August 25th, 2015
Cet article présente des procédures chirurgicales de reflux gastro-œsophagien chez la souris. Ces modèles sont des outils utiles pour la recherche sur les mécanismes et le traitement du reflux gastro-œsophagien et potentiellement de l’œsophage de Barrett et de l’adénocarcinome de l’œsophage.
L’objectif global de cette procédure est de créer des modèles de reflux gastro-œsophagien chez la souris. Tout d’abord, la préparation d’un modèle de reflux gastrique est montrée ensuite, la configuration d’un modèle de reflux mixte est présentée, suivie de la démonstration de la préparation d’un modèle de reflux duodénal. En fin de compte, le degré de lésion œsophagienne induite par les différents modèles de reflux peut être évalué par analyse histologique.
Généralement, les personnes novices à ce médicament auront du mal en raison de la petite taille de l’œsophage de souris pour mettre en place le modèle de reflux gastrique. Après avoir confirmé le bon niveau d’anesthésie par pincement des orteils, utilisez une tondeuse à cheveux pour raser la zone chirurgicale et appliquez une pommade sur les yeux de l’animal. À l’aide d’une solution de bétadine, stérilisez la peau exposée.
Faites ensuite une incision de deux centimètres sur la ligne médiane supérieure en commençant par le processus xiphoïde vers l’anus. Ensuite, ouvrez la cavité abdominale par la ligne médiane et utilisez une paire de ciseaux pour retirer le xiphoïde. Séparez et coupez les tissus conjonctifs entre le foie et l’estomac.
Ensuite, ligaturez et sectionnez le faisceau de vaisseaux entre la rate et le fond d’œil. Lorsque le fond d’œil a été complètement libéré, tournez légèrement le tissu vers la gauche pour exposer le côté gauche de la jonction gastro-œsophagienne. Ensuite, à l’aide d’une paire de ciseaux tranchants, faites une incision longitudinale de cinq millimètres sur le muscle le long de l’œsophage distal pour exposer l’épithélium.
Ouvrez l’épithélium dans la même direction avec trois incisions pour couper la plupart des quatre estomacs. Ensuite, à l’aide d’une aiguille à pointe conique, placez une suture proline huit O, d’abord à travers l’œsophage, puis à travers les quatre estomacs avec une opposition muqueuse précise à muqueuse. Une suture à six oh proline est utilisée dans cette démonstration afin d’améliorer sa capacité, continuez à placer des sutures régulièrement espacées, à trois à quatre millimètres de l’œsophage à travers les quatre estomacs jusqu’à ce que toute la zone soit ligaturée d’un point à un autre comme illustré après la mise en place de la dernière suture, utilisez une solution saline normale pour nettoyer la cavité abdominale de tout sang et du contenu gastrique restant.
Fermez ensuite la paroi abdominale avec des sutures en soie et la peau avec des clips métalliques pour mettre en place le modèle de reflux mixte. Après avoir exposé la jonction gastro-œsophagienne comme nous venons de le démontrer, séparez doucement la face dorsale de l’œsophage des vaisseaux sanguins situés derrière l’œsophage. Passez un petit coton-tige entre l’œsophage et les vaisseaux sanguins.
Faites ensuite deux incisions longitudinales de cinq millimètres sur la jonction gastro-œsophagienne et deux incisions longitudinales de cinq millimètres sur le bord anti-mésentérique le long de l’extrémité proximale du duodénum, adjacente aux pylori. Ensuite, à l’aide de sutures prolènes ATO interrompues, placez trois à quatre sutures sur le côté dorsal et deux à trois sutures sur le côté avant pour anastomose les incisions avec une opposition muqueuse à muqueuse précise. Retirez ensuite l’embout coupé, lavez la cavité abdominale avec une solution saline normale et fermez la paroi abdominale et la peau comme nous venons de le démontrer pour mettre en place le modèle de reflux duodénal.
Après avoir préparé un modèle de reflux mixte comme nous venons de le démontrer, soulevez soigneusement l’estomac pour exposer l’arrière du tissu, puis exposez les vaisseaux sanguins de la face dorsale de l’œsophage, ligaturez et coupez les vaisseaux sanguins, ligaturez le duodénum au niveau des pori et ligate, et coupez également le mésentère. Ensuite, retirez tout l’estomac, lavez la cavité abdominale avec une solution saline normale et fermez la paroi abdominale et la peau. À la fin de chacune des chirurgies, placez les animaux sur un coussin chauffant avec surveillance jusqu’à ce qu’ils soient complètement rétablis quatre semaines après la chirurgie, l’architecture de l’épithélium de l’œsophage présentera des dommages dus au reflux comme observé dans ces images du tube digestif supérieur.
Chez les souris présentant un reflux gastrique mixte ou duodénal, l’épithélium devient plus épais et la papille s’allonge par rapport aux animaux témoins, une hyper prolifération des cellules épithéliales et une infiltration du tube digestif supérieur par des cellules inflammatoires. Les signes courants de l’œsophagite sont observés dans le modèle de reflux. Les animaux aussi Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en 20 à 30 minutes si elle est bien exécutée.
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Cet article démontre les procédures chirurgicales du reflux gastro-œsophagien chez les souris. Ces modèles sont des outils utiles pour la recherche sur les mécanismes et le traitement de la maladie du reflux gastro-œsophagien et potentiellement l'œsophage de Barrett et l'adénocarcinome œsophagien.