Évaluation de la latéralisation de l'hémisphère avec enregistrement potentiel de terrain local bilatéral dans le cortex moteur secondaire des souris

Cette technique peut être utilisée pour examiner certaines propriétés de base de l’électrophysiologie interrégionale pour la latéralisation de l’hémisphère, ainsi que la connectivité, la directionnalité et le couplage. La mesure électrophysiologique est une méthode sensible et efficace d’évaluation chez les animaux, les activités neuronales. Ce protocole offre un meilleur moyen de s’intégrer dans la synchronisation des signaux électriques.

La compréhension du mécanisme sous-jacent de la latéralisation altérée possible du cerveau dans la pathogénie de la maladie d’Alzheimer, peut fournir de nouvelles idées sur les biomarqueurs potentiels pour le traitement de la maladie d’Alzheimer. Avant la chirurgie, confirmer la profondeur de l’anesthésie de la souris, en effectuant un pincement de la queue ou de l’orteil avec des forceps. Ensuite, placez la souris dans l’appareil stéréotaxique, et fixez sa tête.

Appliquez de l’onguent sur les deux yeux pour les garder humides. Ensuite, rasez la tête et stérilisez la zone. Faire une petite incision de 12 à 15 millimètres, au milieu de la zone rasée.

À l’aide de forceps, retirez doucement le cuir chevelu de la ligne médiane. Ensuite, séparez doucement la peau et retirez le tissu résiduel. Nettoyez le crâne à l’aide de bourgeons de coton enduits de peroxyde d’hydrogène.

Au microscope stéréo, percer deux petits trous, d’un à 1,5 millimètre radii, sur les côtés gauche et droit du crâne, pour permettre l’insertion des microélecrodes d’enregistrement dans les régions M2. Retirer délicatement le dura mater à l’aide d’une aiguille de tungstène. Ensuite, insérez deux microélecrodes d’enregistrement distinctes, remplies de chlorure de sodium molaire de 0,5 molaire, dans les trous, à un angle de 60 degrés, à l’aide de micromanipulateurs mécaniques.

Pour l’enregistrement LFP, abaissez lentement les électrodes de verre gauche et droite aux coordonnées M2. Pour un contrôle de la qualité, testez la résistance de chaque électrode à l’aide de l’amplificateur différentiel. Ensuite, réglez le processus d’enregistrement à 0,1 hertz passe de haut, et 1000 hertz passe basse, avec 1000 fois l’amplification.

Recueillir les données brutes numérisées LFP dans un état stable, pendant au moins 60 secondes, avec la souris respirer uniformément à deux respirations par seconde, sous anesthésie. Après l’enregistrement, soulevez lentement les électrodes hors du cerveau. Enregistrez les données et analysez hors ligne, avec le logiciel d’analyse.

Pour effectuer l’analyse de corrélation croisée, dans le logiciel d’analyse, cliquez sur l’analyse, puis la corrélation de forme d’onde, et importez les données. Ensuite, assignez un signal de canal de forme d’onde pour être le premier canal, et l’autre comme référence. Réglez la largeur comme deux, et compensez comme un seul.

Par la suite, réglez la durée des deux PLF à 100 secondes, en sélectionnant l’heure de départ et l’heure de fin. Ensuite, appuyez sur le bouton processus pour effectuer une analyse de corrélation croisée. Cliquez sur fichier, exportez comme, puis enregistrez les résultats de corrélation croisée correspondant au graphique pop-up résultant en format texte.

Par la suite, supprimez les valeurs de corrélation au moment où les décalages se sont échelons à zéro plus et moins 01 seconde, puis traitez le reste des données de corrélation croisée. Pour effectuer l’analyse de cohérence, exécutez les données dans le logiciel d’analyse. Ensuite, disposez les deux signaux LFP comme les premier et deuxième canaux de forme d’onde, puis réglez la valeur de taille du bloc comme 4096.

La taille du bloc signifie le nombre de points de données utilisés dans le premier pour une transformation réelle. Plus la taille du bloc est grande, meilleure est la résolution de fréquence. Déplacez les lignes pointillées manuellement, pour vous assurer que la précision du temps pour les signaux dans les deux canaux est définie comme la même période.

Appuyez sur le bouton ajouter la zone pour charger la zone et effectuer une analyse de cohérence. Cliquez ensuite sur le fichier et enregistrez comme, pour enregistrer les résultats de cohérence correspondant au graphique pop-up résultant en format texte. Pour voir si la pathologie précoce de la maladie d’Alzheimer nuit à la capacité de latéralisation de l’hémisphère, des LFP extracellulaires ont été enregistrés dans le M2 gauche et droit des souris APP/PS1 et des contrôles de type sauvage, et leur corrélation croisée a été analysée.

Chez les souris de type sauvage, les résultats ont démontré que la corrélation moyenne entre les LPF gauche et droite à des décalages positifs différait considérablement de celle des décalages négatifs, impliquant l’existence d’asymétries hémisphériques dans les zones M2 des contrôles de type sauvage. En comparaison, les LFP gauche et droite des souris APP/PS1 ont montré une synchronisation plus élevée dans le domaine du temps, suggérant une réduction de l’asymétrie entre la gauche et la droite M2. Des oscillations gamma ont ensuite été filtrées à partir des PLL et une analyse de cohérence a été effectuée pour mesurer la similitude des signaux électriques dans la plage de fréquence gamma. Le résultat a montré que la cohérence gamma entre la gauche et la droite M2 chez les souris APP/PS1 était significativement plus élevée que chez les souris de type sauvage, ce qui indique une synchronisation plus élevée et, par conséquent, une latéralisation réduite entre la gauche et la droite M2 chez les souris APP/PS1.

L’uréthane est toxique et cancérigène, donc s’il vous plaît toujours être prudent, et suivez les règlements de sécurité lors de sa manipulation. Il est très important de tester la profondeur de l’anesthésie toutes les heures, afin d’assurer l’enregistrement stable des PL. Le processus d’enregistrement et d’analyse peut être appliqué à d’autres voies cérébrales, en particulier pour les laboratoires qui n’ont pas de systèmes d’enregistrement multicanal chez les animaux en mouvement libre.