Développement d’organoïdes nerveux moteurs dérivés d’iPSC humains à l’aide d’une puce microfluidique
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 5:23 min • July 8th, 2025
Prenez des cellules souches pluripotentes induites humaines, ou iPSC, dans un milieu de cellules souches riche en nutriments avec des inhibiteurs de la Rho-kinase.
Les inhibiteurs pénètrent dans les cellules et bloquent les enzymes rho-kinases, empêchant ainsi la mort cellulaire apoptotique.
Les cellules utilisent les nutriments pour proliférer et s’agréger spontanément pour former un amas de cellules tridimensionnelles appelé sphéroïde.
Progressivement, remplacez le milieu par un milieu d’induction neuronale. Les modulateurs de signalisation du milieu entraînent la différenciation des cellules souches en cellules neurales.
Remplacez-les par un milieu neuronal riche en facteurs de croissance pour différencier les cellules sphéroïdes en motoneurones et former un sphéroïde de motoneurone ou MNS.
Transférez ces MNS dans une puce microfluidique recouverte de polymère contenant un milieu de maturation.
Les facteurs de croissance nerveuse dans le milieu stimulent les axones ou les projections plus longues des neurones à se développer à partir du sphéroïde et à s’étendre à travers le microcanal de la puce.
Cela forme un organoïde du nerf moteur, un modèle tridimensionnel du tissu nerveux
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