Murin modèle expérimental de tumeur de développement original et péritonéale Métastase via Orthotopique Inoculation avec des cellules de l'ovaire Carcinome

L’objectif global de cette procédure est d’observer le développement de la formation tumorale originale et métastatique dans le carcinome épithélial de l’ovaire. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de l’oncologie gynécologique, telles que la compréhension de la biologie tumorale ou de la défémination péritonéale. Le principal avantage de cette technique est que l’inoculation orospatiale du carcinome épithélial de l’ovaire humain, ou cellules EOC, est réalisée par une approche rétropéritonéale cultivée avec un flanc dorsal. Pour préparer une lignée cellulaire de carcinome ovarien humain à cellules claires, plaquez et maintenez les cellules ES2 dans un milieu RPMI-1640 avec 10 % de FBS et PenStrep à 37 degrés Celsius et 5 % de CO2. Dans la phase de croissance logarithmique, retirez l’ancien milieu de la culture et utilisez trois à quatre millimètres de PBS pour laver les cellules une fois. Ensuite, ajoutez un millimètre de trypsine/EDTA et secouez le récipient pour couvrir toute la monocouche. Retirez et jetez la solution de trypsine et remettez les cellules dans l’incubateur pendant trois à cinq minutes. Après avoir examiné les cellules au microscope pour s’assurer qu’elles se sont détachées et flottent, ajoutez cinq millimètres de milieu de croissance frais contenant du sérum pour inactiver la trypsine et remettre les cellules en suspension avant de les transférer dans un tube conique de 15 millimètres. Centrifuger la suspension à 300 fois G et à température ambiante