RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
French
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/67740-v
Julie Ziobro*1, Dalis Collins*2, Chunling Chen3, Yan Chen3, Luis F. Lopez-Santiago3, Gail Rising2, Amber Yanovich2, Jack M. Parent4, Lori L. Isom3
1Department of Pediatrics,University of Michigan, Ann Arbor, 2Unit for Laboratory Animal Medicine,University of Michigan, Ann Arbor, 3Department of Pharmacology,University of Michigan, Ann Arbor, 4Department of Neurology,University of Michigan, Ann Arbor
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Les mécanismes de la mort subite inattendue dans l’épilepsie (SUDEP) sont mal compris et difficiles à traduire à partir des modèles actuels. Les lapins transgéniques peuvent offrir des informations sur ces mécanismes. Nous décrivons une méthode d’enregistrement continu à long terme de l’électroencéphalographie et de l’électrocardiographie dans des chatons de lapin transgénique afin d’évaluer les événements graves pouvant entraîner la mort.
[Instructeur] Pour commencer, positionnez le kit anesthésié en décubitus dorsal sur un coussin chauffant infrarouge contrôlé par un thermomètre rectal. Placez le nez et la bouche dans un masque facial imprimé en 3D personnalisé relié via un connecteur pivotant à un circuit Jackson-Reese sans réinspiration avec un sac de 0,5 litre. Surveillez la profondeur de l’anesthésie à l’aide d’un oxymètre de pouls situé sur l’oreille ou la patte. Placez des serviettes chirurgicales adhésives de chaque côté du kit et couvrez-le d’un grand champ chirurgical. Découpez un trou de taille appropriée dans le champ pour exposer l’abdomen et la poitrine. Ouvrez l’implant sur le champ opératoire et placez des sutures d’ancrage non résorbables dans chacun des trous d’ancrage de l’implant, en laissant une queue de cinq à six centimètres sur chaque suture. Placez l’implant dans un bol de solution saline chaude et stérile jusqu’à ce qu’il soit prêt à être placé. À l’aide d’un scalpel, faites une incision de trois centimètres à travers la peau le long de la linea alba. Et incisez soigneusement à travers le muscle pour ouvrir la cavité péritonéale. Placez ensuite l’implant dans la partie crânienne de la cavité abdominale et positionnez-le à gauche de l’incision. À l’aide d’un trocart, vous pouvez extraire l’électrocardiogramme positif (ECG) et le fil EEG de la cavité péritonéale et de la peau à environ trois ou quatre centimètres à gauche de l’incision. Tunnelisez le fil ECG négatif de deux centimètres à droite de l’incision, permettant à l’implant de s’installer confortablement dans la cavité. Maintenant, fixez l’implant avec des sutures d’ancrage à la paroi ventrale de la cavité péritonéale, en vous assurant qu’aucun intestin n’est piégé. Et fermez la paroi abdominale avec une suture résorbable selon un schéma interrompu. Fermez ensuite l’incision cutanée avec une suture non résorbable selon un schéma interrompu. Tunneliser l’ECG négatif conduit sous-cutané vers la partie supérieure droite du thorax au niveau de la première côte. Disséquez émoussé une poche sous-cutanée pour enrouler lâchement environ 10 centimètres de fil. Coupez tout excès de fil et créez une boucle après avoir attaché l’extrémité exposée au fil isolé avec une suture non résorbable. Fixez la boucle au muscle à l’aide de deux sutures non résorbables. Ensuite, tunnelisez le conduit ECG positif vers la côte inférieure gauche et répétez les étapes démontrées pour le fixer au muscle et fermer l’incision. Enveloppez les fils EEG exposés avec du papier d’aluminium stérile. Laissez un assistant non stérile retirer le drap stérile et l’attache de jambe. Tournez le kit en position couchée, tout en vous assurant que le masque facial reste bien en place en tournant le connecteur pivotant entre le masque facial et le circuit. Ajustez l’oxymètre de pouls et le moniteur Doppler au besoin pour maintenir une surveillance anesthésique continue. Placez ensuite une sonde Doppler sur le cœur. Placez une serviette adhésive stérile sous le côté gauche, pendant que l’assistant tient le paquet de papier d’aluminium contenant les fils. Retirez délicatement les fils du sachet d’aluminium et placez-les sur le champ stérile, puis terminez le processus de drapage avec la serviette stérile. Faites une incision de trois centimètres le long de la ligne médiane du cuir chevelu pour exposer le crâne. Utilisez un trocart pour creuser sous-cutané les dérivations EEG du côté gauche vers le crâne. Ensuite, nettoyez et grattez le périoste des os pariétaux exposés à l’aide d’un scalpel. Insérez une perceuse à main dans un couvercle à ultrasons stérile et guidez une fraise de perceuse d’un millimètre dans la perceuse. Ensuite, percez des trous de bavure bilatéraux dans les os pariétaux, à environ 0,5 centimètre en avant du lambda et 0,5 centimètre latéralement de la suture sagittale. À l’aide d’une pince fine, placez une vis dans le trou de la bavure. Ensuite, à l’aide d’un tournevis, insérez la vis à peu près à mi-chemin dans le crâne. Maintenant, disséquez brutalement une poche sous-cutanée le long de l’arrière du cou pour enrouler lâchement environ 10 centimètres de fil. Coupez tout excès de fil et dénudez l’isolant de la pointe, en étirant le fil. Pour créer une boucle à l’extrémité du fil exposé, faites un nœud en laissant une petite boucle. Placez la boucle sur la vis et serrez la vis sur le crâne, en vous assurant que le fil entre en contact avec la vis. Positionnez le fil de terre à gauche et le fil d’enregistrement à droite. Maintenant, fixez les vis et les fils au crâne à l’aide d’acrylique dentaire. Enfin, injectez de la bupivacaïne par voie sous-cutanée à chaque site d’incision pour soulager la douleur. Et couvrez chaque incision avec une petite quantité de colle pour la peau. Une fois que tous les fils sont en place, évaluez les signaux de télémétrie à l’aide d’un logiciel d’analyse pour vérifier la fidélité du signal. Attendez-vous à ce que les signaux EEG apparaissent à faible amplitude pendant que le kit est sous sédation. La chirurgie implantaire a été réalisée avec succès sur 15 petits de lapin, dont 12 ont survécu jusqu’au point final expérimental. Les enregistrements télémétriques immédiatement après le retour des kits dans les cages domestiques ont montré des signaux EEG de faible amplitude, qui se sont améliorés à mesure que les kits se remettaient de l’anesthésie. La morphologie du signal ECG a légèrement changé dans les premiers jours suivant l’intervention en raison de la cicatrisation et de la stabilisation du fil. Mais dans l’ensemble, la qualité du signal est restée robuste au fil du temps. Le système de télémétrie implanté a permis d’enregistrer plusieurs biopotentiels, notamment l’électroencéphalographie, la température, l’accélération, l’électrocardiographie et la qualité du signal.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
04:27
Related Videos
3.2K Views
03:24
Related Videos
2.6K Views
10:25
Related Videos
6.5K Views
08:36
Related Videos
980 Views
07:03
Related Videos
10.3K Views
07:54
Related Videos
21.7K Views
08:30
Related Videos
18.6K Views
09:56
Related Videos
11.8K Views
04:16
Related Videos
14.1K Views
07:58
Related Videos
7.8K Views