אחרי החזה CT סריקה של חולדות, תחת הרדמה של קלוראל-הידרייט, לבדוק את רפלקס פדלים של החולדות, לגלח את שיער מהבטן לחזה ו מכן לחטא את העור על-ידי יוד.
- להביא את החולדות האזור הכירורגי.
- תחת הרדמה, נחתך במהירות 1-1.5 ס מ של העור ואת שרירי הבטן מצאתי לאורך הקו האמצעי עם הסרעפת ללא פגע.
- בזהירות פתח את התיבה ולבדוק הדו-צדדיים פלאורלי חללים בעזרת פינצטה, במיוחד דו צדדיים costal הסרעפת הזוויות. לאסוף מ ל 1-2 של תפליט פלאורלי אור צהוב עם מזרק סטרילי 2 מ"ל.
- פעם עשיתי, להקריב את העכברים עם פרוטוקול IACUC אושרה.
- Centrifuge של תפליט פלאורלי צינור 2 מ"ל למשך 15 דקות ב x 300 גר' על מנת לבודד את חלקיקי.
- השתמש טיפה של השכבה העליונה אשר הוא נוזל בהיר, להתבונן תחת microscope(TEM,) אלקטרון תמסורת במתח מאיץ של 60-80 kV.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
באמצעות אולטרסאונד של בית החזה, מצאנו אין מקרום ביום 1 בכל קבוצות. עם זאת, ביום 3, תפליט פלאורלי הופיעו הקבוצות 6.25 ו- 12.5 מ ג/kg∙mL. שהאולטרסאונד היה בעיקר הזווית הסרעפת costal נכון, תוך שהאולטרסאונד סביב הלב הציג רק בקבוצה 12.5 מ"ג/kg∙mL. יתר על כן, ביום 7, תפליט פלאורלי (Video 1) והן סביב הלב אפוזיה (סרטון 2) התגלו בקבוצה mg/kg∙mL 6.25 (איור 1). תפליט פלאורלי גדל לאט במידה הרבה ביותר ב- 7-10 ימים, לאחר מכן ירד בהדרגה. ביום 14, אין תפליט פלאורלי נמצאה יותר אבל עם הסימן של הידבקות של קרום הריאות בכל קבוצות. 10
ימים 7 ו-14 היו אין סימנים תפליט פלאורלי ב 3.125 ו- 6.25מ"ג/10קבוצות kg∙mL. עם זאת, בקבוצה 12.5 מ ג/kg∙mL, החזה CT הסריקה היתה מוגדלת עם הזווית הקהה costophrenic האחורי, אשר רמזו כמות קטנה של תפליט פלאורלי (איור 2, ב') . אין סימנים של רמת נוזלים נצפו, אשר הוסבר עקב כמות לא מספקת של מים.
על ניתוח של חולדות, הבחנו הנוזלים בריאות ענבר או השקופה 6.25 מ"ג/kg∙mL וקבוצות 12.5 מ"ג/kg∙mL בימים 3 ו-7. הכרכים של תפליט פלאורלי משתנים בין 1-1.8 מ לכל חלל הצדר mg/kg∙mL 6.25 ובקבוצות 12.5 מ"ג/kg∙mL. בקבוצה של 3.125 mg/kg∙mL, לא נוזל פלאורלי חללים הופיעו התהליך הניסויי מלא.
עם TEM, NPSi חלקיקים הציג בנפרד, אשכולות, נוצרו בנוזל פלאורלי סחוט. קוטר ממוצע (Ø: 20 ± 5 ננומטר) המורפולוגיה בנוזל פלאורלי היו בקנה אחד עם NPSi ההשעיה מוכן. חלקיקים היו בעיקר כדורית והתפזרו. ובכן, גודל ממוצע ננו-חלקיק בודד היה ~ 20 ± 5 nm (איור 3א, ב).
איור 1 : להחליפן בתמונות של תפליט פלאורלי על ידי ממצאים sonographic ביום 7. (a, b) תמונות sonographic של עכברוש בקבוצה 3.125 mg/kg∙mL עם אין נוזל פלאורלי, פגיעת עששת. (c, d) תמונות sonographic של עכברוש בקבוצה 6.25 מ"ג/kg∙mL עם תפליט פלאורלי לכאורה, תפליט סביב הלב. (e, f) תמונות sonographic של עכברוש בקבוצה 12.5 מ"ג/kg∙mL עם הרבה יותר נוזל פלאורלי, פגיעת עששת. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 2 . להחליפן בתמונות של תמונות CT בית החזה אצל חולדות. CT תמונה מעכברוש בקבוצה mg/kg∙mL 3.125 עם אין תפליט פלאורלי () ותמונה CT חולדה בקבוצה mg/kg∙mL 12.5 עם ממצא שלילי של נוזל חופשי אך הזווית הקהה costophrenic האחורי בחלל פלאורלי (b). אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 3 . חלקיקי סיליקה של תפליט פלאורלי של חולדה ובית polyacrylate/nanosilica. () סיליקה חלקיקים של סיליקה polyacrylate/nanocomposite. (b) חלקיקים של סיליקה, תפליט פלאורלי של חולדה עם אשכולות או לטופס יחיד. סרגל קנה מידה: 200 ננומטר. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
וידאו 1. תפליט פלאורלי ב עכברוש בקבוצה 6.25 מ"ג/kg∙mL. אנא לחץ כאן כדי לצפות בסרטון. (לחיצה ימנית כדי להוריד.)
וידאו 2. שהאולטרסאונד סביב הלב בחולדה בקבוצה 6.25 מ"ג/kg∙mL. אנא לחץ כאן כדי לצפות בסרטון. (לחיצה ימנית כדי להוריד.)
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Sonography הוא הכלי הנוח ביותר לקביעת מחלות ריאות, עקב רגישות מצוינת שלה נוזל חופשי חלל הצדר11. זה בגלל sonography יכולים לזהות מיד את הניגוד ב עכבה אקוסטית של נוזלים בחלל הריאות12והאוויר. חוץ מזה, sonography היא גמישה יותר במודל של חיה קטנה מטי ובכל זאת, את האוויר בריאה משתקפת גל הקול ואת המניע מהתבוננות השינויים intrapulmonary לאחר החדרה חלקיקים. לכן, אנו משלבים בדיקת ct חזה, ריאות sonography לחקור את השינויים intrapulmonary, נוזל פלאורלי.
לאחר שיטוט הנתונים הדמיה, מצאנו את תוצאות הדמיה מדהימה. ראשית, המודל שלנו הוכיח כי הרשות/NPSi, אכן המושרה רעילות בלתי רגיל, אשר בא לידי ביטוי את פלאורלי, שהאולטרסאונד סביב הלב בשלב מוקדם במודל חולדה. שנית, מודל זה בהצלחה לשכפל ההתרחשות ופיתוח של הנוזלים בריאות polyserous האנושי; בינתיים, תהליכים אלה נצפו בחולים שלנו, שהציג עם תפליט פלאורלי, סביב הלב, פיברוזיס של הריאה, גרנולומה8,9. לפיכך, עובדות אלה נרמז כי קרום נסיובי כמו קרום פלאורלי או קרום הלב היה אחד של המטרות פציעה של הרשות/NPSi, אשר היה בטבע הדומה לזה הנגרם על ידי אזבסט. כמו כן, ציר הזמן של הנוזלים בריאות polyserous היה משמעותי כפי הממצאים שלנו.
לגבי העיצוב של המודל שלנו, החדרה intratracheal היה השלב הקריטי. שיטה זו הבטיחו כי הרעילות של ננו-חלקיק נכנסו הגוף דרך הנשימה, אשר היה שונה מן המחקר הקודם13. עם זאת, החסרונות של שיטה זו היו כדלקמן: הרשות/NPSi היה שהוחדרו לתוך סמפון הדו-צדדיים על-ידי הרכבת התחתית בסדר, אשר נדרש ניסיוני מיומנויות כדי למנוע נזק מכני את קנה הנשימה והשיעול שנגרם עקב גירוי שלה. לפיכך, הנקודה שבה היה העומק מתאים של החדרה intratracheal. בינתיים, שמירה על הרדמה. ראויה היתה קריטית להשלמת השלב הנ.
השימוש של חלקיקים, החלקיקים בסדר גמור למטרות מחקר קולטים יותר ויותר תשומת לב. קטן יותר מקוטר החלקיקים, יותר מאתגר זה כדי להגן עליהם. מצד שני, הננו-סיליקה בקוטר של 20 ננומטר ± 5 נדרש אכן שיטה ההיי-טק הכנה להכין עבור מחקר זה, גרם לחיזוק הקושי עם הירידה קוטר. לפיכך, אחד מן היתרונות של הטכניקה שלנו היה הקוטר של ננו-סיליקה, אשר היה קטן מ-13,המחקר הקודם14. יתרון נוסף של מחקר זה היתה כי אנחנו המושרה על ננו-חלקיק דרך הנשימה ולא בעור או מחזור13,15,16. לדוגמה, החשיפה תוך ורידי הקשו עלינו בחקירת איבר המטרה, אשר היה קשה להבחין פציעתו של איבר המטרה המופעלות על-ידי הנזק ראשית או משנית. לפיכך, לדעתנו, החדרה intratracheal תהיה הדרך הטובה ביותר לחקור את רעילות ננו-חלקיק של הריאות בעתיד הקרוב. חוץ מזה, המינון של ננו-חלקיק היה נמוך יותר מאשר הקודם המחקר13, שהציג את יחס עלות-תועלת גבוה יותר.
באשר את פלאורלי, שהאולטרסאונד סביב הלב הנגרמת על ידי הרשות/NPSi, תגובת דלקת וייצור של מערכת חמצן תגובתי (ROS) יהיה הגורם לכך. הסברנו זאת כדלקמן: ראשית, nanosilica גדל ריכוז ROS, מושרה הפקה דלקתיות, נגרמת דפולריזציה מיטוכונדריאלי, להפחית רמות גלוטתיון בשני ויוו, גופית5,6. שנית, דלקת וייצור של ROS מוגברת של נוזל בין-תאי ריאות או חדירות של הנימים פלאורלי, אשר קידם את היווצרות תפליט פלאורלי בסוף. חוץ מזה, ירידת ערך פוטנציאלית של ניקוז לימפטי פלאורלי אולי מעורבת גם הצטברות של נוזל פלאורלי. עם יותר הצטברות של נוזל פלאורלי, הלחץ oncotic הלכה וגדלה, אשר לבסוף המושרה בתצהיר של הרשות/NPSi סתימות פלאורלי. תוצאה זו הייתה עקבית עם ניסויים בבעלי חיים קודמים שלנו ודיווח חולים8,10.
תפליט פלאורלי עצמה, זה היה נפוץ במרפאה. עם זאת, מחלות בדרכי הנשימה או מערכתית רבות עלול לגרום תפליט פלאורלי. לכן, בניית מודל חיה יהנו etiological חקר תפליט פלאורלי. המחקר הקודם דיווח רעילות ריאות של13,nanosilica17. עם זאת, הדגמים הקודמים דווח על תפליט פלאורלי התמקדו בעיקר הגורמים הביולוגיים מאשר חלקיקים18,19. לכן, המינון של ננו-חלקיק נותרה בעיה פתוחה. המודל שלנו הוכיח כי תפליט פלאורלי אירעה ביום השלישי לאחר ריכוז הרשות/NPSi של 6.25 מ"ג/kg∙mL היה מנוהל על ידי החדרה intratracheal והגיע לשיאו ב- 7-10 ימים. יתר על כן, עם הגדלת ריכוזים של הרשות/NPSi, תפליט פלאורלי המיוצר יותר ויותר מהר. יתר על כן, לעומת מודלים ביולוגי18,19, המודל שלנו של תפליט פלאורלי היה בשליטת טוב ויעיל. לסיכום, המודל שלנו יהיה מועיל למחקרים עתידיים של תפליט פלאורלי מחלות, כמו גם לגבי מחקר נוסף של nanotoxicity בפרט.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
המחברים אין לחשוף.
Acknowledgments
המחקר הנוכחי וייצור למאמר זה במימון של הלאומי מדעי הטבע קרן של סין (גרנט 81773373, 81172614 ו- 81441089 גרנט). אנו מודים ד ר יאן ג'ין ואת ד ר פאן Yujie, מחלקת חירום, בייג'ינג צ'אויאנג בית החולים, ד ר פנג Qu של מחלקת אולטראסאונד לרפואה, ביה ח בייג'ינג צ'אויאנג שעזרת עם הפקת הסרטון.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Acuson S2000 Color Doppler ultrasound system | Siemens Medical Solutions, Mountain View ,CA | ||
| Polyacrylate/nanosilica | Fudan University,Shanghai, China | made by order with nanosilica(20±5)nm | |
| 10% chloral hydrate | Beijing Chemical Works | 302-17-0 | |
| Light speed 16 spiral computed tomography | GE Healthcare, US | ||
| Specific pathogen-free Wistar | Animal Center of Lianhelihua (Beijing, China) | Wistar rats |
References
- Stathopoulos, G. T., et al. Nuclear factor-kappaB affects tumor progression in a mouse model of malignant pleural effusion. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 34 (2), 142-150 (2006).
- Shen, J., et al. The dosage-toxicity-efficacy relationship of kansui and licorice in malignant pleural effusion rats based on factor analysis. Journal of Ethnopharmacology. 186, 251-256 (2016).
- Nel, A., Xia, T., Mädler, L., Li, N. Toxic potential of materials at the nanolevel. Science. 311 (5761), 622-627 (2006).
- Maynard, A. D., et al.
- Duan, J., et al. Toxic effects of silica nanoparticles on zebrafish embryos and larvae. PLoS One. 8 (9), 74606 (2013).
- Skuland, T., Ovrevik, J., Låg, M., Schwarze, P., Refsnes, M. Silica nanoparticles induce cytokine responses in lung epithelial cells through activation of a p38/TACE/TGF-α/EGFR-pathway and NF-κΒ signaling. Toxicology and Applied Pharmacology. 279 (1), 76-86 (2014).
- Oberdörster, G., Oberdörster, E., Oberdörster, J. Nanotoxicology: an emerging discipline evolving from studies of ultrafine particles. Environmental Health Perspectives. 113 (7), 823-839 (2005).
- Song, Y., Li, X., Du, X. Exposure to nanoparticles is related to pleural effusion, pulmonary fibrosis and granuloma. European Respiratory Journal. 34 (3), 559-567 (2009).
- Song, Y., et al. Nanomaterials in humans: identification, characteristics, and potential damage. Toxicologic Pathology. 39 (5), 841-849 (2011).
- Zhu, X., et al. Polyacrylate/nanosilica causes pleural and pericardial effusion, and pulmonary fibrosis and granuloma in rats similar to those observed in exposed workers. International Journal of Nanomedicine. 11, 1593-1605 (2016).
- Havelock, T., et al. Pleural procedures and thoracic ultrasound: British Thoracic Society Pleural Disease Guideline 2010. Thorax. 65, Suppl 2 61-76 (2010).
- Jha, A., Ullah, E., Gupta, P., Gupta, G., Saud, M. Sonography of multifocal hydatidosis involving lung and liver in a female child. Journal of Medical Ultrasound. 40 (4), 471-474 (2013).
- Hikaru, N., et al. Histological analysis of 70-nm silica particles-induced chronic toxicity in rats. European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 72, 626-629 (2009).
- Sun, L., et al. Cytotoxicity and mitochondrial damage caused by silica nanoparticles. Toxicology in Vitro. 25, 1619-1629 (2011).
- Hikaru, N., et al.
- Liu, T. I., et al. Single and repeated dose toxicity of mesoporous hollow silica nanoparticles in intravenously exposed mice. Biomaterials. 32, 1657-1668 (2011).
- Ding, M., et al. Diseases caused by silica: Mechanisms of injury and disease development. International Immunopharmacology. 2, 173-182 (2002).
- Shen, J., et al. The dosage-toxicity-efficacy relationship of kansui and licorice in malignant pleural effusion rats based on factor analysis. Journal of Ethnopharmacology. 186, 251-256 (2016).
- Ji, J. H., et al. Twenty-eight-day inhalation toxicity study of silver nanoparticles in Sprague-Dawley rats. Inhalation Toxicology. 19 (10), 857-871 (2007).
