Name: Murin modèle expérimental de tumeur de développement original et péritonéale Métastase via Orthotopique Inoculation avec des cellules de lovaire Carcinome (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-12-09T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 17 s
Description: Découvrez un modèle murin d'inoculation orthotopique pour étudier le développement tumoral et la métastase péritonéale du carcinome ovarien. Cette méthode permet d'analyser la dissémination péritonéale et d'identifier des cibles thérapeutiques potentielles.

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Les auteurs remercient les membres du Département d&#39;obstétrique et de gynécologie et biologie du cancer pour leurs discussions utiles et une assistance technique. Cette étude a été soutenue par une Société japonaise pour la promotion de la science (JSPS) Grant-in-Aid pour la recherche scientifique (15K15604; H. Kajiyama).

Le protocole de traitement suit les lignes directrices pour l&#39;expérimentation animale adoptée par l&#39;Université de Nagoya. 1. Préparation de suspensions de cellules <ol><li> ligne Human ovarien clair carcinome cellulaire. <ol><li> Maintenir ES-2 , les cellules 12 dans du milieu RPMI-1640 avec 10% de sérum de fœtus bovin (FBS) et de la pénicilline / streptomycine (pénicilline: 100 unités / ml, streptomycine 0,1 mg / ml). Les cellules de culture à 37 ° C dans un incubateur à CO2 humidifié à 5%. </li><li> Recueillir les cellules dans la phase logarithmique de croissance à 0,05% de solution d&#39;EDTA / 0,02% de trypsine (trypsine / EDTA). <ol><li> D&#39; abord, enlever les vieux médias de la cuve de culture cellulaire, puis laver les cellules une fois avec du PBS (PBS sans Ca 2+ / Mg 2+, 3 - 4 ml par 25 2 cm). </li><li> Ensuite, ajoutez 1 ml par 25 cm 2 de trypsine / EDTA. Faire tourner la cuve de culture cellulaire pour couvrir la monocouche cellulaire avec de la trypsine / EDTA. Après le retrait et le rejet de trypsine / EDTA, retourner la cellulerécipient de culture dans l&#39;incubateur pendant 3 - 5 min ou jusqu&#39;à ce que les cellules sont détachées. </li><li> Examiner les cellules sous un microscope pour assurer que les cellules se détachent de la surface du récipient de culture cellulaire et flottante. </li><li> Ajouter sérum frais contenant un milieu de croissance pour inactiver la trypsine (5 ml par 25 cm 2), et remettre en suspension les cellules. Transférer les cellules remises en suspension dans un tube de 15 ml conique. </li><li> Centrifuger à 300 xg pendant 5 min. Effectuer centrifugation, soit à 4 ° C ou à température ambiante. Retirez délicatement le surnageant et les cellules avec un milieu de croissance re-suspension (5 ml par 25 cm 2). </li></ol></li><li> Nombre de cellules (par exemple, par l&#39; exclusion trypan bleu) , puis remettre en suspension dans un milieu de croissance à une densité de 2 x 10 8 cellules / ml. Mettre les cellules en suspension sur de la glace. </li></ol></li><li> Thaw matrice extracellulaire congelée (ECM) à base d&#39;hydrogel aliquotes dans un bain de glace. </li><li> Ajouter la suspension de cellules à des aliquotes d&#39;hydrogel à base d&#39;ECM dans un rapport de 1: 1 (dernière cellule concentration: 1 x 10 5 cellules / ul d&#39;hydrogel à base moyen ECM) et bien mélanger. Placer les suspensions cellulaires préparées dans un bain de glace jusqu&#39;à utilisation. </li></ol> 2. Orthotopique Inoculation avec Suspensions cellulaires NOTE: La chirurgie ne nécessite pas une suite dédiée. La chirurgie peut être réalisée sur une paillasse de laboratoire dans une zone de la chambre qui est séparée et a une activité minimale. Une hotte laminaire peut également être utilisé. instruments chirurgicaux stériles doivent être utilisés et les ciseaux ne doivent pas être utilisés pour faire des incisions de la peau. <ol><li> Utilisez la souris nude femelle (BALB / c nu / nu) à 8 semaines d&#39;âge pour ce modèle d&#39;inoculation orthotopique. </li><li> Tout d&#39;abord, anesthésier la souris à l&#39;aide d&#39;inhalation avec de l&#39;isoflurane (2-4%). Vérifiez profondeur de l&#39;anesthésie en vérifiant l&#39;absence de retrait sur l&#39;entreprise pincement de l&#39;orteil. Après la souris est anesthésiée, appliquer une pommade ophtalmique stérile fade aux yeux pour éviter le séchage, si nécessaire. </li><li> Placer la souris anesthésiée sur une opérating ventre côté de la scène vers le bas. Désinfecter la zone chirurgicale plusieurs fois avec l&#39;alcool et un gommage à base de chlorhexidine à base d&#39;iode ou. </li><li> Faire un ~ 2 cm incision verticale près de la colonne vertébrale entre l&#39;arc costal droit et le fémur. Utilisez un champ opératoire stérile autour du site d&#39;incision. Fixer les surfaces incisées de la peau avec des pinces pour maintenir l&#39;ouverture. Note: Retractors peuvent être utilisés à la place des pinces. </li><li> Ensuite, faire une seconde incision (environ 1 cm) au péritoine pariétal sous la première incision pour ouvrir la cavité abdominale. Fixer les surfaces abdominales incisées. Fixez le tissu adipeux qui entoure le tube de l&#39;ovaire et de Fallope ipsilatéral avec une pince pour enlever l&#39;ovaire de la cavité abdominale. Placez délicatement l&#39;ovaire et trompe de Fallope sur de la gaze. Ensuite, placez le ventre du côté de la souris vers le bas sous le microscope de dissection. </li><li> Placer la suspension cellulaire dans une seringue à insuline (1/2 cc, 29 G) juste avant l&#39;injection. injecter soigneusement la suspension cellulaire préparée (1- 2 pi) dans l&#39;ovaire. Pour plusieurs sec, conserver l&#39;aiguille à l&#39;intérieur de l&#39;ovaire pour assurer la gélification de l&#39;hydrogel à base ECM. Après la gélification, les cellules tumorales injectées restent à l&#39;intérieur de l&#39;ovaire. </li><li> retourner soigneusement l&#39;ovaire dans le corps. Suture la seconde incision avec de la soie médical stérile, puis sceller la peau avec des pinces de plaies. </li><li> Après la chirurgie, les souris seront administrés une analgésie (par exemple, le méloxicam, intramusculaire (im) ou sous - cutanée (sc), 0,2 mg / kg) pour la période de 24 heures initiale. </li></ol> 3. Traitement post-opératoire <ol><li> Placez chaque souris dans une cage séparée sur du papier propre avec un pack chaud pour conserver la chaleur de la souris jusqu&#39;à ce qu&#39;il ait repris connaissance suffisante pour maintenir décubitus sternale. Ensuite, retourner les animaux à leurs cages d&#39;élevage et de surveillance. Surveiller les souris par jour pendant 3 - 7 jours après le traitement chirurgical. </li><li> Le suivi post-opératoire des souris <ol><li> En cas de signes de douleur, administrer analgesics quotidienne (par exemple, le méloxicam, im ou sc, 0,2 mg / kg). </li><li> Si les souris présentent des signes d&#39;infection (par exemple, une rougeur, enflure, écoulement), d&#39; administrer une injection quotidienne avec un réactif anti-infectieux (par exemple, la pénicilline, im, 100 000 UI / kg). </li></ol></li><li> Retirez les matériaux de fermeture de la peau 10 - 14 jours après le traitement post-chirurgical. </li></ol> 4. Analyse des tumeurs et des métastases NOTE: La tumeur sera formé à l&#39;injection d&#39;ovaire 2 - 3 semaines après l&#39;inoculation. <ol><li> Sacrifiez les souris par le dioxyde de carbone, et collecter les échantillons (par exemple, les tumeurs, les métastases, organes) 13-15 pour une analyse ultérieure 14,16-20. REMARQUE: si un système d&#39;imagerie in vivo est disponible, les cellules portant des enzymes qui produisent une bioluminescence (par exemple, la luciférase) ou d&#39;une protéine fluorescente (par exemple, GFP) peuvent être utilisées dans ce protocole. Ce protocole modifié fournira des informations utiles pourla dynamique de la propagation des cellules cancéreuses de la tumeur primaire. </li></ol>

<ol><li>Jemal, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+cancer+statistics%5BTitle%5D)+AND+%22CA+Cancer+J+Clin%22%5BJournal%5D)">Global cancer statistics.</a> CA Cancer J Clin. 61 (2), 69-90 (2011).</li>
<li>Kajiyama, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+clinical+outcome+of+patients+with+recurrent+epithelial+ovarian+carcinoma%3A+is+it+the+same+for+each+histological+type%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Gynecol+Cancer%22%5BJournal%5D)">Long-term clinical outcome of patients with recurrent epithelial ovarian carcinoma: is it the same for each histological type.</a> Int J Gynecol Cancer. 22 (3), 394-399 (2012).</li>
<li>Kikkawa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+treatment+of+epithelial+ovarian+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nagoya+J+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Advances in treatment of epithelial ovarian cancer.</a> Nagoya J Med Sci. 68 (1-2), 19-26 (2006).</li>
<li>Yoshikawa, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinicopathologic+features+of+epithelial+ovarian+carcinoma+in+younger+vs.+older+patients%3A+analysis+in+Japanese+women%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gynecol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Clinicopathologic features of epithelial ovarian carcinoma in younger vs. older patients: analysis in Japanese women.</a> J Gynecol Oncol. 25 (2), 118-123 (2014).</li>
<li>Kajiyama, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+SDF-1alpha%2FCXCR4+axis+in+the+enhanced+peritoneal+metastasis+of+epithelial+ovarian+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">Involvement of SDF-1alpha/CXCR4 axis in the enhanced peritoneal metastasis of epithelial ovarian carcinoma.</a> Int J Cancer. 122 (1), 91-99 (2008).</li>
<li>Terauchi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Possible+involvement+of+TWIST+in+enhanced+peritoneal+metastasis+of+epithelial+ovarian+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Metastasis%22%5BJournal%5D)">Possible involvement of TWIST in enhanced peritoneal metastasis of epithelial ovarian carcinoma.</a> Clin Exp Metastasis. 24 (5), 329-339 (2007).</li>
<li>Bronstein, L., Zechner, C., Koeppl, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bayesian+inference+of+reaction+kinetics+from+single-cell+recordings+across+a+heterogeneous+cell+population%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Bayesian inference of reaction kinetics from single-cell recordings across a heterogeneous cell population.</a> Methods. 85, 22-35 (2015).</li>
<li>Guo, W., Zhang, S., Liu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+novel+orthotopic+model+of+breast+cancer+metastasis+to+the+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Oncol+Rep%22%5BJournal%5D)">Establishment of a novel orthotopic model of breast cancer metastasis to the lung.</a> Oncol Rep. 33 (6), 2992-2998 (2015).</li>
<li>Lewis-Tuffin, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Src+family+kinases+differentially+influence+glioma+growth+and+motility%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Src family kinases differentially influence glioma growth and motility.</a> Mol Oncol. , (2015).</li>
<li>Saar, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+tumorgrafts+in+nude+mice%3A+A+new+method+to+study+human+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Prostate%22%5BJournal%5D)">Orthotopic tumorgrafts in nude mice: A new method to study human prostate cancer.</a> Prostate. 75 (14), 1526-1537 (2015).</li>
<li>Zou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((miR-29c+suppresses+pancreatic+cancer+liver+metastasis+in+an+orthotopic+implantation+model+in+nude+mice+and+affects+survival+in+pancreatic+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Carcinogenesis%22%5BJournal%5D)">miR-29c suppresses pancreatic cancer liver metastasis in an orthotopic implantation model in nude mice and affects survival in pancreatic cancer patients.</a> Carcinogenesis. 36 (6), 676-684 (2015).</li>
<li>Lau, D. H., Lewis, A. D., Ehsan, M. N., Sikic, B. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multifactorial+mechanisms+associated+with+broad+cross-resistance+of+ovarian+carcinoma+cells+selected+by+cyanomorpholino+doxorubicin%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Multifactorial mechanisms associated with broad cross-resistance of ovarian carcinoma cells selected by cyanomorpholino doxorubicin.</a> Cancer Res. 51 (19), 5181-5187 (1991).</li>
<li>Bao, L., Matsumura, Y., Baban, D., Sun, Y., Tarin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+inoculation+site+and+Matrigel+on+growth+and+metastasis+of+human+breast+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">Effects of inoculation site and Matrigel on growth and metastasis of human breast cancer cells.</a> Br J Cancer. 70 (2), 228-232 (1994).</li>
<li>Huang, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiological+investigation+on+major+depressive+disorder+in+the+most+heavily+damaged+areas+from+Wenchuan+earthquake+in+2008%5BTitle%5D)+AND+%22Zhonghua+Liu+Xing+Bing+Xue+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">Epidemiological investigation on major depressive disorder in the most heavily damaged areas from Wenchuan earthquake in 2008.</a> Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi. 31 (2), 167-170 (2010).</li>
<li>Ma, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mortality+of+neonatal+respiratory+failure+related+to+socioeconomic+factors+in+Hebei+province+of+China%5BTitle%5D)+AND+%22Neonatology%22%5BJournal%5D)">Mortality of neonatal respiratory failure related to socioeconomic factors in Hebei province of China.</a> Neonatology. 100 (1), 14-22 (2011).</li>
<li>Lin, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serum+levels+of+FGF-21+are+increased+in+coronary+heart+disease+patients+and+are+independently+associated+with+adverse+lipid+profile%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Serum levels of FGF-21 are increased in coronary heart disease patients and are independently associated with adverse lipid profile.</a> PLoS One. 5 (12), e15534(2010).</li>
<li>Liu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lumbar+interspinous+non-fusion+techniques%3A+comparison+between+Coflex+and+Wallis%5BTitle%5D)+AND+%22Nan+Fang+Yi+Ke+Da+Xue+Xue+Bao%22%5BJournal%5D)">Lumbar interspinous non-fusion techniques: comparison between Coflex and Wallis.</a> Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. 30 (11), 2455-2458 (2010).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wave+intensity+analysis+of+carotid+artery%3A+a+noninvasive+technique+for+assessing+hemodynamic+changes+of+hyperthyroid+patients%5BTitle%5D)+AND+%22J+Huazhong+Univ+Sci+Technolog+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Wave intensity analysis of carotid artery: a noninvasive technique for assessing hemodynamic changes of hyperthyroid patients.</a> J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci. 30 (5), 672-677 (2010).</li>
<li>Song, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+transcriptional+profiling+and+preliminary+study+on+heterosis+mechanism+of+super-hybrid+rice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Plant%22%5BJournal%5D)">Comparative transcriptional profiling and preliminary study on heterosis mechanism of super-hybrid rice.</a> Mol Plant. 3 (6), 1012-1025 (2010).</li>
<li>Wan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+analysis+of+variation+of+Han+female+adolescent+bone+development+in+Henan+and+Zhejiang+province%5BTitle%5D)+AND+%22Fa+Yi+Xue+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">The analysis of variation of Han female adolescent bone development in Henan and Zhejiang province.</a> Fa Yi Xue Za Zhi. 26 (2), 97-99 (2010).</li>
<li>Wang, H. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excitation-emission+fluorescence+characterization+study+of+the+three+phenolic+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Guang+Pu+Xue+Yu+Guang+Pu+Fen+Xi%22%5BJournal%5D)">Excitation-emission fluorescence characterization study of the three phenolic compounds.</a> Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi. 30 (5), 1271-1274 (2010).</li>
</ol>

Les auteurs n&#39;ont rien à dévoiler.

Les modèles animaux sont essentiels pour analyser les mécanismes de développement de la tumeur, la progression, la métastase, et l&#39;efficacité des médicaments contre les cellules cancéreuses. Les souris porteuses de cellules cancéreuses d&#39;ovaire humain ont également été utilisés en tant que modèle animal. Ici, nous décrivons une procédure moins invasive pour l&#39;administration des cellules tumorales ovariennes sur un site orthotopique. En utilisant cette procédure, l&#39;inoculation dans l&#39;ovaire par une ap...

Carcinome ovarien épithélial (COE) représente le plus haut taux de mortalité liée au cancer chez les tumeurs malignes gynécologiques 1. EOC est associée à un mauvais pronostic, principalement en raison de son retard symptomatologie, et est souvent associée à de multiples disséminations intrapéritonéale et métastases à distance 2-4. diffusion péritonéale est un processus en plusieurs étapes. Tout d&#39;abord, les cellules tumorales se détachent des lésions primaires et migrent dans la cavité abdominale. Lorsque les cellules tumorales se fixent au mésothélium péritonéal, ils commencent à envahir les tissus à travers le mésothélium 5,6. Afin de mieux comprendre la biologie de la tumeur (par exemple, la progression du cancer et la réponse thérapeutique), des modèles de souris fournissent une mine d&#39;informations. Une xénogreffe de cellules cancéreuses humaines est largement utilisé pour les modèles de souris dans lequel les cellules cancéreuses humaines sont inoculées par voie sous- cutanée, intraperitoneale, intraveineuse, et de manière orthotopique. Un modèle animal orthotopique avec un gempilée tumeur peut produire plus efficacement et avec précision des résultats qui reflètent l&#39;environnement de la tumeur chez l&#39;être humain par rapport à un modèle animal avec une tumeur greffée hétérotopique. Par conséquent, pour de nombreuses tumeurs humaines, des modèles de transplantation orthotopique ont été établis 7-11. Ici, nous décrivons l&#39;inoculation orthotopique de cellules EOC humaines grâce à une approche rétropéritonéale du flanc dorsal, ce qui a limité l&#39;invasivité par rapport à l&#39;inoculation ventral. Cette technique peut fournir une variété d&#39;informations utiles sur EOC, en particulier le mécanisme de diffusion intrapéritonéale.

<table><tbody><tr><td>Matrice matrigel&nbsp ;</td><td>BD</td><td>354234</td><td>hydrogel à base d’ECM</td></tr><tr><td>Seringue à insuline</td><td>TERUMO</td><td>SS-05M2913</td><td>1/2 cc, 29 G x 1/2"</td></tr><tr><td>Aiguille de suture avec suture</td><td></td><td></td><td>11 mm, 3/8, Nylon6-0</td></tr><tr><td>Reflex 7 mm Applicateur de clip de plaie</td><td>CellPoint Scientific</td><td>204-1000</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp ; Clips de bobinage Reflex 7 mm</td><td>CellPoint Scientific</td><td>203-1000</td><td></td></tr></tbody></table>

murin modèle expérimental de tumeur de développement original et péritonéale métastase<em&gt; via</em&gt; orthotopique inoculation avec des cellules de l&#39;ovaire carcinome

Murine Experimental Model of Original Tumor Development and Peritoneal Metastasis via Orthotopic Inoculation with Ovarian Carcinoma Cells

carcinome ovarien épithélial (COE) est associée à un mauvais pronostic, car il montre la diffusion péritonéale. Pour améliorer le pronostic, il est important de contrôler la dissémination peritoneale. Cependant, on ignore encore comment les cellules tumorales se détachent des lésions primaires et attachent à la mésothélium. La mise en place d&#39;un modèle animal approprié est nécessaire pour mieux comprendre le mécanisme de diffusion péritonéale in vivo. Dans l&#39;étude actuelle, nous introduisons le processus de l&#39;injection locale de cellules EOC dans la surface de l&#39;ovaire murin au développement de métastases, y compris le péritoine et des organes éloignés. Femme souris nude (BALB / c nu / nu) à 8 semaines d&#39;âge ont été utilisés. Sous un champ de vision microscopique, les cellules EOC (1 x 10 5 cellules / pl de la matrice extracellulaire moyen (ECM) à base d&#39; hydrogel / ovaire unilatéral / souris) ont été injectés dans les ovaires de souris grâce à une approche rétropéritonéale du flanc dorsal. Cette méthode proposée est un chierss procédure invasive pour la souris et minimise les dommages causés à l&#39;ovaire. Ici, nous décrivons les étapes méthodologiques dans le développement de la formation de la tumeur d&#39;origine et métastatique du COU.

<html> Six souris nues avaient leurs ovaires inoculés avec la claire lignée humaine de cellules de carcinome de cellules ES-2, tel que décrit dans ce protocole. Comme le montre la figure 1A, après 2 semaines, 5 des 6 souris avaient une tumeur de l&#39;ovaire inoculés avec ES-2 cellules, mais il n&#39;y avait pas de tumeur dans l&#39;ovaire controlatéral sans inoculation (utilisé comme témoin). En outre, 2 des 5 souris ont montré plusieurs disséminations péritonéales avec ...

Afin de clarifier le processus en plusieurs étapes de la dissémination peritoneale d&#39;un carcinome de l&#39;ovaire, l&#39;étude actuelle présente un modèle expérimental murin du développement de la tumeur d&#39;origine et métastases péritonéales par inoculation orthotopique avec ces cellules tumorales.

Murin modèle expérimental de tumeur de développement original et péritonéale Métastase<em&gt; via</em&gt; Orthotopique Inoculation avec des cellules de l&#39;ovaire Carcinome

Epithelial ovarian carcinoma (EOC) is associated with a poor prognosis because it shows peritoneal dissemination. To improve the prognosis, it is ...

Le but global de cette procédure est d'observer le développement de la formation de tumeurs primitives et métastatiques dans le carcinome ovarien épithélial. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de l'oncologie gynécologique, telles que la compréhension de la biologie tumorale ou de la dissémination péritonéale. Le principal avantage de cette technique est que l'inoculation orospatique de cellules de carcinome ovarien épithélial humain, ou cellules EOC, est réalisée par une approche rétropéritonéale cultivée sur le flanc dorsal. Pour préparer une lignée cellulaire de carcinome ovarien à cellules claires humain, ensemencez et maintenez les cellules ES2 dans un milieu RPMI-1640 contenant 10 % de FBS et de PenStrep, à 37 degrés Celsius et 5 % de CO2. Pendant la phase de croissance logarithmique, retirez le milieu ancien de la culture et utilisez trois à quatre millimètres de PBS pour laver les cellules une fois. Ensuite, ajoutez un millimètre de trypsine/EDTA et agitez délicatement le récipient pour recouvrir toute la monocouche. Retirez et jetez la solution de trypsine, puis remettez les cellules dans l'incubateur pendant trois à cinq minutes. Après

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L&#39;imagerie in vivo et des traitements thérapeutiques dans un modèle de souris orthotopique de cancer des ovaires

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Cette vidéo décrit le protocole de création d’un modèle expérimental murin pour étudier le développement tumoral et les métastases péritonéales. Ce modèle de cancer de l’ovaire est généré par l’inoculation orthotopique de cellules cancéreuses épithéliales de l’ovaire humain dans les ovaires d’une souris femelle.

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Nous décrivons une plateforme d’imagerie animale non invasive qui permet la détection, la quantification et le suivi de la croissance et de la récidive du cancer de l’ovaire. Ce modèle de xénogreffe intra-péritonéale imite le profil clinique des patientes atteintes d’un cancer de l’ovaire.

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Les métastases du cancer de l’ovaire sont caractérisées par de nombreuses lésions intra-péritonéales diffuses, de sorte qu’il est difficile de quantifier visuellement avec précision la charge tumorale.  Nous décrivons ici une méthode de quantification in situ et ex vivo de la charge tumorale métastatique à l’aide de cellules tumorales marquées à la protéine fluorescente rouge (RFP) et de l’imagerie optique.

Quantification du commerce intra-péritonéale Cancer de l&#39;ovaire Métastase

Le présent protocole décrit l’injection intratibia de cellules d’ostéosarcome pour générer des modèles murins portant des lésions d’ostéosarcome orthotopique et de métastases pulmonaires.

Injection intratibiale de cellules d’ostéosarcome pour générer des modèles murins d’ostéosarcome orthotopique et de métastases pulmonaires

Ce protocole décrit l’établissement d’un modèle tridimensionnel (3D) ex vivo de l’interaction cellule-épiploon cancéreux. Le modèle fournit une plate-forme pour élucider les mécanismes pro-tumoraux dans la niche adipeuse et pour tester de nouvelles thérapies.

Un modèle ex vivo de métastases péritonéales du cancer de l’ovaire à l’aide d’un épiploon humain

Nous présentons ici un protocole étape par étape pour établir les modèles de tumeurs intrapéritonéales et intrabursales afin d’étudier la progression, la métasatisation et la réponse thérapeutique du cancer de l’ovaire. De plus, nous décrivons comment utiliser l’imagerie in vivo non invasive à base de luciférase dans ces modèles pour surveiller la progression tumorale chez la souris.

Modèles tumoraux transplantables cliniquement pertinents pour l’étude du cancer métastatique de l’ovaire et de la réponse thérapeutique chez la souris

Découvrez un modèle murin d'inoculation orthotopique pour étudier le développement tumoral et la métastase péritonéale du carcinome ovarien. Cette méthode permet d'analyser la dissémination péritonéale et d'identifier des cibles thérapeutiques potentielles.

Murin modèle expérimental de tumeur de développement original et péritonéale Métastase via Orthotopique Inoculation avec des cellules de lovaire Carcinome (Vidéo) | JoVE Journal

Murin modèle expérimental de tumeur de développement original et péritonéale Métastase

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