Name: Protocole chirurgical pour une grande fenêtre crânienne refermable permettant des enregistrements électrophysiologiques longitudinaux et multimodaux du réseau en mode par défaut de la souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-05-29T16:25:00.000+00:00
Duration: 14 min 34 s
Description: Découvrez un protocole chirurgical en deux phases pour créer une grande fenêtre crânienne refermable chez la souris. Cette méthode permet des enregistrements électrophysiologiques longitudinaux et multimodaux du réseau en mode par défaut avec plus de 1 000 canaux simultanés.

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<table><tbody><tr><td>& micro ; Réseau ECoG & mdash ; 512 canaux personnalisés (2 et 256 ch)</td><td>NeuroNexus</td><td>E256-200-30-80</td><td>Emballage : IH256. Deux 16 et 16 fois ; 16 sous-grilles (chacune de 3,3 mm et multipliées par 3,5 mm) ; 200 & mu ; hauteur m ; 80 & mu ; diamètre de l’électrode m. Enregistrements DMN de surface.</td></tr><tr><td>Bras micromanipulateur gauche à 3 axes</td><td>Instruments de précision mondiaux (WPI)</td><td>504926</td><td>10 & mu ; résolution m ; affichage numérique ; utilisé pour le positionnement de la plaque frontale/sonde pendant la chirurgie</td></tr><tr><td>Bouchon protecteur imprimé en 3D</td><td>En interne (Anycubic Photon Mono 4K)</td><td>N/A</td><td>Conception sur mesure ; imprimé dans une résine UV haute transparence Anycubic ; Fichier STL disponible sur https://github.com/RazBalin/ProtectiveDMN_Cap</td></tr><tr><td>Acétone (qualité de laboratoire)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>179973</td><td>Dégraissage de la surface du crâne et retrait du périoste avant l’application de l’adhésif</td></tr><tr><td>Adson Dura Hook 5 mm (Fine Dura Hook)</td><td>gSource</td><td>gS 25.2570</td><td>Utilisé pour détacher la plaque osseuse de la dure-mère le long du périmètre ; fabriqué à partir de fil de tungstène fin ou similaire</td></tr><tr><td>Résine UV Anycubic High Clear</td><td>Anycubic</td><td>STMGCL-102B&nbsp ;</td><td>Résine photopolymère utilisée avec l’imprimante Anycubic Photon Mono 4K pour les capuchons de protection imprimés en 3D</td></tr><tr><td>Imprimante résine 3D Anycubic Photon Mono</td><td>Anycubic</td><td>PHOTON-MONO-4K</td><td>Utilisé pour imprimer des capuchons de fenêtre protecteurs en résine haute transparente Anycubic</td></tr><tr><td>Lavage & Résine UV Anycubic Machine de Guérison 2.0</td><td>Anycubic</td><td>285-550</td><td>Lavage post-impression et durcissement UV des condensateurs imprimés en 3D</td></tr><tr><td>Bras articulant avec base magnétique (et les temps ; 2)</td><td>Outils Haas</td><td>09-0535</td><td>Avant de tenir et micro ; Sous-grilles ECoG en place sur la surface corticale lors des enregistrements</td></tr><tr><td>LCR artificiel (aCSF)</td><td>Préparation interne</td><td>N/A (En interne)</td><td>recette d’aCSF : 124 mM NaCl, 3 mM de KCl, 26 mM de NaHCO3, 2 mM de CaCl2, 1 mM de MgSO<4/sub>, 1,25 mM KH2PO4, 10 mM de D-glucose ; oxygéner avec 95 % d’O2 / 5 % de CO<sous>2 immédiatement après la préparation. Numéros de catalogue listés séparément.</td></tr><tr><td>Lame microchirurgicale émoussée (scalpel circulaire) & nbsp ;</td><td>Iogen</td><td>374769</td><td>Utilisé pour le grattage de la surface du crâne et le retrait du capuchon</td></tr><tr><td>Buprénorphine (Temgesic)</td><td>Indivior</td><td>BE-112515</td><td>analgésique opioïde ; 0,05 mg/kg de s.c. préopératoire</td></tr><tr><td>Souris C57BL/6JRj</td><td>Janvier Labs</td><td></td><td>Homme ou femme ; Minimum 10 semaines, >20 g de poids corporel au moment de l’opération</td></tr><tr><td>Chlorure de calcium dihydré (CaCl2& middot ; 2H2O)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C-7902</td><td>2 mM ; MW 147.02 ; 0,29 g/L. Préparé comme Ca & times ; 100 actions. Composante de l’aCSF interne.</td></tr><tr><td>Carprofène (Rimadyl)</td><td>Santé animale de Zoetis</td><td>RXRIM-INJ&NBSP ;</td><td>Analgésique AINS ; 5 mg/kg de préopératoire</td></tr><tr><td>Corticostérone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C2505</td><td>Dissolvus dans de l’eau potable pour un modèle de stress chronique / dépression sur 21 jours</td></tr><tr><td>Coton-tige</td><td>&nbsp ; Fisherbrand</td><td>&nbsp ; 22-363-157&nbsp ;</td><td>Sert de poignée pour un dispositif de dure-ponction à 30 g et pour dégraisser la surface du crâne avec de l’acétone</td></tr><tr><td>Colle à la cyanoacrylate & mdash ; Loctite 401</td><td>Adhésifs Henkel</td><td>Loctite 401</td><td>Cyanoacrylate à viscosité fine ; Utilisé pour l’apprêt de surface du crâne, la fixation de plaques de tête et de capuchons</td></tr><tr><td>Perceuse dentaire & mdash ; Prédon K.1070</td><td>Prédominance</td><td>K.1070</td><td>Perceuse rotative à arbre flexible ; Utilisé pour l’amincissement de craniotomies et le forage de trous pilotes</td></tr><tr><td>Dexaméthasone</td><td>Dopharma</td><td>1DEX004</td><td>anti-inflammatoire corticostéroïde ; 2 mg/kg de c.s. préopératoire</td></tr><tr><td>D-glucose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G-7021</td><td>10 mM ; MW 180.20 ; 1,80 g/L. Préparé en glycémie et multipliés ; 100 actions. Composante de l’aCSF interne.</td></tr><tr><td>Mèche de foret en acier Bur rond 1/007W</td><td>Hager & Meisinger</td><td>18089</td><td>Utilisé pour le site de référence et la fenêtre crânienne</td></tr><tr><td>Éthanol 80 % (v/v) - Dilutus A12t</td><td>Berner</td><td>13221132</td><td>Trempage préopératoire des instruments chirurgicaux et de la cagoule laminaire chirurgicale pour la stérilisation</td></tr><tr><td>Appareil d’évacuation des gaz</td><td>Sciences de la vie RWD</td><td>R546W</td><td>Évacue les gaz anesthésiques dans la zone chirurgicale</td></tr><tr><td>Douille de référence plaquée or</td><td>DigiKey</td><td>310-13-102-41-001000</td><td>Implanté au-dessus du cerveville gauche ; sert de terre/référence ECoG</td></tr><tr><td>GRANT Nettoyeur ultrasonore & mdash ; Modèle 17002A</td><td>GRANT Instruments</td><td>17002A</td><td>EAN : 4064343191654. Bain ultrasonique à eau chaude ; utilisé avec le TICKOPUR TR 3 pour le nettoyage des instruments</td></tr><tr><td>Bouillotte et mdash ; Supertech TMP-5B</td><td>Supertech</td><td>TMP-5B</td><td>Maintient la température corporelle à 37 °C ; C pendant toute l’anesthésie</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Piramal Healthcare</td><td>66794-017-25</td><td>Anesthésique par inhalation ; induction 4 %, entretien 1,5 & nDash ; 2.5%</td></tr><tr><td>Kimtech Science, lingettes de précision (tissu non fibreux)</td><td>KIMBERLY CLARK</td><td>7552</td><td>Utilisé avec une pointe pointue pour sécher l’ACSF résiduel et aider l’adhésion de la membrane PDMS à la dure-mère</td></tr><tr><td>Scellant élastomère stérile Kwik-Cast</td><td>Instruments de précision mondiaux (WPI)</td><td>KWIK-CAST-s</td><td>Modèle : KWIK-CAST-S. silicone biocompatible ; utilisé pour créer un joint amovible autour de la membrane PDMS.&nbsp ;</td></tr><tr><td>Stylo UV LED 405 nm</td><td>CureUV</td><td>514424-405</td><td>Utilisé pour guérir le ciment dentaire activé par UV (C-Ram total) lors de l’implantation</td></tr><tr><td>Solution de lidocaïne-épinéphrine</td><td>Orion Pharma</td><td>05 10 31</td><td>Anesthésie locale ; Injection de s.c. sous la peau du cuir chevelu</td></tr><tr><td>Sulfate de magnésium heptahydrate (MgSO4&middot ; 7H2O)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M-7774</td><td>1 mM ; MW 246,48 ; 0,25 g/L. Préparé en mg & temps ; 100 actions. Composante de l’aCSF interne.</td></tr><tr><td>Plaque frontale métallique & mdash ; Neurotar modèle 13</td><td>Neurotar</td><td>Modèle 13</td><td>plaque frontale en titane ; ouverture ronde de 11 mm de diamètre ; fixé au crâne avec du cyanoacrylate et du ciment dentaire</td></tr><tr><td>Adaptateur headstage NeuroNexus :)</td><td>NeuroNexus</td><td>IH256 personnalisé 64 et jours ; 4 Molex&nbsp ;</td><td>Carte adaptatrice personnalisée ; sandwiches chacun et micro ; Sous-grille ECoG entre deux headstages Intan RHD 128-ch</td></tr><tr><td>Sonde Neuropixels 1.0 avec capuchon métallique (& times ; 2)</td><td>IMEC</td><td>PRB_1_4_0480_1_C</td><td>960 sites d’enregistrement ; Tige de 10 mm. Une sonde cible la colonne hippocampique-thalamique-visuelle, l’autre la colonne mPFC</td></tr><tr><td>Châssis NI PXIe-1083</td><td>Instruments nationaux</td><td>PXIe-1083</td><td>Châssis PXI Express à 9 emplacements abritant le module Neuropixels et les cartes NI DAQ</td></tr><tr><td>Module multifonction d’E/S NI PXIe-3839</td><td>Instruments nationaux</td><td>PXIe-3839</td><td>Installé sur châssis NI PXIe-1083 ; utilisé pour la synchronisation et les entrées/sorties auxiliaires</td></tr><tr><td>DAQ multifonction NI PXIe-6363</td><td>Instruments nationaux</td><td>PXIe-6363</td><td>Installé sur châssis NI PXIe-1083 ; E/S analogique et numérique pour la synchronisation</td></tr><tr><td>Nova Microcinerator -&nbsp ; Stérilisateur infrarouge</td><td>Argos Tech</td><td>S3022</td><td>Utilisé pour la stérilisation rapide de tout instrument pouvant toucher des tissus cérébraux exposés</td></tr><tr><td>Microscope binoculaire stéréo Olympus SZ51</td><td>Olympe</td><td>SZ51</td><td>Visualisation chirurgicale ; utilisé tout au long des étapes de craniotomie et d’implantation</td></tr><tr><td>Carte d’acquisition Open Ephys (One Box, 1ère génération)</td><td>Open Ephys</td><td>OEPS-9029</td><td>Réceptions & micro ; Flux de données ECoG via SPI ; matériel open source. Voir open-ephys.org</td></tr><tr><td>Open Ephys GUI</td><td>Open Ephys</td><td>N/A (open source)</td><td>Logiciel gratuit et open source pour l’acquisition d’électrophysiologie. Disponible sur : open-ephys.org</td></tr><tr><td>Chlorure de potassium (KCl)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P-5405</td><td>3 mM ; MW 74.55 ; 0,22 g/L. Composant de l’aCSF interne.</td></tr><tr><td>Phosphate de dihydrogène de potassium (KH2PO4)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P-5655</td><td>1,25 mM ; MW 136.09 ; 0,17 g/L. Composante de l’aCSF interne (Klebs & times ; 10 actions).</td></tr><tr><td>Solution de povidone-iode (BETADINE)</td><td>Takeda</td><td>45 70 28</td><td>Désinfectant topique pour la préparation chirurgicale sur le terrain</td></tr><tr><td>Module d’acquisition PXIe</td><td>Neuropixels</td><td>PXIE_1000</td><td>module au format PXI pour l’acquisition de données Neuropixels 1.0 ; installé dans un châssis NI PXIe-1083</td></tr><tr><td>Connecteur de prise de référence</td><td>DigiKey</td><td>342-10-102-00-591000</td><td>Connecteur d’accouplement correspondant pour la douille de référence ci-dessus ; confirmer le numéro de pièce avec DigiKey</td></tr><tr><td>RHD 128 canaux headstage (et horaires ; 4)</td><td>Intan Technologies</td><td>RHD 128</td><td>Deux étapes principales par & micro ; Sous-grille ECoG ; Confirmer le modèle (par exemple, RHD2132 ou RHD2164)</td></tr><tr><td>Câble d’interface RHD SPI, 0,9 m</td><td>Intan Technologies / Open Ephys</td><td>C3203</td><td>Câble SPI standard reliant les headstages RHD à la boîte d’acquisition Open Ephys</td></tr><tr><td>Pompe à air RWD</td><td>Sciences de la vie RWD</td><td>R510-29</td><td>Assure la circulation de l’air via le circuit d’anesthésie</td></tr><tr><td>Vaporisateur d’anesthésie animale RWD</td><td>Sciences de la vie RWD</td><td>R5835</td><td>Vaporisateur d’isoflurane de précision pour l’induction et le maintien de l’anesthésie</td></tr><tr><td>Scalpel Blade #11</td><td>Swann Morton</td><td>SM0103</td><td>Utilisé pour graver des motifs croisés sur la surface du crâne afin d’améliorer la prise adhésive</td></tr><tr><td>Tondeuse de petits animaux - GT416</td><td>Aesculap Schermaschinen GmbH</td><td>D-98528H</td><td>Utilisé pour tailler le cuir chevelu avant la chirurgie</td></tr><tr><td>Bicarbonate de sodium (NaHCO3)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S-5761</td><td>26 mM ; MW 84.01 ; 2,18 g/L. Composant de l’aCSF interne.</td></tr><tr><td>Chlorure de sodium (NaCl)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S-5886</td><td>124 mM ; MW 58.44 ; 7,25 g/L. Composant de l’aCSF interne.</td></tr><tr><td>SOL-M (aiguille hypodermique stérile 30 G)</td><td>Sol-Millénaire Europe</td><td>113005</td><td>Courbées à 90 et degrés ; à la pointe et fixé sur un tige-coton pour créer un dispositif de ponction à dure-mère</td></tr><tr><td>Bras manipulateur standard, 3 axes GAUCHE (Stoelting)</td><td>Stoelting Co.</td><td>51604</td><td>Utilisé pour l’insertion de la sonde Neuropixels lors des sessions d’enregistrement</td></tr><tr><td>Bras manipulateur standard, 3 axes DROIT (Stoelting)</td><td>Stoelting Co.</td><td>51606</td><td>Utilisé pour l’insertion de la sonde Neuropixels lors des sessions d’enregistrement</td></tr><tr><td>Cadre stéréotaxique &mdash ; RWD F67001</td><td>Sciences de la vie RWD</td><td>F67001</td><td>cadre stéréotaxique standard ; Utilisé pour la stabilisation de la tête et la pose de l’implant référencée par coordonnées</td></tr><tr><td>Stylo de peau au marqueur chirurgical avec règle (encre violette)</td><td>Fannin</td><td>SM0372</td><td>Marqueur cutané chirurgical biocompatible à base de gentiane et violet, utilisé pour définir la craniotomie prévue et l’empreinte de l’implant sur l’os. Résistant à l’amorçage au cyanoacrylate (Loctite 401) et reste visible grâce au dégraissement du crâne et à la fixation de la plae de la tête, permettant un transfert fiable des coordonnées stéréotaxiques à la surface osseuse.</td></tr><tr><td>Kit d’élastomère en silicone SYLGARD 184 (PDMS)</td><td>Dow (Allemagne)</td><td>1673921</td><td>Polydiméthylsiloxane ; coulé dans la finesse (< membranes de 1 mm ; placé sur la surface durale pour protéger le cerveau</td></tr><tr><td>Détergent enzymatique Tergazyme</td><td>Alconox</td><td>1304-1</td><td>Nettoyant à base de protéase utilisé à 1 % (p/v) dans de l’eau osmoside tiède pour le nettoyage des électrodes après la séance (45 minutes de trempage, puis triple rinçage dans de l’eau purifiée).</td></tr><tr><td>Ciment dentaire UV Total C-Ram Automix (Blanc)</td><td>Itena</td><td>R301950</td><td>Modèle : TTCRAM-BLC. résine dentaire curable aux UV ; Utilisé pour le renforcement de la plaque de tête et la fixation de douille</td></tr><tr><td>Solution de nettoyage ultrasonique (TICKOPUR TR 3)</td><td>&nbsp ;Dr. H. Stamm GmbH</td><td>TR-3-913&nbsp ;</td><td>Concentré à base d’acide citrique ; Utilisé dans le bain ultrasonique pour le nettoyage post-chirurgical des instruments</td></tr><tr><td>Gel pour les yeux Viscotears 2 mg/g</td><td>Alcon</td><td>503849</td><td>Pommade lubrifiante oculaire à base de carbomer ; appliquée sur les cornées pendant l’anesthésie pour éviter le séchage</td></tr><tr><td>Écran LCD Zeiss à source de lumière froide KL1500</td><td>Carl Zeiss</td><td>KL1500 LCD</td><td>Enluminage à froid par fibre optique pour le champ chirurgical ; Prévient les dommages thermiques</td></tr></tbody></table>

protocole chirurgical pour une grande fenêtre crânienne refermable permettant des enregistrements électrophysiologiques longitudinaux et multimodaux du réseau en mode par défaut de la souris

Surgical Protocol for a Large, Resealable Cranial Window Enabling Longitudinal, Multi-Modal Electrophysiology Recordings of Mouse Default Mode Network

Protocole chirurgical pour une grande fenêtre crânienne refermable permettant des enregistrements électrophysiologiques longitudinaux et multimodaux du réseau en mode par défaut de la souris

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Nous décrivons les méthodes à grande échelle d'enregistrement de plusieurs unités simples et le potentiel de champ local à se comporter les rongeurs avec des sondes de silicium. Disque de fabrication, de fixation de sonde sur le disque et les processus d'implantation de la sonde sont illustrés dans des détails suffisants pour faciliter la reproduction.

À grande échelle d&#39;enregistrement des neurones par des sondes de silicium mobiles à se comporter Rongeurs

Une procédure est décrite pour la manipulation de l'activité du cortex cérébral neurones pyramidaux optogenetically tandis que l'électroencéphalogramme, électromyogramme, et la concentration de lactate cérébral sont surveillés. Enregistrements expérimentaux sont effectués sur les câbles attachés-souris tandis qu'ils subissent spontanément veille / sommeil cycles. Optogenetic matériel est assemblé dans notre laboratoire, le matériel d'enregistrement est disponible dans le commerce.

Électroencéphalographie simultanée, en temps réel Mesure de la concentration de lactate et manipulation optogenetic de l&#39;activité neuronale dans le cortex cérébral des rongeurs

Cette méthode crée un environnement familier tangible pour la souris pour naviguer et explorer pendant imagerie ou unicellulaires microscopiques enregistrements électrophysiologiques, qui exigent la fixation ferme de la tête de l'animal.

Fond plat Plateforme Air-levée: Une nouvelle méthode pour combiner Comportement avec la microscopie ou électrophysiologie sur Awake Rongeurs déplacer librement

Ce protocole présente un procédé pour créer un grand craniotomie unilatéral sur les régions temporales et pariétales du cortex cérébral de souris. Ceci est particulièrement utile pour l'imagerie en temps réel sur une vaste zone d'un hémisphère cortical.

Un grand latéral Craniotomie Procédure pour Mesoscale grand champ d&#39;imagerie optique de l&#39;activité cérébrale

Présenté ici est un protocole pour l’implantation d’une fenêtre crânienne chronique pour l’imagerie longitudinale des cellules du cerveau chez des souris éveillées et retenues par la tête.

Implantation d’une fenêtre crânienne pour l’imagerie in vivo répétée chez des souris éveillées

Ici, nous présentons la méthode de fabrication d’un système optrode avec des fibres optiques pour la livraison de lumière et un réseau d’électrodes pour l’enregistrement neuronal. Des expériences in vivo avec des souris transgéniques exprimant la channelrhodopsine-2 montrent la faisabilité du système pour la stimulation optogénétique simultanée et l’enregistrement électrophysiologique.

Optrode Array pour la modulation optogénétique simultanée et l’enregistrement neuronal électrique

Un système d’enregistrement électroencéphalographique à faible coût combiné à une bobine de taille millimétrique est proposé pour stimuler la stimulation magnétique transcrânienne du cerveau de la souris in vivo. En utilisant des électrodes à vis conventionnelles avec un substrat multi-électrodes flexible sur mesure, l’enregistrement multisite peut être effectué à partir du cerveau de la souris en réponse à la stimulation magnétique transcrânienne.

Système d’enregistrement électroencéphalographique à faible coût combiné à une bobine de taille millimétrique pour stimuler transcrânalement le cerveau de la souris in vivo

Nous avons développé une approche simplifiée et rentable pour la fabrication d’électrodes et avons effectué des enregistrements de signaux dans plusieurs régions chez des souris se déplaçant librement. L’utilisation de l’optogénétique, associée à l’électrophysiologie multirégion et à l’enregistrement du signal calcique, a permis de révéler les activités neuronales dans toutes les régions du modèle d’allumage des crises.

Une méthode intégrée pour la fabrication d’optrodes électrophysiologiques flexibles et pratiques pour l’enregistrement in vivo multi-régions

Ce protocole décrit une méthode permettant d’obtenir in vivo des enregistrements de neurones uniques à haute densité à partir du tronc cérébral de souris fixées à la tête. Cette approche est déployée pour mesurer le potentiel d’action des neurones dans le gris périaqueducal ventrolatéral - une région du tronc cérébral inactive pendant le sommeil paradoxal - avant et pendant l’anesthésie générale.

Enregistrements aigus à une unité et à plusieurs électrodes du tronc cérébral de souris fixées à la tête

Cette étude présente une méthode évolutive, fiable et reproductible pour les enregistrements corticaux chroniques répétés dans un modèle porcin. La méthode a des applications dans divers domaines des neurosciences, notamment la recherche sur la douleur et le diagnostic des maladies neurologiques.

Technique de la fenêtre crânienne chronique pour les enregistrements corticaux répétés pendant l’anesthésie chez le porc

Ici, nous présentons deux protocoles d’enregistrement par micro-électrocorticographie à haute densité (μEcoG) chez le rat et la souris, y compris les méthodes chirurgicales, d’implantation et d’enregistrement. Les enregistrements μECoG sont effectués en combinaison avec l’enregistrement de polytrodes laminaires dans le cortex auditif du rat ou avec la manipulation optogénétique de l’activité neuronale dans le cortex somatosensoriel de la souris.

Études multi-échelles du traitement cortical par intégration de polytrodes laminaires et d’optogénétique avec micro-électrocorticographie chez les rongeurs

Découvrez un protocole chirurgical en deux phases pour créer une grande fenêtre crânienne refermable chez la souris. Cette méthode permet des enregistrements électrophysiologiques longitudinaux et multimodaux du réseau en mode par défaut avec plus de 1 000 canaux simultanés.

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Protocole chirurgical pour une grande fenêtre crânienne refermable permettant des enregistrements électrophysiologiques longitudinaux et multimodaux du réseau en mode par défaut de la souris

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