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Une méthode d'agrégation cellulaire efficace et flexible pour 3D Spheroid production
Une méthode d'agrégation cellulaire efficace et flexible pour 3D Spheroid production
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JoVE Journal Biology
An Efficient and Flexible Cell Aggregation Method for 3D Spheroid Production

Une méthode d'agrégation cellulaire efficace et flexible pour 3D Spheroid production

Full Text
25,726 Views
07:46 min
March 27, 2017

DOI: 10.3791/55544-v

Sarah M. Maritan*1,2, Eric Y. Lian*1,2, Lois M. Mulligan1,2

1Division of Cancer Biology and Genetics,Queen's University Cancer Research Institute, 2Department of Pathology and Molecular Medicine,Queen's University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a rapid and flexible protocol for generating 3D cell spheroids through cell aggregation. The method is adaptable to various cell types and applicable in assays related to cell migration, invasion, and cell-matrix interactions.

Key Study Components

Area of Science

  • Cell Biology
  • 3D Cell Culture
  • Cell Aggregation Techniques

Background

  • Understanding cell-cell and cell/matrix interactions is crucial for tissue growth.
  • 3D cell spheroids provide a more physiologically relevant model compared to 2D cultures.
  • The use of a non-proteinaceous matrix facilitates easy spheroid formation.
  • This method allows for rapid isolation of spheroids for various assays.

Purpose of Study

  • To develop a protocol for efficient generation of robust cell spheroids.
  • To investigate the effects of the microenvironment on cell behavior.
  • To enhance the understanding of tissue growth dynamics.

Methods Used

  • Preparation of a methylcellulose solution for cell aggregation.
  • Heating and agitation of ultrapure water and methylcellulose powder.
  • Storage of the solution to achieve clarity before use.
  • Application of the method in various cell-based assays.

Main Results

  • Successful formation of 3D cell spheroids from different cell types.
  • Demonstrated ease of spheroid isolation using the non-proteinaceous matrix.
  • Insights gained into cell-matrix interactions in a 3D environment.
  • Potential applications in migration, invasion, and anoikis assays.

Conclusions

  • The protocol provides a versatile approach for 3D cell culture.
  • It can be adapted for various research applications in cell biology.
  • This method enhances the understanding of complex cellular interactions.

Frequently Asked Questions

What types of cells can be used with this protocol?
The protocol is adaptable to multiple cell types, making it versatile for various research applications.
How long does it take to prepare the methylcellulose solution?
Preparation involves heating and agitating the solution, followed by overnight storage, making it a quick process overall.
What are the advantages of using a non-proteinaceous matrix?
It allows for easy and rapid isolation of spheroids without the complications associated with protein-based matrices.
Can this method be used for imaging cell interactions?
Yes, the generated spheroids can be used for imaging and quantifying cell-matrix interactions.
What applications can this protocol support?
Applications include cell migration, invasion, and anoikis assays, among others.

Ici, nous décrivons un protocole rapide et flexible pour la formation de sphéroïdes cellulaires 3D par agrégation cellulaire. Il s’adapte facilement à plusieurs types de cellules et peut être utilisé dans une variété d’applications, notamment la migration cellulaire, l’invasion ou les tests d’anoïkis, ainsi que pour l’imagerie et la quantification des interactions cellule-matrice.

NARRATEUR L’objectif global de cette méthode est de générer efficacement de grandes quantités de sphéroïdes cellulaires robustes par agrégation cellulaire pour leur utilisation dans une variété d’essais cellulaires. Le principal avantage de cette technique est qu’elle utilise une matrice hydrosoluble non protéique pour l’agrégation cellulaire et la formation de sphéroïdes, ce qui permet une isolation facile et rapide des sphéroïdes. Cette méthode peut aider à recueillir de nouvelles connaissances en biologie cellulaire sur les effets des interactions cellule-cellule et cellule/matrice sur la croissance tissulaire dans un microenvironnement tridimensionnel.

NARRATEUR Avant de préparer les agrégats, chauffez 50 millilitres d’eau ultrapure à 80 degrés Celsius et ajoutez 10 grammes de poudre de méthylcellulose. Agitez la suspension jusqu’à ce que les particules soient uniformément dispersées. Ajoutez ensuite de l’eau froide ultrapure à un volume final de 100 millilitres et stockez les particules pendant la nuit à 4 degrés Celsius jusqu’à ce que la solution devienne claire et de couleur paille sans solides visibles.

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