Induction d’un infarctus aigu du pont dans un modèle de rat à l’aide d’une stimulation électrique

Fixez un rat anesthésié dans une unité stéréotaxique.

Retirez la fourrure du cuir chevelu et désinfectez le site d’incision. Faites une incision médiane et rétractez la peau pour exposer le crâne.

Retirez le tissu conjonctif pour éviter d’interférer avec la perceuse. Identifiez le bregma comme point de référence pour déterminer les coordonnées du pont, une structure située dans le tronc cérébral.

Percez un trou dans le crâne.

Insérez une sonde dans le trou pour atteindre le pont.

Ensuite, connectez les électrodes à un stimulateur électrique, en fixant l’anode à la sonde pour la stimulation cérébrale et la cathode à l’oreille du rat pour compléter le circuit.

Délivrez une impulsion électrique au pont, induisant des lésions tissulaires localisées ou un infarctus.

Après la stimulation, laissez brièvement la sonde en place pour stabiliser l’effet de stimulation.

Ensuite, retirez lentement la sonde et scellez le site chirurgical avec du ciment osseux.

Suturez l’incision et retournez le rat dans sa cage pour la récupération et l’analyse neurologique.

Préchauffez le coussin chauffant à 37 degrés Celsius immédiatement avant l’anesthésie et fixez la perceuse crânienne au support sur le cadre stéréotaxique. Confirmez l’absence de réponse au réflexe de la pédale chez le premier rat anesthésié et montez le rat sur le cadre stéréotaxique en position couchée sur le coussin chauffant. Positionnez les barres auriculaires au-dessus du conduit auditif pour sécuriser la tête, en veillant à ce que le crâne soit maintenu à l’horizontale pour éviter toute distorsion de l’injection.

Appliquez une pommade sur les yeux de l’animal et utilisez un micro-rasoir pour enlever les poils du crâne. Utilisez un marqueur pour tracer une ligne de 3 centimètres le long de la ligne médiane du crâne à partir de la ligne du canthus latéral bilatéral jusqu’à 0,5 centimètre derrière la fontanelle postérieure, et utilisez un scalpel pour faire une incision médiane le long de la ligne marquée. Utilisez un coton-tige pour enlever le sang et placez un morceau de ruban chirurgical de chaque côté du lambeau de peau pour exposer le crâne.

Utilisez un nouvel écouvillon imbibé de chlorure de sodium à 0,9 % pour retirer délicatement tout tissu conjonctif du crâne et localiser le bregma. Utilisez un marqueur à pointe fine pour indiquer le point central du bregma comme point d’origine. Placez la perceuse à 6 millimètres avant-postérieur, 2 millimètres médial-latéral. Utilisez la perceuse pour effectuer soigneusement une craniotomie de 1 millimètre de diamètre. Ensuite, remplacez la perceuse par une sonde de calibre 22 avec une gaine isolée, avec la pointe placée à 2 millimètres au-dessus de l’extrémité proximale de la gaine.

Insérez la gaine à 7 millimètres dans le cerveau et avancez la sonde le long de la gaine jusqu’à ce que le haut de la sonde soit à 9 millimètres sous la surface du cerveau. Connectez les électrodes à un stimulateur électrique et connectez l’anode à la sonde. Ensuite, connectez la cathode à l’oreille du rat. Ensuite, allumez le stimulateur électrique et réglez la largeur d’impulsion unique sur 4 050 millisecondes, la tension sur 50 volts et le courant sur 4 milliampères.

Laissez la sonde en position pendant cinq minutes après la stimulation, avant de retirer l’appareil du cerveau. Couvrez la craniotomie avec du ciment osseux et laissez le ciment sécher avant d’utiliser des filaments de suture en polyamide 4-0 pour fermer la plaie. Après trois ou quatre points de suture, faites des nœuds chirurgicaux standard 2-1-1. Ensuite, injectez par voie intrapéritonéale au rat 250 microlitres de pénicilline et surveillez le rat toutes les 15 minutes jusqu’à ce qu’il soit complètement réveillé avant de remettre l’animal dans sa cage.