Modèle de pancréatite biliaire aiguë : méthode de génération d’un modèle murin de pancréatite biliaire aiguë par perfusion du canal pancréatique

Le canal pancréatique transporte les enzymes digestives et se connecte au canal cholédoque près de l’intestin. Ces canaux forment un canal où les sels biliaires activent les enzymes digestives avant de sortir dans l’intestin.

Lorsque des calculs biliaires obstruent ce canal, la bile s’écoule vers l’arrière, activant les enzymes digestives dans le pancréas lui-même, entraînant une pancréatite biliaire aiguë - une affection inflammatoire grave. Pour imiter cette condition dans un modèle de souris, préparez une souris anesthésiée en position couchée.

Inciser le haut de l’abdomen, sous la poitrine. Ensuite, tirez la partie supérieure de l’intestin grêle avec le pancréas et fixez ses extrémités latérales pour accéder à la région périampullaire - une structure anatomique complexe qui comprend l’ouverture du canal pancréatique.

Fixez les extrémités proximale et distale du canal cholédoque pour éviter toute fuite vers d’autres organes. Ensuite, connectez une seringue remplie d’une solution de taurocholate de sodium à une pompe à perfusion. Le taurocholate de sodium est un sel biliaire qui active les enzymes pour la digestion des graisses.

Maintenant, insérez l’aiguille dans la région périampullaire et commencez à perfuser à une vitesse et une concentration optimales pendant la durée souhaitée. Après la perfusion, retirez l’aiguille et les sutures. Replacez l’intestin dans le péritoine.

Suturez l’incision. Laissez la souris récupérer. Finalement, le taurocholate de sodium pénètre dans le pancréas et active les enzymes digestives, causant des lésions pancréatiques.

Après avoir vérifié la profondeur de l’anesthésie avec un pincement de l’orteil, nettoyez la région abdominale d’une souris anesthésiée avec une solution de povidone iodée à 5 %. À l’aide d’une tondeuse, retirez les poils entre la poitrine et le bas-ventre et nettoyez une zone chirurgicale d’environ 2 centimètres carrés avec de l’alcool à 70 %. Immobilisez l’animal sur la planche chirurgicale et utilisez des ciseaux pour couper 5 millimètres de peau horizontalement sur la partie supérieure de l’abdomen et 1 centimètre en dessous du processus xiphoïde. Répétez la coupe sur le péritoine.

Pour effectuer la laparotomie avec une exposition minimale de la cavité, à l’aide d’un tracteur, tirez le foie vers la tête à environ 1 centimètre de l’intestin et localisez la région du pancréas et du duodénum. À l’aide d’une pince, soulevez le foie vers la tête de l’animal. En tirant doucement sur la partie de l’intestin grêle, fixez les deux extrémités latérales avec une suture en polypropylène 6-0 pour une meilleure vue de la partie distale du tube du canal cholédoque.

À l’aide d’un clip pour microvaisseaux, occlure temporairement le canal cholédoque proximal. Exposez l’organe hors de la cavité abdominale. Ensuite, faites une occlusion temporaire du canal cholédoque distal avec un 8-0 suture. Pour accéder au canal cholédoque, percez la région périampullaire, qui apparaît comme une partie blanchâtre de la paroi de l’intestin grêle, avec une aiguille de 0,4 millimètre reliée à un tube en polyéthylène de 0,54 millimètre. Démarrez la pompe à perfusion pour une solution de taurocholate de sodium à 2,5 % à une vitesse constante de 10 microlitres pour 10 grammes de poids corporel pendant 3 minutes.

Après la perfusion, retirez le clip du microvaisseau, le 8-0 temporaire suture et l’aiguille d’injection du canal biliaire pancréatique. Suturez l’abdomen avec une suture en polypropylène monofilament non absorbant 6-0. Le temps entre la laparotomie et la suture finale ne doit pas dépasser 30 minutes. Après l’opération, logez les animaux dans des boîtes en polyéthylène garnies de copeaux de bois et d’eau et de nourriture à volonté.