Summary
Vascularized kompositt allograft tilbyr liv-endre fordeler til transplantasjon mottakere, men de biologiske årsakene til pode avvisning og vasculopathy fortsatt dårlig forstått. Den gnager kirurgiske modellen som presenteres her tilbyr en reproduserbar, klinisk relevant modell for transplantasjon, slik at forskerne kan evaluere avvisning hendelser og potensielle terapeutiske strategier for å hindre deres forekomst.
Abstract
Vascularized Composite allografting (VCA) er et relativt nytt felt i rekonstruktiv kirurgi. Kliniske prestasjoner i humant VCA inkluderer hånd og ansikt transplantasjon og, mer nylig, bukvegg, livmor, og urogenitale transplantasjon. Funksjonelle resultater har overgått de første forventningene, og de fleste mottakerne nyter en bedre livskvalitet. Men, som klinisk erfaring akkumuleres, kronisk avvisning og komplikasjoner fra immunsuppresjon må tas opp. I mange tilfeller der det har vært feil på vasculopathy, har den utløsende patologi blitt iskemiske. De biologiske mekanismene ved akutt og kronisk avvisning forbundet med VCA, spesielt iskemiske vasculopathy, er viktige forskningsområder. Men på grunn av svært lite antall VCA-pasienter er evalueringen av foreslåtte mekanismer bedre adressert i en eksperimentell modell. Flere grupper har brukt dyremodeller for å løse noen av de relevante uløste spørsmålene i VCA-avvisning og vasculopathy. Flere modell design som involverer en rekke arter er beskrevet i litteraturen. Her presenterer vi en reproduserbar modell av VCA heterotopic hindlimb bentap osteomyocutaneous klaff i rotte som kan benyttes for translational VCA forskning. Denne modellen gjør det mulig for den serielle evalueringen av pode, inkludert biopsier og ulike Imaging modaliteter, og samtidig opprettholde et lavt nivå av sykelighet.
Introduction
Rekonstruktiv kirurgi for katastrofale vevs tap fra amputasjon, blast skader, ondartet og medfødte defekter er begrenset av tilgjengeligheten av vev fra pasienten og den ekstra sykelighet forårsaket på donor stedet. I noen tilfeller, for eksempel brenne ofrene eller firkant amputerte, levedyktig vev for gjenoppbygging er ikke tilgjengelig fra pasienten. I 1964 ble den første moderne hånd transplantasjon utført i Ecuador. Selv om dette var en teknisk suksess, immunsuppresjon tilgjengelig på den tiden var utilstrekkelig for å hindre avvisning, og pode gikk tapt på mindre enn 3 uker1. I 1998 og 1999, ble den første hånden transplantasjon i den moderne æra av immunsuppresjon utført i Lyon, France2 og Louisville, KENTUCKY, USA3. For første gang, rekonstruktiv kirurger kunne erstatte like med like. Ansikt transplantasjon ble først utført i 20054, og en rekke andre VCA-er er nå rutinemessig utført, slik som bukveggen5, livmor og urogenitale transplantasjon6.
I motsetning til fast organ transplantasjon, involverer de fleste VCA-teknikker tilstedeværelsen av den svært antigen donor huden. Klinisk erfaring har fastslått at den akutte avvisningen av huden er relativt lett å kontrollere, men kan bidra til kronisk avvisning av underliggende vev og fartøy, som ikke reagerer godt på behandling7. Den vaskulære dysfunksjon forbundet med en alloimmune respons er en mer faretruende hindring for feltet VCA7. Macrovasculopathies fører til et bruks underskudd, forsinket helbredelse og proinflammatoriske forhold. Både confluent aggressive stor-fartøy vasculopathy og fokal intimal er forekomme i hånden transplantasjon mottakere7. I tillegg microvasculopathies trolig bidra til VCA komplikasjoner også, og kan også føre til avvisning hendelser. Mens både immun og nonimmune faktorer trolig spille en rolle i vasculopathy av hånden transplantasjon mottakere, er de spesifikke mekanismer fremme flate fartøy dysfunksjon i VCA ikke kjent, spesielt i sammenheng med lav kvalitet, kronisk avvisning. Disse ubesvarte spørsmålene nødvendiggjør utviklingen av et dyr VCA-modell som vil muliggjøre den serielle vurderingen av pode under klinisk løpet av VCA-avvisning/vedlikehold og vasculopathy. En slik modell vil gi innsikt i avvisningen og vasculopathy i møte med immunsuppresjon, smittsomme Challenge, og/eller annen postoperativ traumatisk skade8,9.
Presentert her er en allogene rotte VCA heterotopic hindlimb bentap osteomyocutaneous klaff modell. Basert på tidligere publiserte VCA-modeller, er denne prosedyren teknisk lett å utføre, reproduseres i et stort antall, og utstillinger minimal sykelighet og ubehag til mottakeren dyret. Denne modellen er utformet for å muliggjøre kliniske og histopathological vurderinger av VCA-aksept kontra avvisning, og gir en mulighet til å evaluere underliggende immun-og nonimmune mekanismer som er involvert i avvisning.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle dyr operasjoner ble utført i samsvar med protokoller godkjent av University of Louisville institusjonelle Animal Care og use Committee (IACUC-godkjent protokoll 18198) og National Institutes of Health (NIH) guide for omsorg og bruk av Laboratory dyr10. Fire måneder gammel mann brun-Norge (RT1. An) og 4-måneders-gamle mannlige LEWIS (RT1. Al) rotter ble brukt som henholdsvis VCA donor og mottakere.
1. donor Allograft Harvest
- Sedate donor dyret bruker fordampet isoflurane påføres gjennom et kammer.
- Barbere pode donor området (hindlimb bentap), samt lyske og buk områder. Etter det, behandle med riktige krem for å redusere mengden av Fuzz igjen av Clippers.
- Dypt bedøve donor dyr som bruker intraperitoneal (IP) ketamin (60 mg/kg)/xylazine (15 mg/kg)/acepromazine (2 mg/kg). Administrer en startdose på 0,2 mL/100 g kroppsvekt og tilleggs doser på 0,2 mL hver time. For enkelhets skyld er det valgfritt å utføre dette trinnet før trinn 2.
- Kontinuerlig overvåke dyr mens under anestesi for åndedrett, kroppstemperatur, og dybden av anestesi, ved hjelp av tå klype tilbaketrekking refleks test.
- Administrer 30 U av heparin-løsningen subkutant (SC) i scruff området før operasjonen for å hindre blodpropp.
- Bruk en maske, et hode deksel, en en gangs isolasjon kappe, og en gangs hansker.
- Plasser donor dyret liggende på en varmepute. Produser et sterilt kirurgisk felt ved å fikse, skrubbe og drapering operasjonsområdet, inkludert både ventrale og rygg delene av benet. Don sterile hansker.
- Lag en 3 cm hud snitt i lysken Concavity bruker skalpell blad #15 og reflektere lysken fett puten sideveis ved hjelp av Iris saks.
- Utsett de vanlige lår karene og Plasser en wire krok med et elastisk bånd for å trekke tilbake magemusklene.
- Bruke en dissekere mikroskop (40x), analysere pedicle proksimalt fra fremveksten av de vanlige lår fartøy under lysken leddbånd og distally til samløpet av popliteal fartøy i pode.
- Ved hjelp av microclips og bipolar gullsmeder ' tang, ombinde og dele de store arteriell og venøs grener, slik som lateral cirkumfleks lår fartøy, overfladiske caudal epigastriet fartøy, saphenavenen arterien, og proksimale caudal lår fartøy, å mobilisere de viktigste lår fartøyene. Cauterize noen små grener med fin bipolar tang.
- Lag en hud snitt fra sentrum av den forrige huden kuttet langs ventrale siden av hindlimb bentap, til ankelen området, ved hjelp av Iris saks.
- Skjær Gracilis muskelen, så vel som de andre adductor musklene under det, i en vertikal måte å avdekke og ombinde i midtre proksimale genicular fartøy, dyp-forgrening små fartøy, og ischias nerven.
Merk: På dette punktet, på et eget kirurgisk bord, bør den andre kirurgen intubere og bedøve (2,5%-3% isoflurane) mottakeren dyr; Dette gjør at kirurger til å forberede mottakeren kirurgiske området i tid for pode plassering og minimere pode ' s iskemiske tid. - På donor dyret, gjør circumferential huden snitt på nivået av kneet og ankelen. Disarticulate kneet og ankelen, fjerne overflødig muskler og vev, og gjøre en vertikal hud snitt på rygg siden av hindlimb bentap å frigjøre pode. På dette punktet pode (sammensatt av fibula og Tibia, dekket med beslektede muskler og hud øya næret av sin hulle) er koblet bare av pedicle.
- Plasser små klemmer så proksimalt som mulig på lårarterien og vene, og skjær pedicle så proksimalt som mulig, nær lysken leddbånd.
- For å spyle ned pode av blod, injisere heparinisert saltvann (30 U/mL) i lårarterien ved hjelp av en 27 G Flushing stump kanyle.
Merk: Strekke av arterien før heparin-flush gir enkel tilgang for innsetting av kanyle. Under flush, nøye overvåke strøm fra lår venen. Når klar væske kommer ut av lår venen, stopp flush. - Pakk den isolerte pode i varmt saltvann-gjennomvåt gasbind og transportere den umiddelbart til mottakeren dyrets bord. På denne tiden, mottakeren kirurgiske området bør allerede være forberedt på vaskulær anastomose.
- Etter pode innhøstingen, umiddelbart euthanize giveren rotte via pneumotoraks.
2. mottaker transplantasjon kirurgi
- Etter sedasjon induksjon ved hjelp av fordampet isoflurane påføres gjennom et kammer, dypt bedøve mottakeren dyret via en ventilator-kontrollerte endotrakeal tube og 2,5%-3% isoflurane.
Merk: På denne scene, det donor rotten er fremdeles anesthetized. - Kontinuerlig overvåke hjertefrekvens, respirasjonsfrekvens, kroppstemperatur, og dybden av anestesi av mottakeren dyr, ved hjelp av toe klype tilbaketrekking refleks test.
- For å hindre dehydrering og hypoglykemi, injiserer du 2 mL lactated løsning og 2,5% druesukker subkutant i begynnelsen og ytterligere 2 mL ved slutten av operasjonen.
- Barbere det lyske område, så spandere med riktige kremen for at nedskrive beløpet av Fuzz igjen av det avklipt.
- Bruk en maske, et hode deksel, en en gangs isolasjon kappe, og sterile hansker.
- Plasser dyret liggende på en varmepute. Påfør øye salve for å hindre at hornhinnen skrubbsår under anestesi. Produser et sterilt kirurgisk felt ved å fikse, skrubbe og drapering operasjonsområdet.
- Lag en 3 cm hud snitt i lysken Concavity bruker skalpell blad #15 og reflektere lysken fett puten sideveis ved hjelp av Iris saks.
- Utsett de vanlige lår karene og Plasser en wire krok med et elastisk bånd for å trekke tilbake magemusklene.
- Ombinde og dele Murphy grener.
- Ved hjelp av 10-0 nylon avbrutt sting, anastomose donor fartøy til mottaker fartøy via venøs ende-til-side-teknikk og arteriell ende-til-ende-teknikk. Gradvis slipper klemmene fra arterien og deretter venen. Overvåk anastomotiske nettsteder for blødning og legge til ekstra sting hvis nødvendig.
- Visuelt vurdere vaskulær anastomose for å sikre effektiv pode reperfusion.
- Innfelt den pode inn i lysken lommen og orientere den opp ned, med ankelen felles overlegen og kneleddet dårligere.
- Ved hjelp av strammer sting, sikre pode til tilstøtende muskler. Lukk huden via avbrutt horisontal mattress hud absorberbare 4-0 sting.
- Fjern mottakeren dyret fra anestesi og avvenne den av ventilatoren. Plasser dyret på en varmepute for termisk støtte.
Merk: Den totale driftstiden er mellom 3 til 4 timer, avhengig av kirurgen erfaring og bekjentskap med kirurgisk prosedyre. - Administrer meloksikam (1 mg/kg) subkutant for smerte undertrykking og skjerm til dyret er fullstendig gjenopprettet og mobilt.
3. VCA-mottaker overvåking
- Huset mottakeren rotter enkeltvis og dataskjerm seg daglig for klinisk underskriver av smerte, dehydrering, vekt forlis, og avtatt aktivitet foruten inngrep dårlig (for det for det første 48 – 72 h) eller avslag. Administrer meloksikam subkutant (1 mg/kg) daglig de første 3 dagene for smerte undertrykking.
- Basert på forsknings endepunktet velger du et immunsuppressiva legemiddel som skal administreres.
4. histologi
- Under inhalert isoflurane anestesi (2,5% – 3%), få den serielle huden og underliggende muskel biopsier fra donor pode på ønsket tidspunkt poeng. Huden bør være skrubbet og drapert før få en biopsi, og et sterilt felt og teknikk skal utføres.
- Lukk såret med en til to masker, ved hjelp av absorberbare 4-0 sting. Returner dyret til buret sitt og la det gjenopprette fra anestesi.
- Fest biopsied vev i separate rør i 10% formalin.
- På Terminal tid punkt og under inhalert isoflurane anestesi (2,5% – 3%), ta en større hud biopsi som spenner over donor/mottakergrensen. Nøye finne fartøyet leiekontrakten pair på stedet av anastomoser; riktig område vil være tydelig på grunn av sting. Ta de ønskede fartøy prøvene fra arterien og/eller vene. Fix alle prøvene separat i 10% formalin. Etter innsamling av vevsprøver, og mens dyret er fortsatt under isoflurane anestesi, umiddelbart euthanize dyret via pneumotoraks.
- Ved hjelp av en vev prosessor (eller andre foretrukne embedding teknikk), parafin-embed hver biopsi i sin egen blokk. For hud prøver, orientere vevet slik at alle epidermal og dermal lag kan sees i en enkelt skive. For fartøy prøver, orientere fartøyene slik at tverrsnitt kan fås.
- Bruk en mikrotomen til å kutte 6 μm tykke seksjoner og bruke dem på lysbilder for hematoksylin og eosin (H & E) farging.
- Stain for H & E ved hjelp av en standard protokoll.
- Få representative bilder av alle ønskede vevsprøver ved hjelp av brightfield mikroskopi teknikker.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Rotta VCA heterotopic hindlimb bentap osteomyocutaneous klaff modellen gir mulighet for langsiktig allograft overlevelse under immunsuppresjon. Modellen er pålitelig, reproduserbar og enkel å utføre. Klaffen er godt gjemt i lyske området og utgjør minimal sykelighet og ubehag til dyret. Huden presentasjonen er en klinisk manifestasjon av allograft overlevelse og avvisning (figur 1). Klaffen design gjør det mulig for brutto klinisk overvåking og skaper en mulighet for ulike Imaging teknikker, for eksempel laser Doppler (figur 2). Serial biopsier av hud, muskel, og arterier gjør det mulig å oppnå histopathological oppfølging og analyse på ulike avvisning stadier (Figur 3).
Figur 1 : Representative bilder fra transplanterte dyr. (A) Syngeneic VCA lang tids overlevelse, uten immunsuppresjon behandling, på postoperativ dag 45 (Pod 45); merke forskjellen i retning av pels vekst på grunn av pode er invertert orientering. (B) allogene VCA, behandlet daglig med et immunsuppressiva legemiddel, på Pod 5. (C) allogene VCA lang tids overlevelse, behandlet daglig med et immunsuppressiva legemiddel, på Pod 40; oppmerksom på normal pels vekst som indikerer korrekt mengde av pode, uten tegn til avvisning. (D) allogene VCA i avslag på POD 33. Immunsuppresjon behandling ble stoppet helt på POD 14; merke til de kliniske tegn på avvisning (hudatrofi, avskalling, tap av pels). Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2 : Laser Doppler Imaging system for å overvåke overfladisk hud revaskularisering av allograft. Allograft som ble presentert ble overvåket på postoperative dager 4, 14 og 64. Panelene til venstre viser blod fra den målte av Doppler Imaging, mens panelene til høyre viser området blir avbildet av Doppler. Legg merke til overgangen fra minimal blod-umiddelbart post-VCA til full revaskularisering av klaffen på dag 64. Denne allograft ble holdt under riktig immunsuppresjon uten tegn til avvisning. Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 3 : H &Amp; E histopatologi av allograft i syngeneic kontra allogene transplantasjon. (A) hud biopsi av en syngeneic ALLOGRAFT på Pod 45 (10x forstørrelse); merke til normal morfologi av huden komponenter (epidermis, adnexa, og ingen tegn til mononukleære celle infiltrasjon). (B) hud biopsi av en allogene allograft i AVVISNING på Pod 75, behandlet daglig med en lavere dose av en immunsuppressiva (10x forstørrelse); Merk epidermal atrofi, adnexa atrofi, mononukleære celle infiltrasjon, inflammasjon infiltrasjon, og kapillær trombose. (C) muskel biopsi av en syngeneic ALLOGRAFT på Pod 45 (10x forstørrelse); merke til normal morfologi av striated muskelen. (D) muskel biopsi av en allogene allograft i AVVISNING på Pod 98, behandlet daglig med en lavere dose av en immunsuppressiva (10x forstørrelse); merke til muskel atrofi og mononukleære celle infiltrasjon. (E) lår arterie biopsi av en syngeneic ALLOGRAFT på Pod 45 (20x forstørrelse); merke til normal morfologi av arterien. (F) lår arterie biopsi av en allogene allograft ved AVVISNING på Pod 98, behandlet daglig med en lavere dose av en immunsuppressiva (20x forstørrelse); merke til intimal, smale lumen og inflammasjon infiltrasjon. Scale bar = 200 μm (A-D); 100 μm (E og F). Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
I utviklingen av denne modellen av VCA, ble flere viktige spørsmål vurdert. Først var det viktig å inkludere intakt bein (Tibia og fibula), benmarg, og huden i pode. Mens klinisk hånd transplantasjon fra voksne donorer ikke overføre betydelige mengder aktivt blodkreft marg, studier av rollen til benmargen nisje er bedre speilet ved hjelp av en intakt, vascularized bein i stedet for et kutt lange bein, noe som resulterer i fibrose i den eksponerte margen. Videre reduserer den lukkede Ben osteomyocutaneous klaff design risikoen for infeksjon og blødning. Både benmargen og huden er svært immunogenic vev, som kan brukes til å utløse en immunrespons hvis ønskelig. For det andre var det ikke nødvendig for pode å være funksjonell, eliminerer behovet for en orthotopic modell som krever komplekse osteosyntese og re-enervation av pode. Dette forhindrer også noen av de velkjente plagsom konsekvensene av orthotopic modeller, for eksempel en langvarig kirurgisk prosedyre og dyr ubehag11,12. Det er imidlertid viktig å merke seg at heterotopic design ikke tillater funksjonelle utfallsmål av bein og brusk, samt muskel funksjon, som alle er av stor interesse for VCA-forskning. For det tredje måtte pode være tilgjengelig for avbildnings systemer, klinisk oppfølging og seriell biopsier. Til slutt, for gjennomstrømming formål, de pode operasjoner som trengs for å være lett utføres uten komplikasjoner. Med tanke på disse vurderingene, ble det utviklet en modifisert rotte osteomyocutaneous modell av VCA, der den hindlimb bentap mellom kneet og ankelen til giveren (brun-Norge), inkludert overliggende hud og tilhørende blodkar, ble transplantert inn i lysken på mottakeren (Lewis). I dette tilfellet skjedde den vaskulære forsyningen til pode via lårarterien og vene anastomoser.
Fordi huden er en viktig nøkkelfaktor for å overvåke VCA-avvisning, ble det tatt spesiell forsiktighet ved utarbeidelse av pode for å bevare den lille arterien hulle som støtter hud behandling. Da vi etablerte denne modellen, utførte vi foreløpige eksperimenter ved hjelp av indocyanine grønne (ICG) angiografi (resultater ikke vist) for å bekrefte modellens hud modell design.
Siden pode er orientert opp ned, slik at den nedre delen av pode er overlegen og proksimale del av pode er dårligere, en lang pedicle er nødvendig for å unngå knekk. Derfor bør det understrekes at giver lår skipene skal deles så proksimalt som mulig og at mottakeren lårarterien skal fordeles så i det som mulig.
Den samtidige deltakelse av to kirurger er anbefalt under den endelige forberedelse/isolering av donor pode; en kirurg bør fullføre pode isolasjon, mens den andre kirurgen anesthetizes og intubates mottakeren dyret og begynner å forberede fartøyene for anastomoser. Hvis plassen og utstyret er tilgjengelig, kan en tredje kirurg forberede en annen mottaker dyr og begge donor beina kan brukes til VCA-blod. Kirurger må koordinere med hverandre for å sikre minimal pode iskemiske tid før anastomoser. I vår erfaring, de fleste av de postoperative dødelighet er tilskrevet anestesi teknikk. Hvis mulig, anbefaler vi at et annet medlem av teamet skal ha ansvaret for anestesi overvåking under operasjonen. Det sier seg selv at, for å kunne utføre denne modellen vellykket, en utdannet kirurg med grunnleggende mikrovaskulær teknikker er nødvendig. Avhengig av kirurgen erfaring, kan modellen oppnås vellykket etter to til seks kirurgi forsøk.
Syngeneic rotter kan brukes som en kontrollgruppe for å gjøre rede for healing dynamikk som ikke er relatert til avvisning. Det kontralateral Ben av mottakeren rotten kunne også bli brukt som administrere, særlig når utføre tenkelig og biopsier.
Pels gjenvekst over den transplanterte huden er en av de beste indikasjoner på vellykket allograft. På den annen side, pels tap, hud erythema, og de-epitelisering kan indikere en avvisning hendelse og redusert blodtilførsel til noen deler av klaffen. I en svært avansert avvisning scenen, kan huden viser nekrose og peeling. En reduksjon i allograft muskel massen er vist i en avansert stadium på grunn av denervation atrofi. Dyrene mister vanligvis kroppsvekt (opptil 10%) i de første 7-10 dager, men så komme og trives. Vi anbefaler å legge ernæringsmessig befestet vann gel (f. eks DietGel Recovery) i de første få postoperative dager for å støttemottakeren rotte ernæring. Inne en meget liten antallet av dyrene (to ute av over 50 eksperimentelle dyrene), vi vitne hud infeksjon og autofagi.
I konklusjonen, den modifiserte modellen av heterotopic, allogene hindlimb bentap osteomyocutaneous VCA pode presenteres her tilbyr en reproduserbar, allsidig transplantasjon paradigme. Serial biopsier og Imaging tilbyr informasjon om tidspunkt løpet av avvisning hendelser. Variasjonen av kliniske symptomer som kan bli studert med denne metoden gjør det til en svært tilpasningsdyktig translational modell med potensial for mange innsiktsfulle funn i årene som kommer.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingenting å avsløre.
Acknowledgments
Dette arbeidet ble støttet av Office of Assistant Secretary of Defense for Health Affairs gjennom Congressionally regissert Medical Research program under Award no. W81XWH-13-2-0057. Meninger, tolkninger, konklusjoner og anbefalinger er de av forfatterne og er ikke nødvendigvis godkjent av Department of Defense.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Acepromazine | Henry Schein | 5700850 | |
| Adventitia Scissors | ASSI | SAS15R8 | |
| Approximator Clamp (Double) | ASSI | ABB2V, ABB22V | |
| Approximator Clamp (single) | FST | 00398-02 | |
| Clamp Applying Forceps | ASSI | CAF4 | |
| Dissecting Scissors | ASSI | SDS18R8 | |
| Flushing blunt needle 27 G | SAI | ||
| Heparin Sodium | Sagent | 25021-400-30 | |
| Isoflurane | Patterson Veterinary | 14043-704-06 | |
| Jewelers Bipolar | ASSI | 103000BPS03 | |
| Jewelers forceps #3 | FST | 11231-30 | |
| Ketamine HCl 100 mg/mL | Zoetis | 043-304 | DEA License required |
| Lactated Ringer Solution | Hospira | 0409-7953-03 | |
| Lactated Ringer Solution + 5% Dextrose | Hospira | 0409-7953-09 | |
| Meloxicam | Henry Schein | 11695-6925-2 | |
| Micro forceps | ASSI | JFAL3 | |
| Micro needle holder | ASSI | B138 | |
| Prograf (Tacrolimus) 5 mg/mL | Astellas | 0469-3016-01 | |
| Suture, 10-0 Prolene | Ethicon | W2790 | or 10-0 Ethilon (2830) |
| Suture, 4-0 Coated Vicryl | Ethicon | J714D | |
| Vessel Dilator Forceps | ASSI | D5AZ | |
| Xylazine | VetOne | 13985-612-50 |
References
- Gilbert Fernandez, J. J., Febres-Cordero, R. G., Simpson, R. L. The Untold Story of the First Hand Transplant: Dedicated to the Memory of one of the Great Minds of the Ecuadorian Medical Community and the World. Journal of Reconstructive Microsurgery. , (2018).
- Dubernard, J. M., et al. Human hand allograft: report on first 6 months. Lancet. 353 (9161), 1315-1320 (1999).
- Jones, J. W., Gruber, S. A., Barker, J. H., Breidenbach, W. C. Successful hand transplantation. One-year follow-up. Louisville Hand Transplant Team. The New England Journal of Medicine. 343 (7), 468-473 (2000).
- Devauchelle, B., et al. First human face allograft: early report. Lancet. 368 (9531), 203-209 (2006).
- Broyles, J. M., et al. Functional abdominal wall reconstruction using an innervated abdominal wall vascularized composite tissue allograft: a cadaveric study and review of the literature. Journal of Reconstructive Microsurgery. 31 (1), 39-44 (2015).
- Kollar, B., et al. Innovations in reconstructive microsurgery: Reconstructive transplantation. Journal of Surgical Oncology. 118 (5), 800-806 (2018).
- Kaufman, C. L., et al. Graft vasculopathy in clinical hand transplantation. American Journal of Transplantation. 12 (4), 1004-1016 (2012).
- Brandacher, G., Grahammer, J., Sucher, R., Lee, W. P. Animal models for basic and translational research in reconstructive transplantation. Birth Defects Research Part C: Embryo Today. 96 (1), 39-50 (2012).
- Kaufman, C. L., et al.
- Committee for the Update of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, Institute for Laboratory Animal Research, Division on Earth and Life Studies, National Research Council of the National Academies. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, 8th edition. , National Academies Press. Washington, DC. (2011).
- Nazzal, J. A., Johnson, T. S., Gordon, C. R., Randolph, M. A., Lee, W. P. Heterotopic limb allotransplantation model to study skin rejection in the rat. Microsurgery. 24 (6), 448-453 (2004).
- Ulusal, A. E., Ulusal, B. G., Hung, L. M., Wei, F. C. Heterotopic hindlimb allotransplantation in rats: an alternative model for immunological research in composite-tissue allotransplantation. Microsurgery. 25 (5), 410-414 (2005).
