Pathologie d’expansion : une méthode d’imagerie optique à haute résolution d’échantillons de tissus cliniques

La pathologie d’expansion, ou ExPath, est une technique de préparation d’échantillons pour des échantillons biologiques, qui permet à la microscopie optique conventionnelle d’imager des structures à l’échelle nanométrique en les dilatant à l’aide d’un système polymère.

Tout d’abord, prenez une lame d’échantillon de tissu immunocoloré traitée et recouvrez-la d’une solution d’ancrage contenant à la fois des groupes réactifs aux protéines et aux polymères. Le groupe protéique réactif du réactif d’ancrage se lie aux amines des biomolécules dans les cellules.

Ensuite, ajoutez une solution gélifiante appropriée sur l’échantillon et incubez pour permettre sa diffusion à l’intérieur du tissu. Le groupe polymère-réactif du réactif d’ancrage se lie aux monomères libres dans la solution gélifiante, permettant aux biomolécules de s’ancrer au polymère au fur et à mesure de sa polymérisation.

Une fois la polymérisation de l’échantillon terminée, recouvrez la lame d’une solution de protéinase. Les protéinases digèrent les protéines du cytosquelette pour éliminer toute résistance structurelle, permettant aux cellules de se développer sans se rompre. Lors de la digestion enzymatique, l’échantillon