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Commençons par un rat anesthésié présentant des symptômes de sécheresse oculaire auto-immune.
Appliquez une quantité appropriée de colorant à la fluorescéine sur la cornée du rat.
Fermez et ouvrez la paupière du rat pour vous assurer que la fluorescéine se propage uniformément sur la cornée.
Laissez le colorant se déposer et adhérer à la cornée.
Dans la sécheresse oculaire auto-immune, les cellules immunitaires ciblent et attaquent par erreur les glandes lacrymales, ce qui diminue la production de larmes.
Cela conduit à la dessiccation de l’épithélium cornéen et à des dommages à la membrane de Bowman sous-jacente – une zone acellulaire antérieure au stroma.
Les molécules de fluorescéine pénètrent à travers les barrières cornéennes endommagées pour atteindre la couche stromale sous-jacente riche en collagène.
Ici, les molécules de fluorescéine se lient au collagène, ce qui entraîne la coloration des fibres de collagène.
À l’aide d’une technique d’imagerie appropriée, acquérir des images de la cornée colorée.
Analysez le nombre, la surface et l’intensité des taches fluorescentes vertes pour mesurer l’étendue des lésions cornéennes.
Utilisez la scintigraphie à la fluorescéine pour mesurer les lésions cornéennes en ajoutant 2 microlitres de fluorescéine à 0,2 % à la cornée du rat. Avec un doigt ganté, ouvrez et fermez passivement les paupières du rat trois fois pour étaler le colorant fluorescéine à la surface de l’œil.
Après 1 minute, utilisez une seringue de 3 millilitres pour prélever 1 millilitre de solution saline. Ensuite, placez la seringue à environ 2 à 3 millimètres en avant de la cornée et appliquez doucement une solution saline sur l’œil. Avec les lumières de fond éteintes, acquérez des images sous le filtre bleu cobalt d’un microscope d’imagerie oculaire.