מודל פרה קליני, עכברי של גרורות בכבד מבוצע באמצעות טכניקת הזרקת hemispleen.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
במאמר זה
סיכום
תקציר
מודלים עכבריים רבים פותחו כדי ללמוד סרטן בבני אדם ולקדם את ההבנה של טיפול בסרטן ובפיתוח. כאן, מודל פרה קליני, עכברי לבלב גידול של גרורות בכבד באמצעות הזרקת hemispleen של תאים סרטניים syngeneic עכבריים לבלב מתואר. מודל זה מחקה רב של המצבים הקליניים בחולים עם מחלה גרורתית בכבד. עכברים לפתח באופן עקבי גרורות בכבד ומאפשר לחקירה של התהליך גרורתי, בדיקת טיפול ניסיוני, ומחקר אימונולוגיה גידול.
מבוא
אדנוקרצינומה ductal הלבלב (PDA) הוא הגורם המוביל הרביעי של מקרי מוות מסרטן הקשורים בארצות הברית 1. ההישרדות של חמש שנים עבור חולים עם מחשב כף יד גרורתי היא 2-12 1%. למרות שטיפול כימותרפי אדג'וונטי וneoadjuvant לסרטן לבלב הוא יעיל יותר היום מאשר אי פעם, עדיין נותר צורך נואש בטיפולים חדשניים.
פיתוח תרופות חדשניות מחייב מודלים של בעלי חיים פרה קליניים אמין. למרות שהמודלים של גידול תת עורי הם קלים לשימוש, חסרונות כוללים את חוסר היכולת של גידולים אלה לשלוח גרורות ולחקות את התקדמות הגידול וmicroenvironments ראתה בסרטן בבני אדם. מודלים מהונד....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
כל הניסויים בבעלי החיים תאמו את הנחיות ועדת הטיפול ושימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת ג'ונס הופקינס, ובעלי חיים נשמרו בהתאם להנחיות של האגודה להערכה והסמכה של מעבדה טיפול (AAALAC). ההליך כירורגי מבוצע בתנאים סטריליים בחדר ניתוח שעובר מינימום של חמישה עשר החלפות אוויר בשעה. כל המכשירים הם מעוקרים ידי המעוקר לפני ההליך ושוב עם 70% אתנול בין כל עכבר במהלך ההליך. כל העכברים לא צפויים לשרוד את ההליך כירורגי מורדמים תחת CO 2 למשך 3 דקות ואחריו נקע בצוואר הרחם ועדיין תחת הרדמה.
.1 תא הכנה
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
תאי גידול Panc02 מוזרקים לתוך hemispleen (איור 1) גרורות בכבד טופס בעכברי 100%, ואילו גרורות ריאות והצפק לא ציינו אם הטכניקה מבוצעת בצורה נכונה. טכניקה זו שבוצעה על יותר ממאה עכברים באמצעות תאי Panc02 בניסויים מרובים, עצמאיים, וreproducibly, כל עכברים שלא טופלו למות עם גרורות בכבד בין 30 60 ימים לאחר הליך hemisplenectomy (איור 2). כדי להשיג מובהקות סטטיסטיות בין הקבוצות שלא טופלו ומטופלים, עשרה עכברים בכל קבוצה יש צורך. עם זאת, מספר זה ישתנה ביחס .......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
מודל זה פרה קליני עכברי של גרורות בסרטן לבלב בכבד באמצעות טכניקת הזרקת hemispleen הוא הדגם הראשון שתואר, שמשקף רבים של מצבים הקליניים ואימונולוגיים של חולים עם מחלה גרורתית בכבד. מודל זה מציע מספר יתרונות על פני מודלים עכבריים אחרים. ראשית, בניגוד למודלים מהונדסים של סרטן לבלב שבו רק 30% מהעכברים לפתח גרורות בכבד והעיתוי של היווצרות גרורות משתנים מאוד, מודל זה מציע את היתרון של גרורות קבלת באופן עקבי בכבד בעכברים 100% ב זמן אחיד, מאפשר לחוקרים ללמוד מחלה גרורתית בהגדרה זו. בנוסף, .......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
אי לנו קונפליקטים רלוונטיים של עניין לחשוף.
תודות
KF וKO הם שיתוף המחברים הראשונים יחד עם KS
עבודה זו נתמכה בחלקה על ידי AHPBA המלגה (KS), NIH K23 CA148964-01 (LZ), בית הספר לרפואה ג'ונס הופקינס קליני פרס המדען (LZ), Viragh קרן והמרכז דלג Viragh סרטן הלבלב באוניברסיטה ג'ונס הופקינס (EMJ ו LZ), הקרן הלאומית ללבלב (LZ), Lefkofsky קרן המשפחה (LZ), SPORE NCI בCA062924 P50 הסרטן במערכת העיכול (EMJ, LZ), הקרן לוסטגרטן (LZ), ומענקי סול גולדמן לבלב מרכז הסרטן (KS , BHE, LZ).
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| המדיה והרכיבים | ישתנו בהתאם לקו התאים | ||
| פוספט חוצץ | מלח Gibco by Life Technologies | 10010-023 | |
| 15 מ"ל צינורות צנטריפוגה | קורנינג | 430052 | |
| מספריים הפעלה מעוקלים | Roboz חנות כירורגית | RS-6835 | |
| מיקרו ניתוח מלקחיים Graefe | Roboz חנות כירורגית | RS-5130 | |
| מחזיק מחט (רגיל) | World Precision Instruments, Inc | ||
| 3-0 או 4-0 תפר | באדיבות מחלקת הכירורגיה, ג'ונס הופקינס | ||
| Weck Horizon Open Ligating Clip Applier, | טלפלקס | 137085 | |
| Weck Horizon Open Ligating Clip Applier, בינוני, זוויתי | טלפלקס | 237115 | |
| תפסי קשירה בינוניים של Weck Horizon | Teleflex | 002200 | |
| Weck Horizon קליפס קשירה קטן | מזרק Teleflex | 001200 | |
| , 1 סמ"ק, מזרק TB, קצה החלקה 3/8 אינץ' | Becton Dickinson | 309625 | |
| , 1 סמ"ק, מזרק TB, קצה החלקה 5/8 אינץ' | Becton Dickinson | 309597 | |
| 9 מ"מ Autoclip Applier | Mikron | 427630 | |
| 9 מ"מ Autoclip | Becton Dickinson | 427631 | |
| כרית חימום | Sunbeam | CAT93 | |
| 70% אתנול | נמכר על ידי ספקים רבים | ||
| קטמין הידרוכלוריד | Hospira | 22395DD | |
| קסילזין הידרוכלוריד | סיגמא | X1251 |
מקורות
- American Cancer Society. Cancer Facts & Figures. , American Cancer Society. Atlanta. (2013).
- Clark, C. E., Beatty, G. L., Vonderheide, R. H. Immunosurveillance of pancreatic adenocarcinoma: insights from genetically engineered mouse models of cancer. Cancer letters. 279, 1-7 (2009).
- Rhim, A. ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
