Modèle de l’anse iléale de souris : un modèle chirurgical pour étudier la perméabilité intestinale chez la souris

Dans des conditions pathologiques, la désintégration des barrières épithéliales et endothéliales augmente la perméabilité intestinale, provoquant une fuite du contenu intestinal dans le système vasculaire et la cavité abdominale environnants. La perméabilité intestinale peut être simulée à l’aide d’un modèle d’anse iléale.

Pour commencer, préparez une souris anesthésiée en position couchée. Faites une incision médiane dans l’abdomen. Placez une gaze de coton stérile imbibée d’un tampon approprié sur la zone chirurgicale pour maintenir les organes hydratés pendant l’opération.

Extériorisez l’iléon – la partie distale de l’intestin – et étalez-le sur la gaze pour exposer le mésentère. Identifiez deux sites de ligature dans l’iléon qui sont correctement espacés dans le mésentère et qui sont dépourvus de tout vaisseau sanguin critique. Ensuite, percez le mésentère pour ajouter des ligatures aux sites identifiés.

Ensuite, disséquez l’iléon pour générer une anse iléale isolée avec un apport sanguin intact et une membrane mésentérique. Ensuite, injectez un tampon approprié dans la boucle pour évacuer le contenu des déchets.

Maintenant, ligaturez les extrémités ouvertes de l’anse iléale. À l’aide d’une seringue, injectez de la chimiokine (une suspension de protéine chimiotactique) dans la boucle et faites-la gonfler. Retournez les organes vers l’abdomen.

Suturez l’incision. Laissez la souris récupérer. Finalement, les molécules de chimiokines traversent la paroi iléale dans les vaisseaux sanguins adjacents, provoquant une inflammation et un afflux de leucocytes.

Après avoir réalisé un plan chirurgical d’anesthésie, commencez par frotter la fourrure de la ligne médiane abdominale avec des tampons imbibés d’alcool ou une éponge de gaze imbibée d’éthanol à 70 %. Ne mouillez pas une large zone de fourrure avec de l’alcool pour éviter l’hypothermie. À l’aide de ciseaux, effectuez une laparotomie médiane. Faites une incision horizontale au milieu de l’abdomen et exposez le péritoine en prenant soin de ne pas blesser les organes intra-abdominaux.

Placez de la gaze de coton humide prédécoupée sur la cavité intra-abdominale exposée. Utilisez des cotons-tiges humides pour mobiliser et extérioriser le cæcum, et placez-le soigneusement sur de la gaze de coton humide. Ensuite, mobilisez et extériorisez doucement l’iléon. Déployez au moins 6 centimètres d’iléon terminal sur la gaze de coton humide sans perturber les vaisseaux mésentériques et l’approvisionnement en sang.

Gardez les tissus exposés humides en tout temps avec du HBSS chaud. Identifiez l’artère principale qui alimente l’iléon dans le mésentère près du caechumer. Ensuite, localisez deux sites de ligature dans le mésentère qui sont exempts de vaisseaux sanguins critiques. Saisissez fermement l’iléon terminal à l’aide d’une pince à tissu émoussé et utilisez une pince à pointe fine pour fenestrer le mésentère, en évitant les vaisseaux sanguins.

Placez une suture en soie sur la perforation et faites un nœud chirurgical pour créer la première ligature. Utilisez la règle pour mesurer à 4 centimètres de la première ligature et créez la deuxième ligature. Coupez soigneusement à côté de chaque ligature avec des ciseaux fins pour isoler l’anse iléale de 4 centimètres, en gardant l’apport sanguin et la membrane mésentérique intacts.

Rincez doucement le contenu du segment de l’anse iléale avec du HBSS chaud à l’aide d’une sonde d’alimentation jaune flexible fixée à une seringue de 10 millilitres. Assurez-vous d’évacuer le contenu luminal de la cavité abdominale pour garder le site chirurgical propre. Lister les deux extrémités coupées de l’anse iléale affleurante avec une suture en soie.

À l’aide d’une seringue de 1 millilitre munie d’une aiguille de calibre 30, injectez lentement 250 microlitres de réactif, comme des dextrans FITC ou des chimiokines, dans la lumière intestinale. L’anse iléale va se gonfler, provoquant une distension modérée de la muqueuse.

Fermez la paroi abdominale à l’aide d’un porte-aiguille, d’une pince anatomique et de sutures en soie 3.0 non résorbables avec une aiguille de coupe inversée. Après avoir séché l’animal pour éviter l’hypothermie, placez-le dans une chambre d’anesthésie à température régulée pendant la période d’incubation.